新一代CRISPRs有望成为2015年重磅技术
当人们提到所谓的使能技术（enabling technologies），类似印刷机的发明，或者麻醉药的发现就会浮现在我们脑海中。而对于科学家来说，CRISPR-Cas9 系统就是这样一种系统。 这种细菌免疫系统能通过将病毒DNA中的短重复片段整合到细菌基因组中，来抵抗病毒。当细菌（或其后代）第二次感染病毒的时候，这些重复序列就能通过一种核酸酶靶向侵入的互补DNA，并摧毁它。 2013年几个研究组就利用了这一系统编辑真核生物基因，随后看到在不少应用中CRISPRs迅速崛起，多个不同物种都实现了基因组中基因删除和插入，激活或抑制基因转录。但是随着这一系统越来越受欢迎，关于其特异性和有效性的质疑也越来越多。 如何提高导向RNA（gRNA）的特异性是一大问题，这种RNA能将Cas9 核酸酶带领到基因组目标位置，Nature Biotechnology杂志建议切断gRNAs (Nature子刊：巧解基因编辑脱靶问题)，减少脱靶问......阅读全文
“基因组编辑核酸酶”当选《自然》年度研究方法
《自然—方法学》视频介绍“基因组编辑核酸酶” 《自然》杂志子刊《自然—方法学》在最新一期推出了2011年度研究方法专刊，评选出了本年度研究方法——基因组编辑核酸酶（Gene-editing nucleases）。专刊包括社论、新闻特写、评论、视频等内容；同时，还评出其他8个值得关注的研
什么是核酸酶？
核酸酶有DNase、RNase、核酸酶S1等，可水解相应的DNA和RNA，核酸酶S1可降解单链DNA和RNA，用量增大也可降解双链核酸。它可用于切去ds-cDNA合成中产生的发夹环。 末端转移酶在Mg 存在下，选择3′－OH端单链DNA为引物加成核苷酸，在Co 存在下，选择3′－OH端双链DN
核酸酶保护实验
实验材料 核酸酶试剂、试剂盒 ATPCTPGTPMUTPEDTANaCl甲酰胺Tris-HClRNase ARNase T1RNasinDTTUTPT7RNA聚合酶DNaseⅠ饱和酚氯仿酵母tRNANaAc无水乙醇SDS蛋白酶K异丙醇丙烯酰胺亚甲双丙烯酰胺TBE尿素过硫酸胺TEMED仪器、耗材 低温
核酸酶保护实验
实验材料 核酸酶 试剂、试剂盒 ATP CTP GTP MUTP
核酸酶保护实验
实验材料核酸酶试剂、试剂盒ATPCTPGTPMUTPEDTANaCl甲酰胺Tris-HClRNase ARNase T1RNasinDTTUTPT7RNA聚合酶DNaseⅠ饱和酚氯仿酵母tRNANaAc无水乙醇SDS蛋白酶K异丙醇丙烯酰胺亚甲双丙烯酰胺TBE尿素过硫酸胺TEMED仪器、耗材低温离心机
纯化的基因组－DNA－的微球菌核酸酶消化实验
实验方法原理 实验材料 0.5～1 mg 纯化的基因组 DNA微球菌核酸酶（MNase）试剂、试剂盒 核缓冲液 C0.5 mol L CaCl20.25 mol L EGTA氯仿仪器、耗材 设置在 68℃ 的加热器冰块实验步骤 1. 取 100 ug 基因组 DNA 加入到室温的核缓冲液 C 中，使
纯化的基因组－DNA－的微球菌核酸酶消化实验
实验材料0.5～1 mg 纯化的基因组 DNA微球菌核酸酶（MNase）试剂、试剂盒核缓冲液 C0.5 mol L CaCl20.25 mol L EGTA氯仿仪器、耗材设置在 68℃ 的加热器冰块实验步骤1. 取 100 ug 基因组 DNA 加入到室温的核缓冲液 C 中，使终体积为 300 ug
噬菌体竟然可以保护自身基因组免受CRISPR核酸酶切割
细菌和感染它们的病毒正在进行一场与生命本身一样古老的分子军备竞赛。进化为细菌配备了一系列可靶向并破坏病毒DNA的免疫酶，包括CRISPR-Cas系统。但是，杀死细菌的病毒（也称为噬菌体）已设计出了它们自己的工具来帮助它们战胜这些最强大的细菌防御。 如今，在一项新的研究中，来自美国加州大学旧金山
RNA－SI－核酸酶作图
