纯化的基因组DNA的微球菌核酸酶消化实验
实验方法原理 实验材料 0.5～1 mg 纯化的基因组 DNA微球菌核酸酶（MNase）试剂、试剂盒 核缓冲液 C0.5 mol L CaCl20.25 mol L EGTA氯仿仪器、耗材 设置在 68℃ 的加热器冰块实验步骤 1. 取 100 ug 基因组 DNA 加入到室温的核缓冲液 C 中，使终体积为 300 ug。准备 4～5 管此溶液。重要提示：对于每个溶液，直到反应进行到第 4 步后再进行下一管的反应。2. 加入 CaCl2 至终浓度为 3 mmol/L。3. 加入 MNase 至 0.5、1、2、3 U/ml。剧烈地混合使酶均匀的分布（溶液可能有些黏稠），反应 3 min。4. 将溶液转移到含有 50 ul 0.25 mol/L EGTA 预热到 68℃ 的管子中，68℃ 温育 10 min。5. 将管子转移到冰块上。6. 在 1.2％ 的小型琼脂糖凝胶上上样 200 ng，电泳检测消......阅读全文
纯化的基因组－DNA－的微球菌核酸酶消化实验
实验材料0.5～1 mg 纯化的基因组 DNA微球菌核酸酶（MNase）试剂、试剂盒核缓冲液 C0.5 mol L CaCl20.25 mol L EGTA氯仿仪器、耗材设置在 68℃ 的加热器冰块实验步骤1. 取 100 ug 基因组 DNA 加入到室温的核缓冲液 C 中，使终体积为 300 ug
纯化的基因组－DNA－的微球菌核酸酶消化实验
实验方法原理 实验材料 0.5～1 mg 纯化的基因组 DNA微球菌核酸酶（MNase）试剂、试剂盒 核缓冲液 C0.5 mol L CaCl20.25 mol L EGTA氯仿仪器、耗材 设置在 68℃ 的加热器冰块实验步骤 1. 取 100 ug 基因组 DNA 加入到室温的核缓冲液 C 中，使
纯化DNA实验_基因组DNA的快速纯化
试剂、试剂盒尾部缓冲液蛋白酶 K仪器、耗材离心管玻璃棒实验步骤第 1 天1. 大约 1.5 cm 长的尾部活检样品放在一个 1.5 ml 盛有 0.7 ml 尾部缓冲液的小离心管中，加 35 ul 10 mg/ml 蛋白酶 K，在 55℃ 振摇温育过夜。尾部缓冲液（配 25 ml）50 mmol/L
分离的细胞核的染色质的微球菌核酸酶消化实验
实验材料动物组织 ［如肝、肾和（或）脾］试剂、试剂盒核缓冲液 A、B、C无 Ca 和 Mg 离子（CMF） 的 PBSNaOH2×TNESK 溶液CaCl2微球菌核酸酶（MNase） 储液仪器、耗材剃刀刀片或解剖刀培养皿带有聚四氟乙烯包被的磨棒的组织匀浆器电动组织磨碎机相差显微镜轻薄棉布玻璃离心管（
分离的细胞核的染色质的微球菌核酸酶消化实验
实验方法原理 实验材料 动物组织 ［如肝、肾和（或）脾］试剂、试剂盒 核缓冲液 A、B、C 无 Ca 和 Mg 离子（CMF） 的 PBSNaOH 2×TNESK 溶液CaCl2微球菌核酸酶（MNase） 储液仪器、耗材 剃刀刀片或解剖刀培养皿带有聚四氟乙烯包被的磨棒的组织匀浆器电动组织磨碎机 相差
动物基因组DNA－的分离纯化实验
盐溶法 实验方法原理 根据核糖核蛋白与脱氧核糖核蛋白在一定浓度的氯化钠溶液中的溶解度不同进行分离, 然后用蛋白质变性沉淀剂去除蛋白,使核酸释放出来, 再利用
动物基因组DNA－的分离纯化实验
实验方法原理 根据核糖核蛋白与脱氧核糖核蛋白在一定浓度的氯化钠溶液中的溶解度不同进行分离, 然后用蛋白质变性沉淀剂去除蛋白,使核酸释放出来, 再利用核酸不溶于乙醇的性质将核酸析出, 达到分离提纯的目的。在0 . 14 mol/ L 的氯化钠溶液中, RNA 核蛋白(RNP) 溶解度大, 而DNA
微球菌核酸酶的基本信息
