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酶免疫实验的优点和缺点

酶免疫试验之所以能成为临床免疫检验中的主导技术,是与它的方法上的特异性和灵敏性、操作上的简便性以及试剂的稳定性分不开的,还有很重要的一点是,其对环境没有污染威胁。 尽管如此,作为一项免疫检验技术,酶免疫试验还是有其局限性的,不但所检测的生物学体液样本如血清中有可能存在各种干扰实验的因素,而且在实验过程中,影响结果的因素也很多,尤其是进行手工的ELISA测定时。 此外,在定性ELISA测定中,阳性判定值(CUT-OFF)的建立,是在一定的统计学基础上的,相对于某个具体的受检者来说,其有可能并不具备正确性。例如,使用ELISA方法检测抗HCV及抗HIV或HBsAg,有时候,检测所得的阳性结也许并不是真正的阳性,而需要使用其他方法如重组免疫印迹(recombinantimmunoblotas—say,RIBA)、蛋白印迹(Westernbl。t,WB)或中和试验来确认,才能报告阳性。这里抗......阅读全文

酶免疫分析技术进展与自动化

郝繁运   综述 中国误诊学杂志  2007年 第一期  第五次全国中青年检验医学学术会议论文汇编 摘要:本文主要介绍了酶免疫分析的发展现状,从酶免疫分析标记技术若干环节的技术进步、在方法学上与现代化技术的融合与发展、酶免疫分析技

酶联免疫检测技术的应用现状和发展前景

酶联免疫检测技术的应用 真菌毒素的检测:黄曲霉毒素 B 1 、 M 1 以及 T-2 毒素,脱氧雪腐镰刀菌烯醇(呕吐毒素 DON ),二乙酰草镰刀菌烯醇( DAS ),玉米赤霉烯酮,赫曲霉毒素 A ( OA )。 农药的检测:主要有除草剂与杀虫剂两大类,例如杀暝松( FN )、甲

人类免疫缺陷病毒实验室检测技术研究进展

 人类免疫缺陷病毒(HIV)检测的主要目的是用于获得性免疫缺陷综合症(AIDS)即艾滋病的病原体诊断。本文就近年来HIV检测的研究进展综述如下。         1 抗原检测  &

ELISA技术综述

  ELISA原理   ELISA利用抗原抗体之间专一性结合之特性,对标本进行检测;由于结合与固体承载物(一般为塑胶孔盘)上之抗原或抗体仍可具有免疫活性,因此设计 其结合 机制後,配合酵素显色反应,即可显示特定抗原或抗体是否存在,并可利用显色之深浅进行定量分析。根据待测样品与结合机制的不同,ELI

食品过敏原的常见检测技术

  1、免疫学检测技术  之前提到95%的食品过敏原属于蛋白质,因此专门针对蛋白检测的免疫学相关技术是检测食品中蛋白类过敏原的重要手段。其中免疫学检测包括免疫吸附技术、免疫层析技术、免疫传感器技术、免疫扩散技术以及免疫印迹等技术。  免疫吸附技术主要包括酶联免疫吸附技术和放射/酶联吸附抑制实验。酶联

食品过敏原的常见检测技术

  免疫学检测技术  免疫吸附技术主要包括酶联免疫吸附技术和放射/酶联吸附抑制实验。酶联免疫技术是将抗原抗体免疫反应的特异性和酶的高效催化反应有机结合起来的一种检测技术,其原理是被酶标记的抗体与食品过敏原发生反应作用于底物后,其显色深浅能够反映待测样品中过敏原的含量。该技术特异性强,灵敏度高,操作简

病毒实验诊断及质量控制

病毒感染病原学诊断在疾病的预防上可了解流行病学情况,疫苗的免疫效果以及采取及时的免疫措施及必要的隔离和防护,在病毒感染的诊断和治疗上可避免不必要的诊断检查,避免滥用抗生素。对某些病毒疾病可选用有效的抗病毒药物,如用阿糖腺苷或无环鸟苷治疗单母子疱疹脑炎,丙氧鸟苷治疗严重的巨细胞病毒感染,病毒唑雾化吸入

免疫酶细胞化学实验技术

免疫酶细胞化学免疫酶细胞化学是免疫细胞化学(Immunocytochemistry,ICC)中最常用的方法之一,它是在抗原抗体特异反应存在的前提条件下,借助于酶细胞化学的手段,检测某种物质(抗原/抗体)在组织细胞内存在部位的一门新技术:即预先将抗体与酶连结,再使其与组织内特异抗原反应,经细胞化学染色

