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常用生化试剂作用

1.蛋白酶K:能水解消化蛋白质,特别是与DNA结合的组蛋白。再尿素和SDS中稳定。一般工作浓度是50—100μg/ml,推荐反应缓冲液:50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2。2.SDS:十二烷基硫酸钠. 溶解细胞膜上的脂类与蛋白质,因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜,并解离细胞中的核蛋白,SDS 还能与蛋白质结合而沉淀3.IPTG 异丙基-β-D-硫代半乳糖苷, 常用于蓝白斑筛选及IPTG诱导的细菌内的蛋白表达等. IPTG和乳糖的结构相似,所以它和乳糖一样,可以与乳糖操纵元的阻遏蛋白结合,使阻遏蛋白的空间构像变化,四聚体解聚成单体,失去与操纵子特异性结合的能力,从而解除了阻遏蛋白的作用,使其后的基因得以转录合成利用乳糖的酶类。与乳糖不同的是,IPTG不被 β-半乳糖苷酶水解。常与X-GAL一起用于蓝白斑筛选。作用极强的诱导剂,不被细菌代谢而十分稳定4.......阅读全文

气相色谱仪柱前衍生化的常见方法

  衍生化技术是通过化学反应将样品中难于分析检测的目标化合物定量的转化为另一种易于分析检测的化合物,通过后者的分析检测可以对目标化合物进行定性和定量分析。  一、柱前衍生化的条件  首先,如果要是想在色谱中使用柱前衍生化,其衍生化反应应该满足以下几个条件:  1、反应能迅速、定量的进行,反应重复性好

气相色谱中常用的柱前衍生化方法

1.硅烷化衍生化方法    硅烷化衍生化方法是气相色谱样品处理中应用最多的方法,它是利用质子性化合物(如醇,酚,酸,胺,硫醇等)与硅烷化试剂反应,形成挥发性的硅烷衍生物,一般反应式为       &n

半自动生化分析仪故障维修几例

生化分析是临床诊断常用的重要手段之一。通过对血液和其他体液生化分析测定的数据,再结合其他临床资料进行综合分析,可帮助诊断疾病,对器官功能作出评价,并可鉴别并发因子及决定以后治疗的基准等等。自动生化分析仪就是把生化分析中的取样、加试剂、去干扰物、混合、保温反应,P检测、结果计算和显示,以及清洗等步聚自

细胞破碎仪的机械破碎技术

细胞破碎仪的破碎技术是怎样的?在生物产物的分离提取中,如果目标物质为胞外产物(如霉菌产生的糖化酶等),其提取过程较简单,只需直接进行固液分离,获得澄清的滤液,再进行分离纯化操作;如果目标物质为胞内产物或多细胞生物组织中的各种生物分子(如碱性磷酸酶等胞内酶、部分外源基因表达产业或植物细胞产物等),都需

溶菌酶的制备、纯化和鉴定

实验概要制备、纯化和鉴定溶菌酶实验原理溶菌酶,全称为1,4-β-N-溶菌酶,又称粘肽N-乙酰基胞壁酰水解酶,属于α-乳白蛋白家族。人们对溶菌酶的研究始于上世纪初,英国细菌学家Fleming发现人的唾液、眼泪中存在有溶解细菌细胞壁的酶,因其具有溶菌作用,故命名为溶菌酶;此后人们在微生物、植物、无脊椎动

蛋白质中氨基酸外消旋化修饰非特定位点分析方法研究

  王佳凤1,2,王生伟3*,李博1,2**,狄斌1,2  (中国药科大学药学院药物代谢研究中心,江苏 南京 210009)  *通讯作者:刘李,教授  [摘要]  近年来研究发现体内维生素 A 类物质(包括视黄醇、视黄醛和视黄酸)在糖尿病的发生发展中起到重要的调节作用,视黄酸是维生素 A 在体内的

氨基酸的检测方法

  迄今为止,自然界中已发现180多种氨基酸,其中参与蛋白质合成的氨基酸只有20多种,称为基本氨基酸。氨基酸主要有两种存在形式,一种是以游离态存在于生理体液(血浆、尿)、食品(酒、饮料)中,另一种是以结合态存在于肽和蛋白质中。由于氨基酸分析在蛋白质化学、生物化学、食品科学、临床医学等领域的研究中起着

TBA-40FR生化分析仪维修故障分析实例与保养

分析是临床诊断常用的重要手段之一,通过对和其他生化分析测定的数据,再结合其他临床资料进行综合分析,可帮助诊断疾病,对器官功能作出评价,并可鉴别并发因子及决定以后治疗的基准等等。自动就是把生化分析中的取样、加试剂、去干扰物、混合,保温反应,检测,结果计算和显示,以及清洗等步骤自动化的。它不仅提高了工作