中文名微球菌核酸酶外文名Micrococcal Nuclease微球菌核酸酶(Micrococcal Nuclease) 是只降解核小体连接区DNA的核酸酶，由于核小体处的DNA被组蛋白1保护而不被降解。只降解核小体连接区DNA的核酸酶，由于核小体处的DNA被组蛋白1保护而不被降解。
微球菌核酸酶的基本信息
微球菌核酸酶(Micrococcal Nuclease) 是只降解核小体连接区DNA的核酸酶，由于核小体处的DNA被组蛋白1保护而不被降解。
动物基因组DNA－的分离纯化实验——盐溶法
本实验目的是掌握盐溶法大量制备动物基因组DNA 的基本原理和方法，根据核糖核蛋白与脱氧核糖核蛋白在一定浓度的氯化钠溶液中的溶解度不同进行分离, 然后用蛋白质变性沉淀剂去除蛋白,使核酸释放出来, 再利用核酸不溶于乙醇的性质将核酸析出, 达到分离提纯的目的。实验方法原理根据核糖核蛋白与脱氧核糖核蛋白在一
基因组DNA的快速纯化
第 1 天1. 大约 1.5 cm 长的尾部活检样品放在一个 1.5 ml 盛有 0.7 ml 尾部缓冲液的小离心管中，加 35 μl 10 mg/ml蛋白酶 K，在 55℃ 振摇温育过夜。尾部缓冲液（配 25 ml）50 mmol/L Tris，pH 8
纯化DNA实验
实验材料 细胞试剂、试剂盒 TBS抽提缓冲液仪器、耗材 离心管实验步骤 1. 根据样品类型，从下列方法中选一个作为步骤 1 进行操作。(1) 细胞样品① 单层培养的细胞以用冰预冷的 TBS 将单层细胞洗涤 2 次，用刮棒把细胞刮入约 0.5 ml 的 TBS 中，将细胞悬液转移到冰浴的离心管中，
纯化DNA实验
从哺乳动物细胞或组织分离DNA 基因组DNA的快速纯化 纯化质粒（碱裂解法） 实验材料 细胞
DNA纯化实验
实验方法原理 硅胶膜可在高盐条件下结合DNA，又可在低盐条件下与DNA分离。用于清洁目的的含DNA溶液中的引物、单核苷酸、酶、矿物油、盐离子等杂质因为没有与DNA相似的特性，所以被分离开来。实验材料 PCR产物试剂、试剂盒 PCR清洁试剂盒仪器、耗材 96孔DNA制备板96孔深孔板96孔V型底板实验
DNA纯化实验
PCR清洁试剂盒纯化法 实验方法原理 硅胶膜可在高盐条件下结合DNA，又可在低盐条件下与DNA分离。用于清洁目的的含DNA溶液中的引物、单核苷酸、酶、矿物油
纯化DNA实验
从哺乳动物细胞或组织分离DNA 基因组DNA的快速纯化 纯化质粒（碱裂解法） 实验材料 细胞
基因组DNA的纯化与回收
实验概要质粒、噬菌体等经酶切，电泳；PCR产物经电泳后，常常需要对一些DNA电泳片段进行回收和纯化，用于亚克隆、探针标记、测序等。DNA回收和纯化常用方法有压碎法、低融点琼脂糖法、冻融法等，也有现成的试剂盒供应。主要试剂酚、氯仿、NaAc、无水乙醇、TE、Tris-HCl饱和酚、异丙醇、低融点琼脂糖
从全血中纯化基因组－DNA－实验方法
试剂、试剂盒 乙醇 异丙醇 RNA 酶 A 全血 仪器、耗材 琼脂糖凝胶电泳
从全血中纯化基因组－DNA－实验方法
用于从全血（10 ml) 中分离基因组 DNA 的 Wizard 基因组 DNA 纯化试剂盒建立在一个四步程序基础上的。纯化程序的第一步包括血红细胞的裂解、可溶部分的弃除，随后是白细胞及其细胞核的裂解。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。试剂、试剂盒乙醇异丙醇RNA 酶 A
从全血中纯化基因组－DNA－实验方法
试剂、试剂盒 乙醇异丙醇RNA 酶 A全血仪器、耗材 琼脂糖凝胶电泳离心管Wizard 基因组 DNA 纯化试剂盒实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂乙醇，70%，室温异丙醇, 室温RNA 酶 A将 RNA 酶 A 溶解于 DNA 再水合液中至终浓度为 4 mg/ml, 煮沸 10min 以去
