转基因技术精子介导法简介

精子介导的基因转移是把精子作适当处理后,使其具有携带外源基因的能力。然后,用携带有外源基因的精子给发情母畜授精。在母畜所生的后代中,就有一定比例的动物是整合外源基因的转基因动物。 同显微注射方法相比,精子介导的基因转移有两个优点:首先是它的成本很低,只有显微注射法成本的1/10。其次,由于它不涉及对动物进行处理,因此,可以用生产牛群或羊群进行实验,以保证每次实验都能够获得成功。......阅读全文

转基因技术精子介导法简介

  精子介导的基因转移是把精子作适当处理后,使其具有携带外源基因的能力。然后,用携带有外源基因的精子给发情母畜授精。在母畜所生的后代中,就有一定比例的动物是整合外源基因的转基因动物。  同显微注射方法相比,精子介导的基因转移有两个优点:首先是它的成本很低,只有显微注射法成本的1/10。其次,由于它不

农杆菌介导法简介

  农杆菌是普遍存在于土壤中的一种革兰氏阴性细菌,它能在自然条件下趋化性地感染大多数双子叶植物的受伤部位 [1] ,并诱导产生冠瘿瘤或发状根。根癌农杆菌和发根农杆菌中细胞中分别含有Ti质粒和Ri质粒,其上有一段T-DNA,农杆菌通过侵染植物伤口进入细胞后,可将T-DNA插入到植物基因组中。因此,农杆

简述转基因植物的农杆菌介导法

  农杆菌的Ti质粒可以作为载体。Ti质粒上有两个区域,一个是T-DNA区,这是能够转移并整合进植物受体的区段;另一个是Vir区,它编码实现质粒转移所需的蛋白质。将待转化的外源基因先克隆在大肠杆菌质粒上,然后将此质粒转入不会引起冠瘿瘤的农杆菌(这种菌的Ti质粒已除去了T-DNA),使外源基因通过同源

转基因技术简介

  转基因技术的理论基础来源于进化论衍生来的分子生物学。基因片段的来源可以是提取特定生物体基因组中所需要的目的基因,也可以是人工合成指定序列的基因片段。基因片段被转入特定生物中,与其本身的基因组进行重组,再从重组体中进行数代的人工选育,从而获得具有稳定表现特定的遗传性状的个体。该技术可以使重组生物增

转基因技术农杆菌介导转化方法的介绍

  农杆菌是普遍存在于土壤中的一种革兰氏阴性细菌,它能在自然条件下趋化性地感染大多数双子叶植物的受伤部位,并诱导产生冠瘿瘤或发状根。根癌农杆菌和发根农杆菌中细胞中分别含有Ti质粒和Ri质粒,其上有一段T-DNA,农杆菌通过侵染植物伤口进入细胞后,可将T-DNA插入到植物基因组中。  因此,农杆菌是一

转基因技术核移植转基因法

  体细胞核移植是一种转基因技术。该方法是先把外源基因与供体细胞在培养基中培养,使外源基因整合到供体细胞上,然后将供体细胞细胞核移植到受体细胞——去核卵母细胞,构成重建胚,再把其移植到假孕母体,待其妊娠、分娩,便可得到转基因的克隆动物。

抗精子抗体介导不育的再认识

朱伟杰,暨南大学生命科学技术学院生殖免疫研究所 精子的抗原性早在100多年前已被科学家所发现。奥地利学者Landsteiner和俄国学者Metchnikoff于1899年各自独立试验,将豚鼠精子同种免疫,证实了精子具有抗原性并能诱发出特异性抗体,而且抗体能够抑制精子运动。1959年荷兰学者Rümke

转基因技术的发展历史简介

  1974年,波兰遗传学家斯吉巴尔斯基(Waclaw Szybalski)称基因重组技术为合成生物学概念,1978年,诺贝尔医学奖颁给发现DNA限制酶的纳森斯(Daniel Nathans)、亚伯(Werner Arber)与史密斯(Hamilton Smith)时,斯吉巴尔斯基在《基因》期刊中写

