“2010年中美英糖生物学研讨会”在上海召开

中美英科学家携手多糖研究“2010年中-美-英糖生物学研讨会”在上海召开 核酸、蛋白、糖是生物体内的“三驾马车”。继基因组学、蛋白质组学之后,糖生物组学又成为国际生物学领域激发新一轮“生命革命”的热点,吸引了世界各国科学家的目光。然而,无论是快速有效地进行糖的分离纯化和结构确定还是糖链的合成依然是摆在科学家面前的“世界级”难题。10月14日,中美英多糖研究领域的科学家齐集中科院上海药物研究所参加“2010年中-美-英糖生物学研讨会”。“多糖:从分子到功能到应用”是本次大会的主题,各国科学家围绕糖链对多种疾病的功能机制研究和方法学研究,带来了精彩纷呈的报告,共同搭建“中美英”三国多糖研究的交流桥梁,在交流中携手共进,共同推动多糖研究的发展。 越来越多的证据表明,无论是糖蛋白或蛋白聚糖,它们在一些重大疾病如肿瘤、神经退行性疾病、心血管病、代谢性疾病、免疫性疾病及感染性疾病的发生或发展中担任一些重要或关键角色。英......阅读全文

羧肽酶的分离纯化方法

实验概要本实验以面包酵母为初始材料,制备了高纯度羧肽酶Y,并对羧肽酶Y的生化性质进行了检测。实验原理羧肽酶Y(Carboxypeptidase   Y)是由面包酵母中分离得到的一种蛋白水解酶,它对肽和蛋白质羧基末端的各种氨基酸(包括脯氨酸)具有广泛的水解能力,因此该酶已成为C末端分析中常用的一种工具

蛋白质的分离纯化

蛋白质的分离纯化方法如下:一、根据蛋白质溶解度不同的分离方法1、蛋白质的盐析法:中性盐对蛋白质的溶解度有显著影响,一般在低盐浓度下随着盐浓度升高,蛋白质的溶解度增加,此称盐溶;当盐浓度继续升高时,蛋白质的溶解度不同程度下降并先后析出,这种现象称盐析。2、等电点沉淀法:蛋白质在静电状态时颗粒之间的静电

样品RNA的分离与纯化

含106个细胞液加等量纯化溶液[4mol/L胍基硫氰酸盐,25mmol/L柠檬酸pH7.0,0.5%肌氨酸(sarcosyl),0.1mol/l 2-巯基乙醇]。总体积为细胞沉淀4-5倍,混匀。加0.1体积2ml/L乙酸钠(pH4.1),1体积酚(重蒸水上封),0.2体积CIAA,混匀器剧烈

肠激酶的分离纯化方法

与大多蛋白的分离纯化方法类似, rEK可通过硫酸铵沉淀、DEAE柱、凝胶层析和透析等方法得到纯品, 另外, 运用组氨酸 (Histidine, His) 在蛋白末端进行标记, Nickel金属螯合柱亲和纯化这种低成本高效率一步分离蛋白的方法, 也正广泛地运用到rEK的分离纯化, 其收率可达50%以上

接种、分离纯化和培养技术

一、接种    将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种.1、接种工具和方法    在实验室或工厂实践中,用得最多的接种工具是接种环、接种针.由于接种要求或方法的不同,接种针的针尖部常做成不同的形状,有刀形、耙形等之分.有时滴管、吸管也可作为接种工具进行液体接种.在固体培

细菌分离纯化的详细方法

平板划线分离,在平板培养出单个细菌菌落后可以做镜检观察。稀释倒平板法:先把微生物悬液作一系列的稀释,分别取不同稀释液少许,与已熔化并冷却至50℃左右的琼脂培养基混合,摇匀后倾入灭过菌的培养皿中,待琼脂凝固后,制成可能含菌的琼脂平板,保温培养一定时间即可出现菌落。如果稀释得当,在平板表面或琼脂培养基中

接种、分离纯化和培养技术

一、接种  将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种。1、接种工具和方法  在实验室或工厂实践中,用得最多的接种工具是接种环、接种针。由于接种要求或方法的不同,接种针的针尖部常做成不同的形状,有刀形、耙形等之分。有时滴管、吸管也可作为接种工具进行液体接种。在固体培养基表面

单个核细胞的分离纯化

外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)主要指淋巴细胞和单核细胞,是免疫学实验最常用的细胞,也是进行T细胞和B细胞分离纯化的重要环节。1.原理PBMC的密度与血液中的其他成分不同。红细胞和粒细胞的密度较大,为1.092左右;淋巴细胞和单核细胞的