自动生化分析仪故障维修几例

生化分析是临床诊断常用的重要手段之一。通过对血液和其他体液生化分析测定的数据,再结合其他临床资料进行综合分析,可帮助诊断疾病,对器官功能作出评价,并可鉴别并发因子及决定以后治疗的基准等等。自动生化分析仪就是把生化分析中的取样、加试剂、去干扰物、混合、保温反应,P检测、结果计算和显示,以及清洗等步聚自

浅论医用生化分析仪的常见故障及维修方法

生化分析是临床诊断常用的重要手段之一。通过对血液和其他体液生化分析测定的数据,再结合其他临床资料进行综合分析,可帮助诊断疾病,对器官功能作出评价,并可鉴别并发因子及决定以后治疗的基准等等。自动生化分析仪就是把生化分析中的取样、加试剂、去干扰物、混合、保温反应,p检测、结果计算和显示,以及清洗等步聚自

自动生化分析仪故障维修几例

 生化分析是临床诊断常用的重要手段之一。通过对血液和其他体液生化分析测定的数据,再结合其他临床资料进行综合分析,可帮助诊断疾病,对器官功能作出评价,并可鉴别并发因子及决定以后治疗的基准等等。自动生化分析仪就是把生化分析中的取样、加试剂、去干扰物、混合、保温反应,P检测、结果计算和显示,以及清洗等步聚

气相色谱-质谱联用中常用的衍生化方法

在GC-MS方法分析实际样品时,对羟基、胺基、羧基等官能团进行衍生化往往起着十分重要的作用。主要有以下一些益处:①改善了待测物的气相色谱性质。待测物中一些极性较大的基团的存在,如羟基、羧基等气相色谱特性不好,在一些通用的色谱柱上不出峰或峰拖尾,衍生化以后,情况改善。②改善了待测物的热稳定性。某些待测

气相色谱-质谱联用中常用的衍生化方法

在GC-MS方法分析实际样品时,对羟基、胺基、羧基等官能团进行衍生化往往起着十分重要的作用。主要有以下一些益处:①改善了待测物的气相色谱性质。待测物中一些极性较大的基团的存在,如羟基、羧基等气相色谱特性不好,在一些通用的色谱柱上不出峰或峰拖尾,衍生化以后,情况改善。②改善了待测物的热稳定性。某些待测

手性分离色谱

是采用色谱技术(TLC、GC和HPLC)分离测定光学异构体药物的有效方法。由于许多药物的对映体(Enantiomer)之间在药理、毒理乃至临床性质方面存在着较大差异,有必要对某些手性药物进行对映体的纯度检查。(一)原理和方法:对映体化合物之间除了对偏振光的偏转方向恰好相反外,其理化性质是完全相同的,

实验室化学试剂分类存放有多重要?

  要进行任何实验都离不了试剂,试剂不仅有各种状态,而且不同的试剂其性能差异很大。有的常温非常安定、有的通常就很活泼,有的受高温也不变质、有的却易燃易爆,有的香气浓烈,有的则剧毒。只有对化学试剂的有关知识深入了解,才能安全、顺利进行各项实验。既可保证达到预期实验目的,又可消除对环境的污染。

顶空固相微萃取检测水中酚类的条件优化应用

响应曲面法在乙酰化_顶空固相微萃取检测水中酚类的条件优化应用摘要: 建立了水中酚类化合物的原位乙酰化- 顶空固相微萃取/气相色谱- 质谱联用测定方法,并采用响应曲面法中的中心组合设计对实验进行过程优化,选取经单因子实验证实为非单调变化的连续变量,即衍生化试剂(乙酸酐)、衍生化助剂(Na2HPO4)以

气相色谱PK液相色谱

气相和液相是有机检测的两大基本仪器,占据着有机实验室的统治地位,虽然同做有机检测,但就两个仪器本身也有着较大区别,小析姐从以下5个方面进行了比较。 气相色谱是二十世纪五十年代出现的一项重大科学技术成就。这是一种新的分离、分析技术,它在工业、农业、国防、建设、科学研究中都得到了广泛应用。同为色谱技

气相色谱PK液相色谱

气相和液相是有机检测的两大基本仪器,占据着有机实验室的统治地位,虽然同做有机检测,但就两个仪器本身也有着较大区别,小析姐从以下5个方面进行了比较。气相色谱是二十世纪五十年代出现的一项重大科学技术成就。这是一种新的分离、分析技术,它在工业、农业、国防、建设、科学研究中都得到了广泛应用。同为色谱技术之一

详解单克隆抗体的制备过程

 单克隆技术又名杂交瘤技术。由G.KÖhler和Milstein1975年创立。主要原理是利用产生抗体的B细胞与肿瘤细胞杂交融合成杂交瘤细胞,生产抗体。 单克隆抗体的制备过程主要有以下六个环节,具体为抗原指标、免疫动物选择、免疫程序的确定、免疫、细胞杂交与选择培养。下面详细介绍单

