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什么是摩尔消光系数、摩尔吸光系数、摩尔吸收系数?

分光光度法是基于不同分子结构的物质对电磁辐射的选择性吸收而建立起来的方法,属于分子吸收光谱分析。当光通过溶液时,被测物质分子吸收某一波长的单色光,被吸收的光强度与光通过的距离成正比。虽然现在了解到Bouguer早在1729年已提出上述关系的数学表达式,但通常认为Lambert于1760年最早发现表达式,其数学形式为:T=I/I0=e-kb其中I0为入射光强,I为透射光强,e为自然对数的底,k为常数,b为光程长度(通常以cm表示)。比尔定律等同于Bouguer定律,只是比尔定律以浓度来表达。将两个定律结合起来,组成Beer-Bouguer定律:T=I/I0=e-kbc其中c为吸光物质的浓度(通常以g/L或mg/L为单位)。将上式取以10为底的对数后,得到线性表达式:A=-logT=-log(I/I0)=log(I0/I)=εbc其中A为吸光度,ε是摩尔吸收光系数或消光系数。上述表达式通常称为比尔定律。它表明,当特定波长的单色光通过......阅读全文

摩尔吸收系数和百分吸光系数的区别

两者区别如下:一、概念不同摩尔吸光系数,也称摩尔消光系数,是指浓度为1摩尔/升时的吸光系数,ε表示,当浓度用克/升表示时,摩尔吸光系数在数值上等于吸光系数(a)与物质的分子量(M)之积,ε=aM。ε值的大小反映吸收介质对光吸收的程度。百分吸光系数指光线通过溶液或某一物质前的入射光强度与该光线通过溶液

生化自动化分析方法概要

一、分析方法分类(一)终点法被测物质在反应过程中完全被转变为产物,即达到反应终点,根据终点吸光度的大小求出被测物浓度,称为终点法(end essay)。实际上被测物并没有完全被转变,而只是与产物达到一个动态的化学平衡,因此该法称为平衡法更为恰当。从时间-吸光度曲线来看,到达反应终点或平衡点时

临床生化自动化分析(三)

(二)固定时间法指在时间-吸光度曲线上选择两个测光点,此两点既非反应初始吸光度亦非终点吸光度,这两点的吸光度差值用于结果计算,称为固定时间法(fixed-time essay),反应曲线见图7-6。其计算公式与两点终点法相同,为CU=(A2-A1)×K。有时也称此法为两点法。该分析方法有助于解决

定量分析的理论基础—比耳定律初步分析

众所周知,比耳定律问世已230 多年了, 几乎所有的光学分析仪器分光光度计( 如紫外分光光度计、可见分光光度计、原子吸收分光光度计、液相色谱仪的紫外检测器等) 的原理都是采用比耳定律。    比耳定律是在假设照射到吸光物质上的光是严格的单色光, 被测物质是由独立的、

什么是摩尔消光系数、摩尔吸光系数

分光光度法是基于不同分子结构的物质对电磁辐射的选择性吸收而建立起来的方法,属于分子吸收光谱分析。当光通过溶液时,被测物质分子吸收某一波长的单色光,被吸收的光强度与光通过的距离成正比。虽然现在了解到Bouguer早在1729年已提出上述关系的数学表达式,但通常认为Lambert于1760年最早发现表达

吸光度与复杂的蛋白消光系数

  奥盛 微量分光光度计 Nano-500   含有芳香侧链的氨基酸(酪氨酸、色氨酸、苯丙氨酸)具有强烈的紫外吸收能力。因此,蛋白与肽的浓度和其芳香族氨基酸含量与紫外吸光度是成比例的。一旦确定了给定蛋白的吸光度(氨基酸已确定),其蛋白浓度可以通过吸光度来确定。   紫外吸收法用于蛋白浓度检测时

OD260/OD280比值的问题

DNA纯度的判断根据OD260/OD280的比值判断,符合要求纯度高的纯化DNA其OD260/OD280在1.6~1.8之间,低于此范围表明蛋白质含量超标,高于此范围表明样品中含有RNA。一般机器给出的比值是分子分母同时减OD320所得,你可以自己算一下OD260/OD280,如果在要求的范围内,说