转基因技术基因枪法简介

  利用火药爆炸或高压气体加速(这一加速设备被称为基因枪),将包裹了带目的基因的DNA溶液的高速微弹直接送入完整的植物组织和细胞中,然后通过细胞和组织培养技术,再生出植株,选出其中转基因阳性植株即为转基因植株。与农杆菌转化相比,基因枪法转化的一个主要优点是不受受体植物范围的限制。而且其载体质粒的构建

转基因技术核显微注射法简介

  核显微注射法是动物转基因技术中最常用的方法。它是在显微镜下将外源基因注射到受精卵细胞的原核内,注射的外源基因与胚胎基因组融合,然后进行体外培养,最后移植到受体母畜子宫内发育,这样分娩的动物体内的每一个细胞都含有新的DNA片段。-这种方法的缺点是效率低、位置效应(外源基因插入位点随机性)造成的表达

农杆菌介导法概述

  农杆菌介导法起初只被用于双子叶植物中,农杆菌的介导转化在一些单子叶植物(尤其是水稻)中也得到了广泛应用。此外,生物技术学家还可以通过发根农杆菌转化,在液体培养基中培养高密度的根,作为一种在转基因植物中获得大量蛋白质的方法。  农杆菌Ti质粒的T-DNA可高效率地整合到植物受体细胞的染色体上并得到

补体介导的细胞毒实验——补体介导法

细胞毒实验可应用于:(1)检查细胞膜抗原;(2)鉴定抗体的特异性。实验方法原理带有特异抗原的靶细胞(如正常细胞、肿瘤细胞、病毒感染细胞)与相应抗体结合后,在补体的参与下,引起靶细胞膜损伤,导致细胞膜的通透性增加、细胞死亡。染料(例如:伊红-Y、台盼蓝)可通过细胞膜进入细胞内使细胞着色,故可用于指示死

精子爬高试验的简介

  精子爬高试验是测定精子活动速度的一项试验。此项检查能客观地反映精子的活动力,对判断男性生育能力很有帮助,方法亦较简单,但操作时需有对照试验,以便相互比较。

环介导等温扩增反应(LAMP)-基因诊断技术及简介

PCR方法在人类及动植物疾病基因诊断、食品分析和环境监测等领域发挥着举足轻重的作用,其灵敏度高、特异性好,是目前最精准的基因诊断方法。然而PCR方法操作起来较复杂,对仪器和人员要求比较高,不适合基层或现场快速诊断,因此在国内的推广速度并不是很快。2000年日本学者Notomi在Nucleic Aci

精子的“N种死法”

 据一个已经成功约会到卵妹子的小精子回忆,它和2.5亿的兄弟们一起出生,大家在蛋蛋里时都是过了命的好兄弟,出了蛋蛋却变成了陌路人。寻找卵妹子的旅途崎岖坎坷,每个精子都拼了命的使出浑身解数。虽然它最终成了那个幸运儿,但还是时常挂念着其他的兄弟们,不知道它们在哪里,过得是否还好。   哎,小编真是不忍心

精子导入法的方法过程

利用精子作为外源基因载体,借助受精作用把外源基因导入受精卵,整合到受精卵的基因组中,称之为精子载体导入法,是构建转基因动物的一种新尝试。该法简单、方便,依靠生理受带过程,免去了对原核的损伤。但在实践中成功率较低,对于精子是否可作为外源DNA载体也存在争论。这项技术尚处在探索阶段。该法可以将人工授精、

转基因动物技术

  从20世纪70年代中期开始,就有人尝试用各种办法向动物体内转移外源基因。如将牛奶成分中特有的基因转移到白鼠体内,这些外来基因在白鼠体内重组后,白鼠分泌的乳汁便含有牛奶成分。这种通过人工方法获得外来基因的白鼠,称为转基因鼠。   转基因动物技术的核心,是把遗传的功能单位──基因转移到动物体内,

转基因动物技术概述

从20世纪70年代中期开始,就有人尝试用各种办法向动物体内转移外源基因。如将牛奶成分中特有的基因转移到白鼠体内,这些外来基因在白鼠体内重组后,白鼠分泌的乳汁便含有牛奶成分。这种通过人工方法获得外来基因的白鼠,称为转基因鼠。 转基因动物技术的核心,是把遗传的功能单位──基因转移到动物体内,使它成为动物

