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简述转基因植物的农杆菌介导法

农杆菌的Ti质粒可以作为载体。Ti质粒上有两个区域,一个是T-DNA区,这是能够转移并整合进植物受体的区段;另一个是Vir区,它编码实现质粒转移所需的蛋白质。将待转化的外源基因先克隆在大肠杆菌质粒上,然后将此质粒转入不会引起冠瘿瘤的农杆菌(这种菌的Ti质粒已除去了T-DNA),使外源基因通过同源重组整合在Ti质粒上;然后用带有外源基因的这种农杆菌去转化植物细胞,将外源基因转入植物细胞的基因组。......阅读全文

简述转基因植物的农杆菌介导法

  农杆菌的Ti质粒可以作为载体。Ti质粒上有两个区域,一个是T-DNA区,这是能够转移并整合进植物受体的区段;另一个是Vir区,它编码实现质粒转移所需的蛋白质。将待转化的外源基因先克隆在大肠杆菌质粒上,然后将此质粒转入不会引起冠瘿瘤的农杆菌(这种菌的Ti质粒已除去了T-DNA),使外源基因通过同源

农杆菌介导水稻转化

实验概要本实验介绍了农杆菌介导的水稻转化。主要试剂GUS染色液:100 mmol/L NaPO4 (pH7.0);0.1% Triton X-100;10 mmol/L EDTA;0.5 mmol/L亚铁氰化钾头抱霉素,乙醇,次氯酸钠溶液主要设备高速离心机,培养箱,人工气候室实验材料水稻种子实验步骤

农杆菌介导转化拟南芥

实验概要1. 学习真核生物的转基因技术及农杆菌介导的转化原理。2. 掌握农杆菌介导转化拟南芥 的实验方法,了解拟南芥的生理特点及在基因工程实验中应用实验原理拟南芥(Arabidopsis thaliana)是一种十字花科植物,二年生草本,高7~40厘米,花期3~5月。广泛用于植物遗传学、发育生物学和

农杆菌介导的遗传转化程序

实验概要农杆菌侵染实验实验步骤(1) 农杆菌菌液的制备  将农杆菌接种于附加50mg/L Km、50mg/L Sm、50mg/L Rif的YEB固体培养基上,28℃暗培养,至长出单菌落。用接菌环挑取单菌落,接种在5mL含相应抗生素的YEB液体培养基中,于28℃,200r/min 培养过夜。待

农杆菌介导的植物遗传转化

实验概要 以烟草叶片为材料,与对数生长期的带有外源基因的农杆菌共培养,遗传转化烟草叶片,筛选抗性再生植株。掌握共培养过程关键技术环节及转基因植株的筛选。 主要试剂 70%乙醇 0.1% HgCl2 无菌水 卡那霉素(kan) 羧苄青霉素(Cb) 培养基:LB培养基100ml;MS

农杆菌介导的植物遗传转化

农杆菌介导的植物遗传转化   【目的】:学习和掌握共培养过程关键技术环节及转基因植株的筛选。   【要求】:以烟草叶片为材料,与对数生长期的带有外源基因的农杆菌共培养,遗传转化烟草叶片,筛选抗性再生植株。   【内容】:1、烟草无菌苗的准备  2、带有外源基因农杆菌的培养  

农杆菌介导的植物遗传转化

农杆菌介导的植物  遗传转化   【目的】:学习和掌握共培养过程关键技术环节及转基因植株的筛选。   【要求】:以烟草叶片为材料,与对数生长期的带有外源基因的农杆菌共培养,遗传转化烟草叶片,筛选抗性再生植株。   【内容】:1、烟草无菌苗的准备   2、带有外源基因农杆菌的培养   3、烟草叶片与对

根癌农杆菌介导的植物转化-叶盘转化法

一、原理以根癌农杆菌介导的遗传转化是目前最有效的途径之一。根癌农杆菌对植物释放的化学物质产生趋化反应,向植物受伤组织集中。经共培养后,受伤部位的化学诱导物透过农杆菌的细胞膜使Ti质粒上的Vir基因活化。Vir基因产物使Ti质粒上的T-DNA进入植物细胞,并整合到植物核基因组中。插入在T-DNA左右边

农杆菌介导的大麦转化方法实验

实验材料 植物凝胶pBract 质粒pSoup 质粒 试剂、试剂盒 利福平卡那霉素 仪器、耗材 MG L 培养基 实验步骤 1. 组织培养基的准备 提前准备好所需浓度 2 倍的植物凝胶,高压灭菌(见注 3 ) 。所有的组织培养基都要过滤灭菌,因此除了

农杆菌介导的大麦转化方法实验

实验材料:植物凝胶                                                                  pBract 质粒