酶的分离纯化方法简介

酶的分离纯化方法简介生物细胞产生的酶有两类:一类由细胞内产生后分泌到细胞外进行作用的酶,称为细胞外酶。这类酶大都是水解酶,如酶法生产葡萄糖所用的两种淀粉酶,就是由枯草杆菌和根酶发酵过程中分泌的。这类酶一般含量较高,容易得到;另一类酶在细胞内产生后并不分泌到细胞外,而在细胞内起催化作用,称为细胞内酶,

肠激酶的分离纯化特点

  与大多蛋白的分离纯化方法类似, rEK可通过硫酸铵沉淀、DEAE柱、凝胶层析和透析等方法得到纯品, 另外, 运用组氨酸 (Histidine, His) 在蛋白末端进行标记, Nickel金属螯合柱亲和纯化这种低成本高效率一步分离蛋白的方法, 也正广泛地运用到rEK的分离纯化, 其收率可达50%

细菌分离纯化的详细方法

平板划线分离,在平板培养出单个细菌菌落后可以做镜检观察。稀释倒平板法:先把微生物悬液作一系列的稀释,分别取不同稀释液少许,与已熔化并冷却至50℃左右的琼脂培养基混合,摇匀后倾入灭过菌的培养皿中,待琼脂凝固后,制成可能含菌的琼脂平板,保温培养一定时间即可出现菌落。如果稀释得当,在平板表面或琼脂培养基中

巨噬细胞的分离和纯化

巨噬细胞的分离1)从小鼠、豚鼠或家兔腹腔中分离巨噬细胞1.取6周左右的小鼠(或600克左右的豚鼠,或3公斤左右的家兔),剃去腹部的毛并消毒。腹腔注射1ml(豚鼠20ml,家兔200ml)无菌的液体石蜡或巯基乙酸肉汤或4%淀粉肉汤。3~4天以后收集腹腔细胞。2.如要收集腹腔静置巨噬细胞,不注射刺激物,

蛋白质分离纯化应用范围

1、 化学物质的分离、提纯、浓缩;2、染料、染料中间体的浓缩及脱盐3、超细粉体生产过程中的产品回收;4、生产废水中有用物质的提纯、回用;5、海洋生物提取物的浓缩、提纯6、氨基酸、蛋白质的浓缩、提纯

小鼠精原细胞的分离和纯化

【摘要】 目的 探讨小鼠精原细胞的分离纯化。 方法 用组合酶消化法制备7~8d小鼠的生殖细胞悬液;用Percoll不连续密度梯度法分离精原细胞。 结果 所获细胞悬液内活细胞、死细胞及细胞团的百分比分别为90.08%、9.92%及8.91%;平均每个睾丸可获得4.136×105个细胞;精原细胞主要分布

蛋白质分离纯化常用技术

1、沉淀,2、电泳:蛋白质在高于或低于其等电点的溶液中是带电的,在电场中能向电场的正极或负极移动。根据支撑物不同,有薄膜电泳、凝胶电泳等。3、透析:利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分开的方法。4、层析:利用蛋白质在固定相与流动相之间不同的分配比例,达到分离目的的技术。a.离子交换层析,利用蛋白

蛋白质分离纯化基本介绍

是当代生物产业当中的核心技术。该技术难度、成本均高;例如一个生物药品的成本75%都花在下游蛋白质分离纯化当中。

mRNA的分离和纯化实验(一)

实验原理从细胞或组织中得到RNA是一种混合物,其中包括tRNA,rRNA和mRNA,其中RNA为75%~ 85%,tRNA占10%~16%,而mRNA仅占1%~5%,并且mRNA基因序列不同,分子量大小不均一,各基因的表达丰度也不一样。每克细胞可分离出5-10mg RNA。真核生物mRNA具

mRNA的分离和纯化实验(二)

(三) mRNA的分离1、mRNA与Oligo(dT)-纤维素结合:用移液器重新悬浮oligo(dT)-纤维素,取适量的oligo(dT)-纤维素到RNA样品中,盖上盖子,颠倒数次将oligo(dT)-纤维素与RNA混匀。于37℃水浴保温并温和摇荡15min。oligo(dT)-纤维素与RNA所需量

蛋白质的分离纯化(一)