脂质体介导DNA转染法

脂质体(LR)试剂是阳离子脂质体DOTMA和DOPE的混合物(1:1)。它适用于把DNA转染入悬浮或贴壁培养细胞中,是目前条件下最方面的转染方法之一。转染率高,优于磷酸钙法,比它高5-100倍,能把DNA和RNA转染到各种细胞。用LR进行转染时,首先需要优化转染条件,应找出该批LR对转染某一特定细胞

精子果糖测定的简介

  精液中的果糖是血糖通过酶促转化而产生,由精囊腺所分泌。它是精子活动的能源。精子轴丝收缩依赖ATP供能量,而ATP可由果糖分解代谢产生,故精浆果糖浓度减低将使精子活动力减弱,影响受精率。由于精囊腺对雄激素的刺激十分敏感,并且果糖的分泌受雄激素的控制,因此精液果糖浓度作为间接衡量睾酮活性的指标,果糖

农杆菌介导法的过程介绍

  根癌农杆菌的Ti质粒上有一段转移DNA(T-DNA),具有向植物细胞传递外源基因的能力,而细菌本身并不进入受体细胞。农杆菌转化植物细胞涉及一系列复杂的反应,主要包括:①受伤的植物细胞为修复创伤部位,释放一些糖类、酚类等信号分子。  ②在信号分子的诱导下,农杆菌向受伤组织集中,并吸附在细胞表面。 

建立“人造精子”介导高效产生点突变小鼠的新方法

  近日,中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所李劲松研究组和第二军医大学附属长征医院袁文课题组的最新研究成果Efficient generation of the mouse model with a defined point mutation Through haploid c

环介导等温扩增反应(LAMP)-基因诊断技术及产品简介

  PCR方法在人类及动植物疾病基因诊断、食品分析和环境监测等领域发挥着举足轻重的作用,其灵敏度高、特异性好,是目前最精准的基因诊断方法。然而PCR方法操作起来较复杂,对仪器和人员要求比较高,不适合基层或现场快速诊断,因此在国内的推广速度并不是很快。   2000年日本学者Notomi在Nucle

环介导等温扩增反应(LAMP)-基因诊断技术及产品简介

  PCR方法在人类及动植物疾病基因诊断、食品分析和环境监测等领域发挥着举足轻重的作用,其灵敏度高、特异性好,是目前最精准的基因诊断方法。然而PCR方法操作起来较复杂,对仪器和人员要求比较高,不适合基层或现场快速诊断,因此在国内的推广速度并不是很快。   2000年日本学者Notomi在Nucle

核自身抗原精子蛋白的简介

  核自身抗原精子蛋白(Nuclear autoantigenic sperm protein,NASP)是一种组蛋白的分子伴侣,它是DNA复制、细胞周期进行以及细胞增殖所必须的蛋白质。它在细胞质中与热休克蛋白HSP90和组蛋白H1形成蛋白质复合体并激活HSP90的ATP水解酶活性。随后,HSP90

环介导等温扩增技术原理

环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification),是一个比较公认的等温扩增方法,现如今等温扩增法很多,比如RCA,NASBA,RPA...如果可以,你可以参考这篇文献:Loop-mediated isothermal amplification inte

LAMP(环介导等温扩增)技术

PCR方法在人类及动植物疾病基因诊断、食品分析和环境监测等领域发挥着举足轻重的作用,其灵敏度高、特异性好,是目前最精准的基因诊断方法。然而PCR方法操作起来较复杂,对仪器和人员要求比较高,不适合基层或现场快速诊断,因此在国内的推广速度并不是很快。2000年日本学者Notomi在Nucleic Aci

病毒介导基因转移技术介绍

病毒介导基因转移:前述的化学和物理方法都是通过传染方式基因转移。病毒介导基因转移(viral mediatedgene transfer)是通过转换方式完成基因转移,即以病毒为载体(vector),将外源目的基因通过基因重组技术,将其组装于病毒上,让这种重组病毒去感染受体宿主细胞,这种病毒称为病毒运

亲和色谱法的技术简介

亲和色谱法( affinity chromatography),将相互间具有高度特异亲和性的二种物质之一作为固定相,利用与固定相不同程度的亲和性,使成分与杂质分离的色谱法。