OD260/OD280比值的问题

DNA纯度的判断根据OD260/OD280的比值判断,符合要求纯度高的纯化DNA其OD260/OD280在1.6~1.8之间,低于此范围表明蛋白质含量超标,高于此范围表明样品中含有RNA。一般机器给出的比值是分子分母同时减OD320所得,你可以自己算一下OD260/OD280,如果在要求的范围内,说

紫外吸光度最大值?看完这个你就懂了

  吸光度,absorbance,是指光线通过溶液或某一物质前的入射光强度与该光线通过溶液或物质后的透射光强度比值的对数,影响它的因素有溶剂、浓度、温度等等。  吸光系数与入射光的波长以及被光通过的物质有关。只要光的波长被固定下来,同一种物质,吸光系数就不变。  当一束光通过一个吸光物质(通常为溶液

碘兰比色法测定精米中淀粉含量的步骤

  测定精米直链淀粉含量有多种方法,经我们的多年实践,认为简易碘兰比色法具有简便、快速、准确性较高的优点。  一、原理  碘与直链淀粉和支链淀粉所形成的碘复合物具有不同的吸光特性。在pH为理。5一理。了的条件下,碘一直链淀粉复合物吸收600毫微米附近的红橙光。反射490毫微米附近的兰绿光。在光电比色

自动生化分析仪基本参数及应用

  了解生化分析仪基本参数的原理,有利于仪器、试剂的正确使用,有助于正确分析和处理测定数据。但是,配套系统的原装分析参数不宜更改;采用非仪器配套的试剂及校准品体系时,参数修改要慎重,对于不同仪器、不同类型的反应分析程序,所显示的人机对话分析参数信息有所不同。   一、反应监测时间   对于终点法

自动生化分析仪基本参数及应用(二)

三、样品量、试剂量与稀释量有关参数包括样品量、试剂量、稀释水量、最小反应体积和最大比色杯容量等。如HITACHI7170反应体积180~380µl,最大体积570µ l。BT 224半自动生化仪流动比色池容积33µl,吸液量200~990µl,最适体积500µl。1.最小反应体积 &nbs

核酸、蛋白质等微量紫外吸光度测量的应用方案

引言核酸(DNA、RNA)、蛋白质等生物样品的微量紫外吸光度及浓度的检测,有助于基因测序、基因筛查、分子育种和动物克隆等生命科学的研究。多家生命科学领域的实验设备供应商已将海洋光学的微型光纤光谱仪应用在了其微量或者超微量紫外分光光度计设备中,并实现了全波段200-850nm,或

分光光度计知识汇总

分光光度法是指应用分光光度计的分析方法,具有灵敏、准确、快速及选择性好等特点。通常所测样品溶液浓度下限可达10-6~10-5mol/L,适用于测定食品中的微量组分(如肉制品中的亚硫酸盐、糖果中的二氧化硫等)。 一、原理 1.1 物质对光的选择性吸收当光束照射到物质上时,

原子吸收分光光度法测定进口化肥钠的含量

本标准规定测定进口化肥中钠含量的方法。1 适用范围适用于氯化钾等。2 方法提要试样用水溶解,在水溶液中用原子吸收分光光度计于波长589.0nm,以空气-乙炔火焰测定钠的吸光度。3 仪器AA-1800型原子吸收分光光度计:附有空气-乙炔燃烧器及钠空心阴极灯。所用原子吸收分光光度计应达到下列指标:最低灵

72型分光光度计原理

一、构造原理及结构72型分光光度计是可见光分光光度计,波长范围为420nm~700nm,它由三大部分组 成:磁饱和稳压器、光源、单色光器和测光机构、微电计。72型分光光度计的基本依据是朗伯—比耳定律,它是根据相对测量原理工作的,即先选定某一溶剂作为标准溶液,设定其透光率为100%,被测试样的透光率是

72型分光光度计原理

  一、构造原理及结构   72型分光光度计是可见光分光光度计,波长范围为420nm~700nm,它由三大部分组 成:磁饱和稳压器、光源、单色光器和测光机构、微电计。   72型分光光度计的基本依据是朗伯—比耳定律,它是根据相对测量原理工作的,即先选定某一溶剂作为标准溶液,设定其透光率为100%

分光光度计在核酸蛋白测量中的应用

摘要:分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。  分光光度计的简单原理  分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源,通过系列分光装置,从而产生特定波长的光源,光源透过测试的样品后,部分光源被吸收,计算样品的吸光值,从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与