使用重组的果蝇因子进行染色质装配实验
实验方法原理 实验材料 重组的 NAP－1纯化的果蝇核心组蛋白重组的 ACF质粒 DNA试剂、试剂盒 HEG 缓冲液KClPvOH PEG 溶液BSA 溶液MgCl2CaCl2重组的拓扑异构酶 Ⅰ 工作溶液缓冲液 R微球菌核酸酶储液 EDTARNase A糖原终止缓冲液 酚 氯仿 异戊醇乙醇仪器、耗
使用重组的果蝇因子进行染色质装配实验1
实验材料重组的 NAP－1纯化的果蝇核心组蛋白重组的 ACF质粒 DNA试剂、试剂盒HEG 缓冲液KClPvOH PEG 溶液BSA 溶液MgCl2CaCl2重组的拓扑异构酶 Ⅰ 工作溶液缓冲液 R微球菌核酸酶储液EDTARNase A糖原终止缓冲液酚 氯仿 异戊醇乙醇仪器、耗材27℃ 和 30℃
基因组DNA提取纯化的注意事项
大多数动物组织可以用裂解缓冲液和蛋白酶/蛋白酶 K 进行高效裂解。在加入裂解液之前需要将组织切成小块，有条件的话建议使用 TissueLyser 或研钵等提前进行均质化。骨骼肌，心脏，皮肤等组织含有收缩蛋白，结缔组织和胶原蛋白，所以利用蛋白酶 / 蛋白酶 K 进行充分消化是必须的。FFPE
DNA纯化实验——DNA凝胶回收试剂盒纯化法
DNA纯化可用于：（1）获得高纯度的DNA；（2）浓缩DNA；（3）测序、遗传信息分析等分子生物学应用。实验方法原理本试剂盒适合从各种琼脂糖凝胶中提取多至 8 μg DNA（70 bp-10 Kb），回收率为 60-85%。琼脂糖凝胶在温和的缓冲液(DE-A 溶液)中溶解，其中的保护剂能防止线状 D
高质量－DNA－的纯化实验
应用经过修改的 Miller 等（1988) 的盐沉淀方法纯化 DNA，不使用酚和氯仿，比较温和，有效防止了长的染色体 DNA 的断裂。在第 9 章中讲述了另一种 DNA 纯化的方法。这种方法可以沉淀细胞核，已被成功地用于对血液样品、培养的细胞和乳腺瘤组织DNA 的纯化。本实验来源于 PCR 实验指
高质量－DNA－的纯化实验
实验材料 乳腺瘤组织试剂、试剂盒 EDTA异丙醇裂解缓冲液细胞核裂解缓冲液Triton 裂解缓冲液仪器、耗材 水浴锅破璃棒实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂EDTA，100 mmol/L异丙醇裂解缓冲液10 mmol/LTris-HCl1mmol/LEDTA150 mmol/LNaCl0.5
高质量－DNA－的纯化实验
实验材料 乳腺瘤组织 试剂、试剂盒 EDTA 异丙醇裂解缓冲液 细胞核裂解缓冲液
DNA纯化去杂质实验
这周我们来讨论一项常用的技术，即使常用但仍引起部分人核酸分离焦虑症。那就是基因组DNA的纯化去杂质。场景是这样的：你有一份采自南太平洋中部一个偏僻小岛上首次发现的古老兰花品种根际土壤样品。你使用了非PowerSoil Kit法提取其中的微生物DNA。最终DNA含有太多杂质，无法PCR扩增。因此需要去
纯化DNA实验_纯化质粒（碱裂解法）
实验材料大肠杆菌试剂、试剂盒LB葡萄糖缓冲液乙酸钾仪器、耗材离心管实验步骤1. 单个大肠杆菌克隆接种到 2 ml 含适当抗生素的 LB 中。37℃ 剧烈振荡孵育 5~8 小时。或者可以培养过夜使饱和。2. 倒 1.5 ml 培养液到已作标记的微量离心管中。把剩下的培养液存放在 4℃。3. 在微量离心
DNA作图实验——多种酶消化
主要用于显示基因以及其他序列待征在基因组上位置的图。实验方法原理应用遗传学技术构建能显示基因以及其他序列待征在基因组上位置的图。实验材料DNA试剂、试剂盒限制酶缓冲液仪器、耗材电泳仪实验步骤1. 用低频率切割的不同限制性内切酶分别完全消化DNA。 2. 从每个反应取小份样品作电泳分析，用已知的分