实验材料 [γ-32P」ATP合适的寡核苷酸DNA 模板l10XdNTP 混合物KLenow 片段合适的限 制性内切核酸酶X 射线胶片洗脱缓冲液tRNA 石蜡油S1 核酸酶试剂、试剂盒 10X 激酶缓冲液PNK10X 复性缓冲液6% 聚丙烯酰胺 8mol L 尿素溶液 (溶于 0.5XTBE) 及甲
核酸酶的作用机制
不同来源的核酸酶，其专一性、作用方式都有所不同。有些核酸酶只能作用于RNA，称为核糖核酸酶（RNase），有些核酸酶只能作用于DNA，称为脱氧核糖核酸酶（DNase），有些核酸酶专一性较低，既能作用于RNA也能作用于DNA，因此统称为核酸酶（nuclease）。根据核酸酶作用的位置不同，又可将核酸酶
RNA－SI－核酸酶作图
实验材料 [γ-32P」ATP 合适的寡核苷酸 DNA 模板l 10XdNTP 混合物 KLenow 片段 合适的限 制性内切核酸酶
核酸酶的分类介绍
核酸外切酶有些核酸酶能从DNA或RNA链的一端逐个水解下单核苷酸，所以称为核酸外切酶。只作用于DNA的核酸外切酶称为脱氧核糖核酸外切酶，只作用于RNA的核酸外切酶称为核糖核酸外切酶；也有一些核酸外切酶可以作用于DNA或RNA。核酸外切酶从3′端开始逐个水解核苷酸，称为3′→5′外切酶，例如，蛇毒磷酸
外切核酸酶的种类
20世纪70年代，在细菌中陆续发现了一类核酸内切酶，能专一性地识别并水解双链DNA上的特异核苷酸顺序，称为限制性核酸内切酶（restrictionendonuclease，简称限制酶）。当外源DNA侵入细菌后，限制性内切酶可将其水解切成片段，从而限制了外源DNA在细菌细胞内的表达，而细菌本身的DNA
外切核酸酶的种类
为限制性核酸内切酶（restrictionendonuclease，简称限制酶）。当外源DNA侵入细菌后，限制性内切酶可将其水解切成片段，从而限制了外源DNA在细菌细胞内的表达，而细菌本身的DNA由于在该特异核苷酸顺序处被甲基化酶修饰，不被水解，从而得到保护。 限制性核酸内切酶的研究和应用发展
兆核酸酶的定义
中文名称兆核酸酶英文名称meganuclease定 义一类核酸酶内切酶，其识别序列较长，位点极为罕见，切割产生的片段很大，是定位基因操作的工具。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），酶（二级学科）
外切核酸酶的介绍
一、核酸外切酶 有些核酸酶能从DNA或RNA链的一端逐个水解下单核苷酸，所以称为核酸外切酶。只作用于DNA的核酸外切酶称为脱氧核糖核酸外切酶，只作用于RNA的核酸外切酶称为核糖核酸外切酶；也有一些核酸外切酶可以作用于DNA或RNA。核酸外切酶从3′端开始逐个水解核苷酸，称为3′→5′外切酶，例
核酸酶的发展历史
20世纪70年代，在细菌中陆续发现了一类核酸内切酶，能专一性地识别并水解双链DNA上的特异核苷酸顺序，称为限制性核酸内切酶（restriction endonuclease，简称限制酶）。当外源DNA侵入细菌后，限制性内切酶可将其水解切成片段，从而限制了外源DNA在细菌细胞内的表达，而细菌本身的DN
核酸酶的主要种类
核酸外切酶有些核酸酶能从DNA或RNA链的一端逐个水解下单核苷酸，所以称为核酸外切酶。只作用于DNA的核酸外切酶称为脱氧核糖核酸外切酶，只作用于RNA的核酸外切酶称为核糖核酸外切酶；也有一些核酸外切酶可以作用于DNA或RNA。核酸外切酶从3′端开始逐个水解核苷酸，称为3′→5′外切酶，例如，蛇毒磷酸
病毒基因检测系统的系统特点
1、DNA检测系统能提供诊断依据。使用基因芯片病毒检测系统，精确的诊断出导致泌尿生殖系统的致病微生物，为治疗感染疾病提供了科学的诊断依据。 2、生物基因疗法对顽固的感染症状效果不错。这种疗法特别针对病毒有极强的生物链的这个特点，从基因生物学的角度，直接破坏病毒基因生物链，达到治疗目的。