磁纳米探针检测人绒毛膜促性腺激素

【摘要】  采用链霉亲和素包被磁纳米粒子,将生物素标记的特异性抗体偶联在磁纳米粒子上,制备出高特异性的磁纳米探针;利用此探针对人绒毛膜促性腺激素(HCG)进行测定,建立了定量检测蛋白类激素的化学发光分析方法。利用紫外可见分光光度计、透射电镜及动态检验地带网光散射仪对磁纳米探针进行表征,同时

常规聚丙烯酰胺凝胶电泳实验——检测

实验方法原理常规聚丙烯酰胺凝胶电泳后的检测,对于不同的目的,应采用不同的检测方法。由于这种电泳方法不破坏蛋白质的生物活性,所以可选用的检测方法很多。试剂、试剂盒丙烯酰胺单体贮液Tris-甘氨酸缓冲液贮液电极缓冲液样品缓冲液过硫醆铵浓缩胶缓冲液贮液分离胶缓冲液贮液实验步骤一、早期染色方法用染料和生物大

黄曲霉毒素介绍及检测方法

  黄曲霉毒素主要由黄曲霉菌产生,其他曲霉菌和青霉菌也可产生少许,这些真菌主要寄生于花生、玉米、大米、小麦等谷物及油料。1993年黄曲霉毒素被世界卫生组织(WHO)的癌症研究机构划定为1类致癌物,是一种毒性极强的剧毒物质。   黄曲霉毒素检测通用方法   薄膜层析法和液相色谱法是目前国

化学发光免疫分析技术及其在临床检验中的应用

  临床检验过程中,经常需要检测与分析一系列表征性物质,以此对疾病进行判断[1]。现阶段,化学发光免疫分析技术的应用范围呈现逐渐扩展的趋势,在临床检验中的作用也越来越重要;在化学发光免疫分析技术还未出现之前,免疫技术主要包括:免疫酶技术、放射免疫技术以及免疫荧光技术,由于这三项技术具有的优点与缺点较

农产品质量安全控制与农药残留检测技术

  农产品质量安全标准体系、检测体系、认证体系   1、标准体系:   以农业科学技术和实践经验为基础,运用简化、统一、协调、选优的原理,把先进的科研成果转化为标准,相关的标准按照内在联系,形成标准体系。我国的农产品标准,从无到有,目前已形成了产品、生产技术规程、检验测试等一系列标

ELISA实验所用试剂详解

在临床检验中一般采用商品试剂盒进行测定。ELISA中有三个必要的试剂:免疫吸附剂、结合物和酶的底物等。完整的ELISA试剂盒包含以下各组分:(1)已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂);(2)酶标记的抗原或抗体(结合物);(3)酶的底物;(4)阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),参考标准品和控制

CPSA 2013分会:大分子的生物分析

  2013年4月24~26日,第四届中国上海化学与药物结构分析会议 (CPSA Shanghai 2013)在上海浦东新区淳大万丽酒店召开,来自国际知名药企、跨国大制药公司、中国CRO、生物医药研究所和高校的高管、专家、学者两百余人参加了本次会议。其中在4月25日的分

我国真菌毒素检测市场分析和主要品牌

  受气候、贮藏条件等的影响,我国是世界上被真菌毒素(Mycotoxin)污染最严重的国家之一。真菌毒素是真菌产生的有毒代谢产物,严重危害农业和畜牧养殖业的发展及消费者的身体健康。粮油中常见真菌毒素包括黄曲霉毒素 B1、B2、G1、G2(Aflatoxins,AFB1/ AFB2/ AFG1/ AF

免疫分析中常用封闭剂介绍及选择

在免疫学实验中,通常使用封闭剂来减少非特异性结合。常用的封闭剂有脱脂奶粉,BSA,血清以及 Fab 片段单链二抗等。根据不同的平台选择相应的封闭剂。脱脂奶粉作用原理:脱脂奶粉含有多种蛋白,可以封闭未吸附蛋白的固相载体(WB 膜、ELISA 板等)位点,减少抗体与之结合的概率,避免

ELISA的试剂-2

3.1.3  包被用抗原   用于包被固相载体的抗原按其来源不同可分为天然抗原、重组抗原和合成多肽抗原三大类。天然抗原可取自动物组织、微生物培养物等,须经提取纯化才能作包被用。如HBsAg可以从携带者的血清中提取,一般的细菌和病毒抗原可以从其培养物中提取,蛋白成份抗原可从富含此抗原的材料中

“大三阳”“小三阳”是怎么来的?(内附乙肝五项解析)