气相色谱-质谱联用技术讲解

  转眼一周过半,继续与小伙伴们分享专业技术知识。今天分享的话题是有关气相色谱-质谱联用技术的,今天推送的主要内容有——  仪器系统|一  (一)GC-MS系统的组成  气质联用仪是分析仪器中较早实现联用技术的仪器。自1957年霍姆斯和莫雷尔首次实现气相色谱和质谱联用以后,这一技术得到长足的发展。在

细菌的药物敏感性实验(一)

药物敏感试验简称药敏试验(或耐药试验)。旨在了解病原微生物对各种抗生素的敏感(或耐受)程度,以指导临床合理选用抗生素药物的微生物学试验。 一种抗生素如果以很小的剂量便可抑制、杀灭致病菌,则称该种致病菌对该抗生素“敏感”。反之,则称为“不敏感”或“耐药”。为了解致病菌对哪种抗菌素敏感,以合理

离子色谱仪介绍与发展现状

离子色谱仪介绍与发展现状   1975年,Small等人用电导检测器的连续检测柱流出物获得成功,标志着离子色谱法的诞生。经过近三十年的发展,离子色谱法(IC)已经成为分析离子性物质的常用方法。我国*代离子色谱仪于1983年6月通过了专家鉴定。离子色谱仪与一般的液相色谱仪一样,由输液系统、进

离子色谱仪的发展现状

1975年,Small等人用电导检测器的连续检测柱流出物获得成功,标志着离子色谱法的诞生。经过近三十年的发展,离子色谱法(IC)已经成为分析离子性物质的常用方法。我国*代离子色谱仪于1983年6月通过了专家鉴定。离子色谱仪与一般的液相色谱仪一样,由输液系统、进样系统、分离系统和检测系统构成。本文主要

液相色谱仪分析样品的预处理方法

液相色谱仪分析样品的预处理方法有过滤、离心、加速溶剂萃取、超临界流体萃取、固相萃取、固相微萃取、液相微萃取和衍生化等。一、过滤:常用的滤膜材质有纤维素、聚四氟乙烯和聚酰胺。其中聚酰胺应用最广,是亲水材料,适合水溶液的过滤,不被HPLC常用溶剂所腐蚀,不含添加剂。二、加速溶剂萃取:1、原理:加速溶剂萃

第二十八期质谱沙龙活动报道

  三种新型抗胆碱能药物 立体选择性动力学与代谢研究 军事医学科学院 李敬来老师   接下来,来自军事医学科学院毒物药物研究所的李敬来老师,为大家作了题为《三种新型抗胆碱能药物 立体选择性动力学与代谢研究》的报告。李敬来老师,分别从研究背景、研究目的、研究结果三大方面

高效液相色谱仪分析样品的预处理方法

  高效液相色谱仪分析样品的预处理方法有过滤、离心、加速溶剂萃取、超临界流体萃取、固相萃取、固相微萃取、液相微萃取和衍生化等。  一、过滤:  常用的滤膜材质有纤维素、聚四氟乙烯和聚酰胺。其中聚酰胺应用最广,是亲水材料,适合水溶液的过滤,不被HPLC常用溶剂所腐蚀,不含添加剂。  二、加速溶剂萃取:

高效液相色谱样品预处理地位

  高效液相色谱仪分析样品的预处理方法有过滤、离心、加速溶剂萃取、超临界流体萃取、固相萃取、固相微萃取、液相微萃取和衍生化等。01过滤  常用的滤膜材质有纤维素、聚四氟乙烯和聚酰胺。其中聚酰胺应用最广,是亲水材料,适合水溶液的过滤,不被HPLC常用溶剂所腐蚀,不含添加剂。  加速溶剂萃取  1、原理

顶空气相色谱法在我国水体分析中的应用

顶空气相色谱法(HS—GC),是测定固体和液体样品中痕量低沸点化合物的重要分析方法,在近年来有着快速的发展,该方法采用气体直接进样,干扰小,在食品,医疗,环境,生物等越来越多的领域有着广阔的应用前景。本文综述了近十年来我国顶空气相色谱法在水体分析检测中的应用,包括了在检测苯系物,卤代烃,含硫挥发物等

细菌的药物敏感性实验

实验材料大肠杆菌试剂、试剂盒普通营养琼脂培养基百病消青霉素蒸馏水酒精仪器、耗材药敏试纸接种环酒精灯打孔器牛津杯移液器滴头青霉素空瓶滤纸接种环培养皿镊子酒精灯温箱不锈钢圆管超净台药物敏感试验简称药敏试验(或耐药试验)。旨在了解病原微生物对各种抗生素的敏感(或耐受)程度,以指导临床合理选用抗生素药物的微

为科研条件服务 30年无怨无悔

——访北京大学生命科学学院刘陇昌老师   【导语】当科学家们攻克一个个难关,点燃科学奥林匹斯山上的圣火时,您是否会记得,有这样一些为科研服务的老师们,他们年复一年、日复一日地帮助科学家们打理科学生产的工具,帮助科学家们更流畅地使用工具