分光光度计在核酸蛋白测量中的应用

 分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。分光光度计的简单原理分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源,通过系列分光装置,从而产生特定波长的光源,光源透过测试的样品后,部分光源被吸收,计算样品的吸光值,从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样

自动生化分析仪基本参数及应用(3)

五、波长的选择及测定模式    波长(Wave1ength)的正确选择有利于提高测定的灵敏度和减少测定误差。光度学方法有单波长和双波长之分,有的仪器可用三波长、甚至多波长,以及两波长比率等。有的仪器可作导数光谱分析。单波长测定易受样品溶血、黄疸、脂浊等因素干扰。双波长测

什么是吸光度,影响它的因素有哪些

吸光度是指光线通过溶液或某一物质前的入射光强度与该光线通过溶液或物质后的透射光强度比值的以10为底的对数,影响它的因素有溶剂、浓度、温度等等。吸光系数与入射光的波长以及被光通过的物质有关。只要光的波长被固定下来,同一种物质,吸光系数就不变。当一束光通过一个吸光物质(通常为溶液)时,溶质吸收了光能,光

三十五项淘汰临床检验项目、方法及替代实验(27)

二、己糖激酶法测定血糖(一)原理  在己糖激酶(HK)催化下,葡萄糖与三磷酸腺苷(ATP)起磷酸化反应,生成6-磷酸葡萄糖(G-6-P)和二磷酸腺苷(ADP)。前者在6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PD)催化下脱氢,生成6-磷酸葡萄糖酸(6-GP),同时使辅酶II(NADP或辅酶INAD)还原成还原辅酶I

分光光度计原理及应用(一)

分光光度计就是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器。而分光光度法则是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度,对该物质进行定性和定量分析。 常用的波长范围为:(1)200~400nm的紫外光区,(2)400~760nm的可见光区,(3)2.5~25μm(按波数计为4000

乙烯基玻璃鳞片胶泥分光光度计

分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源,通过系列分光装置,从而产生特定波长的光源,光源透过测试的样品后,部分光源被吸收,计算样品的吸光值,从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。  核酸的定量   核酸的定量是分光光度计使用频率高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸,单链、

超微量分光光度计的应用领域

  超微量分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器,主要设计用于生命科学实验室蛋白质组学和基因组学下述应用领域:  核酸的定量  核酸的定量是超微量分光光度计使用频率最高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸,单链、双链DNA,以及RNA。核酸的最高吸收峰的吸收波长260nm。每种核酸的分子构成不

分光光度计的应用常识

分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。分光光度计的简单原理分光光度计采用一可以产生多个波长的光源,通过系列分光装置,从而产生特定波长的光源,光源透过测试的样品后,部分光源被吸收,计算样品的吸光值,从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比

可见及紫外分光光度法的理论基础

(一)可见及紫外分光光度法分光光度法的理论基础是朗伯-比尔定律。1.Lamber-Beer定律:A=k·b·cA为吸光度k—吸光系数b—光径,单位:cmc—溶液浓度,单位:g/L2.摩尔吸光系数:在公式“A=k·b·c”中,当c=1mol/L,b=1cm时,则常数k可用ε表示。3.比吸光系数:在公式

分光光度计如何测定核酸蛋白

分光光度计测定核酸蛋白方法:分光光度计蛋白质测定过程其实非常简单,先测试空白液,然后直接测试蛋白质。由于缓冲液中存在一些杂质,一般要消除320 nm的“背景”信息,设定此功能“开”。与测试核酸类似,要求A 280的吸光值至少大于0.1A,zui佳的线性范围在1.0-1.5之间。实

进口化肥 钠的原子吸收分光光度测定方法

本标准规定测定进口化肥中钠含量的方法。 1 适用范围适用于氯化钾等。 2 方法提要试样用水溶解,在水溶液中用原子吸收分光光度计于波长589.0nm,以空气-乙炔火焰测定钠的吸光度。 3 仪器原子吸收分光光度计,附有空气-乙炔燃烧器及钠空心阴

进口化肥 微量元素的原子吸收分光光度测定方法

本标准规定测定进口化肥中微量元素──铜、锌、铁、锰、镁含量的方法。 1 方法提要 试样用硝酸或盐酸溶解,在2%硝酸或盐酸介质中,于原子吸收分光光度计分别在324.7nm,213.9nm,248.3nm,279.5nm和285.2nm的波长,以空气-乙炔火焰进行铜、锌、铁