乙型肝炎病毒是一种DNA病毒,属于嗜肝DNA病毒科,该科病毒以RNA中间体为模板经反转录合成DNA链。在电镜下观察,HBV感染者血清中存在三种形式的颗粒:Dane颗粒、小球形颗粒、丝状或核状颗粒。一般情况下,血清中小球形颗粒最多而Dane颗粒最少。常用检测方法:在我国有50%~70%的人受过感染,由

原位杂交组织化学概述

一、核酸分子杂交技术1961年Hall开拓了液相核酸杂交技术的研究,其基本原理是利用核酸分子单链之间有互补的碱基顺序,通过碱基对之间非共价键的形成,出现稳定的双链区,形成杂交的双链。自此以后,由于分子生物学技术的迅猛发展,特别是70年代末到80年代初,分子克隆、质粒和噬菌体DNA的构建成功,核酸自动

ELISA原理与分类

一、ELISA的原理ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合

原位杂交组织化学技术的基本方法

一、核酸分子杂交技术1961年Hall开拓了液相核酸杂交技术的研究,其基本原理是利用核酸分子单链之间有互补的碱基顺序,通过碱基对之间非共价键的形成,出现稳定的双链区,形成杂交的双链。自此以后,由于分子生物学技术的迅猛发展,特别是70年代末到80年代初,分子克隆、质粒和噬菌体DNA的构建成功,核酸自动

疫共沉淀详细步骤

实验概要免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。本实验详细介绍了免疫共沉淀的详细步骤及注意事项。实验原理当细胞在非变性条件下被裂解时,完整细胞内存在的许多蛋

原位杂交组织化学技术的基本方法

一、核酸分子杂交技术1961年Hall开拓了液相核酸杂交技术的研究,其基本原理是利用核酸分子单链之间有互补的碱基顺序,通过碱基对之间非共价键的形成,出现稳定的双链区,形成杂交的双链。自此以后,由于分子生物学技术的迅猛发展,特别是70年代末到80年代初,分子克隆、质粒和噬菌体DNA的构建成功,核酸自动

ELISA中的试剂(2)-结合物

3.2  结合物 结合物即酶标记的抗体(或抗原),是ELISA中最关键的试剂。良好的结合物应该是既保有酶的催化活性,也保持了抗体(或抗原)的免疫活性。结合物中酶与抗体(或抗原)之间有恰当的分子比例,在结合试剂中应尽量不含有或少含有游离的(未结合的)酶或游离的抗体(或抗原)。此外,结合物尚要

ELISA试剂盒实验的优缺点

  ELISA试剂盒价格是通过酶联免疫吸附反应进行实验,来检测特定物质的试剂盒。试剂盒中会有不同浓度的标准样品,在酶标条中通过固相的抗原或抗体,酶标记的抗原或抗体,酶作用的底物反应。可形成标准曲线从而进行试验样品的测定。检测不同的物质有对应不同的试剂盒。   ELISA试剂盒实验的优缺点:   

试剂盒仪器保养小妙招

ELISA试剂盒是通过酶联免疫吸附反应进行实验,来检测特定物质的试剂盒。试剂盒中会有不同浓度的标准样品,在酶标条中通过固相的抗原或抗体,酶标记的抗原或抗体,酶作用的底物反应。可形成标准曲线从而进行试验样品的测定。检测不同的物质有对应不同的试剂盒。ELISA试剂盒实验仪器保养⑴ 仪器的接地:接地的问题

浅谈食品监测中微生物技术应用分析

   摘 要:我国的食品安全令人担忧,已经到了岌岌可危的边缘,作为检测部门如何快速、有效的检测食品中的有害物质,建立食品微生物快速检测方法,对食品质量进行监控尤为重要。本文详细的阐述了运用较多和较新的微生物快速检测技术的特点和发展。   一、前言   随着食品工业的快速发展,对食

时间分辨荧光免疫分析技术在食品安全领域的应用

随着分析方法的飞速发展,无论是食品中有毒有害物质,还是环境中痕量元素的检测,或者生物体内功能因子的分析,都迫切需要一种灵敏度高、快速准确、性能稳定的痕量分析方法。时间分辨荧光免疫分析技术(time-resolved fluoroimmunoassay,简称为TRFIA)是20世纪80 年代中期发展起

NBT特别关注丨6位大咖指引心肌干细胞领域“再生”

  2018年,Anversa实验室超过30篇文章由于造假而撤稿,这一事件对于心肌细胞治疗领域带来了非常负面的影响。在过去的18年间,许多医生和科学家以此不实结论花费数年进行的科学研究变得毫无意义,不仅使病人蒙受了极大的损失,在该领域里投入的数百万计资金也付之东流。然而,骨髓细胞或者是成体驻留的心肌