Nature首次揭示噬菌体保护自身基因组免受CRISPR核酸酶切割
细菌和感染它们的病毒正在进行一场与生命本身一样古老的分子军备竞赛。进化为细菌配备了一系列可靶向并破坏病毒DNA的免疫酶，包括CRISPR-Cas系统。但是，杀死细菌的病毒（也称为噬菌体）已设计出了它们自己的工具来帮助它们战胜这些最强大的细菌防御。 如今，在一项新的研究中，来自美国加州大学旧金山
基因质谱分析系统
基因质谱分析系统是一种用于预防医学与公共卫生学领域的分析仪器，于2012年6月19日启用 技术指标 可对4-30bp核酸片段进行分子量测定，每天分析完成>3000样本的1-36重RCR反应的检测和数据分析；一张芯片含384个孔，一次可任意选用1-384个孔，剩余孔可以分多次使用；数据读取完成
常见的自杀基因系统
常见的自杀基因系统有以下几种：(一) tk-GCV系统病毒、细菌、真核细胞中都存在胸苷激酶（HSV-tk）。甘昔洛韦(GCV)是临床上用于治疗单纯疱疹的药物。GCV在胸苷激酶的作用下生成三磷酸GCV，能阻断DNA合成产生细胞毒作用。(二) CD-5-FC系统胞嘧啶脱氨酶基因(CD)存在于许多细菌和真
甲醇酵母基因表达系统
1 甲醇酵母表达系统的特点 1.1 宿主 七十年代巴斯德毕赤酵母曾被用于生产单细胞蛋白（SCP），有很好的发酵基础，菌体密度可达100g/L干重。其生长培养液的组分包括无机盐、微量元素、生物素、氮源和碳源，廉价而无毒。它能在以甲醇为唯一碳源的培养基中快速生长，其中醇氧化酶AOX——甲醇代谢途径
概述核酸酶的发展历史
20世纪70年代，在细菌中陆续发现了一类核酸内切酶，能专一性地识别并水解双链DNA上的特异核苷酸顺序，称为限制性核酸内切酶（restriction endonuclease，简称限制酶）。当外源DNA侵入细菌后，限制性内切酶可将其水解切成片段，从而限制了外源DNA在细菌细胞内的表达，而细菌本身的
核糖－核酸酶H的定义
所有类型细胞均含有不止一种核糖核酸酶H。核糖核酸酶H(RNaseH)催化DNA-RNA杂合体的RNA部分的核内降解，产生不同链长带3'羟基和5'磷酸末端的寡核糖核酸。
什么是核糖核酸酶？
指能水解RNA磷酸二酯键的酶称核糖核酸酶(ribonuclease，RNase)。不同的RNase其专一性不同，例如牛胰核糖核酸酶(RNase I)，它的作用位点是嘧啶核苷3’一磷酸与其他核苷酸之间的连接键，而核糖核酸酶T1(RNase T1)的作用位点是3’鸟苷酸与其他相邻核酸之间的5’一OH
核酸酶的基本信息
能够将聚核苷酸链的磷酸二酯键切断的酶，称为核酸酶。核酸酶属于水解酶，作用于磷酸二酯键的P-O位置。 核酸酶是在核酸分解的第一步中，作用于水解核苷酸之间的磷酸二酯键的一种核酸。在高等动植物中都有作用于磷酸二酯键的。不同来源的核酸酶，其专一性、作用方式都有所不同。有些核酸酶只能作用于RNA，称为核糖核酸
核糖核酸酶的分类
（一）核糖核酸酶A核糖核酸酶A（RNase A）来源于牛胰脏，是一种内切核糖核酸酶，可特异攻击RNA上嘧啶残基的3’端，切割胞嘧啶或尿嘧啶与相邻核苷酸形成的磷酸二酯键，反应终产物是3’嘧啶核苷酸和末端带3’嘧啶核苷酸的寡核苷酸。无辅助因子及二价阳离子存在时，核糖核酸酶A的作用可以被胎盘RNA酶抑制剂
5.5－RNA－SI－核酸酶作图
SI 核酸酶是种内切酶，它是从米曲霉米曲霉 (Aspergillusoryzae) 中分离得到。它能降解单链核酸，却不能降解双链核酸。此外，它能高灵敏度地降解局部错配的双链分子，即使只有一对碱基错配，也能因 S1 核酸酶的切割而被检测出来。用 S1 核酸酶来识别和切割错配或未复性的区域，再通过变性内
核酸酶的基本分类
能够将聚核苷酸链的磷酸二酯键切断的酶，称为核酸酶。核酸酶属于水解酶，作用于磷酸二酯键的P-O位置。 核酸酶是在核酸分解的第一步中，作用于水解核苷酸之间的磷酸二酯键的一种核酸。在高等动植物中都有作用于磷酸二酯键的。