  蛋白质的分离纯化是生物化学技术中的重要内容,在科研和生产中都有重要作用。蛋白质纯化的流程大致包括选材及预处理、细胞破碎及抽提、初步提取和精制纯化等部分,根据具体的纯化目的和要求可以有所不同。  选材的主要原则是原料易得,蛋白含量高,最好便于纯化。蛋白质的主要来源包括动物、植物和微生物。由于种属差

蛋白质分离纯化产品特点

1、处理过程为单纯物理过程,无任何相变。设备操作温度低,避免了传统工艺的种种弊端;2、系统采用先进的膜分离技术,工艺简单,运行稳定可靠,处理效率高;3、可以对生产废水中的有用物质进行提纯回用,实现经济、环保双赢;4、设备投资少,运行费用低。[1] 

Fusion-Protein-Isolation(融合蛋白分离纯化)

Peter Novick Lab,Department of Cell Biology Yale University School of Medicinehttp://info.med.yale.edu/cellbio/Novick/Second/Protocols/Fusion.pdf1.Sta

微生物分离纯化的原理

1、选择适合于待分离微生物的生长条件,如营养,酸碱度,温度和氧等要求或加入某种抑制造成只剩于该微生物生长,而抑制其他微生物生长的环境,从而淘汰一些不需要的微生物。2、微生物在固体培养基上生长形成的单个菌落可以是由一个细胞繁殖而成的集合体。

简述巨噬细胞的分离和纯化

  1、取2~3公斤重的家兔,耳缘静脉注射10ml空气处死动物或注射2ml(含130mg)戊巴比妥麻醉动物。仰卧固定,消毒胸部,剪开胸壁。以下过程注意无菌操作。小心从环状软骨下方剪下气管,分离心脏和血管,取出肺,剪去脂肪和结缔组织。用无菌纱布小心擦净肺表面,称重。  2、分离肺泡巨噬细胞:用夹子夹住

酶的分离纯化方法介绍2

4.泡沫分离原理:将气体通入含多种组分的溶液中,由于这些组分的表面活性由差异,因此在溶液的表面,某些组分将形成泡沫,泡沫的稳定性取决于操作条件及溶液的生物学特性。泡沫中含有更多的表面活性成分,故泡沫的组分种类及其含量与溶液中的不相同。这样,溶液中的组分舅得以分离。蛋白质较易吸附与气液界面,这有利于其

微生物的分离和纯化

实验原理在土壤、水、空气或人及动、植物体中,不同种类的微生物绝大多数都是混杂生活在一起,当我们希望获得某一种微生物时,就必须从混杂的微生物类群中分离它,以得到只含有这一种微生物的纯培养,这种获得纯培养的方法称为微生物的分离与纯化。为了获得某种微生物的纯培养,一般是根据该微生物对营养、酸碱度、氧等条件

接种、分离纯化和培养技术(二)

二、分离纯化  含有一种以上的微生物培养物称为混和培养物(Mixed culture)。如果在一个菌落中所有细胞均来自于一个亲代细胞,那么这个菌落称为纯培养(Pure culture)。在进行菌种鉴定时,所用的微生物一般均要求为纯的培养物。得到纯培养的过程称为分离纯化,方法有许多种。1、倾注平板法 

酶的提取和分离纯化介绍

许多酶都存在于细胞内。为了提取这些胞内酶,首先需要对细胞进行破碎处理。细胞破碎的方法很多,主要包括机械破碎法、物理破碎法、化学破碎法和酶学破碎法等。机械破碎法是指利用捣碎机、研磨器或匀浆器等将细胞破碎开来。物理破碎法是指利用温度差、压力差或超声波等将细胞破碎开来。化学破碎法是指利用甲醛、丙酮等有机溶

汉邦科技:分离纯化的好帮手

  【导语】2012年6月26日-28日,2012第十二届世界制药原料中国展(CPhI)在上海新国际博览中心召开。江苏汉邦科技有限公司受邀参加展会,以“成为中国色谱行业第一品牌,形成国际化的色谱产业研发生产基地”为发展目标的汉邦科技,为展会带来了动态轴向压缩柱DAC-H

信使RNA的提取、分离和纯化

真核细胞的mRNA分子最显著的结构特征是具有5’端帽子结构(m7G)和3’端的Poly(A)尾巴。绝大多数哺乳类动物细胞mRNA的3’端存在20-30个腺苷酸组成的Poly(A)尾,通常用Poly(A+)表示。这种结构为真核mRNA的提取,提供了极为方便的选择性标志,寡聚(dT)纤维素或寡聚(U)琼