研究揭示AtWRKY53通过介导气孔运动负调控植株抗旱性
WRKY家族是一个转录调控因子大家族,在拟南芥中拥有74个成员。WRKY家族各成员参与多种生命活动,在植物的生长发育和耐逆抗病过程中都发挥着极其重要的调控作用。AtWRKY53是拟南芥WRKY基因家族第III组成员。目前已有报道指出AtWRKY53在调控植物衰老和生物胁迫方面起着重要作用。干旱是限制农作物增产的一个重要环境因子之一。尽管如此,植物对干旱耐受性的潜在分子机制却仍不清楚。 中国科学院西双版纳热带植物园余迪求研究团队通过研究发现干旱胁迫能诱导提高拟南芥WRKY53的mRNA水平和蛋白水平。进一步的表型分析发现,与野生型植株相比,高表达植株对干旱胁迫更为敏感,气孔运动测试及ABA含量测定结果表明高表达植株气孔关闭受限与ABA信号无关。进一步分析发现高表达植株气孔保卫细胞中过氧化氢含量减少而苹果酸含量增加,定量PCR结果显示过氧化氢酶CAT2、CAT3以及淀粉降解酶QQS基因的表达明显高于野生型植株,染色体免疫共杂交......阅读全文
研究揭示AtWRKY53通过介导气孔运动负调控植株抗旱性
WRKY家族是一个转录调控因子大家族,在拟南芥中拥有74个成员。WRKY家族各成员参与多种生命活动,在植物的生长发育和耐逆抗病过程中都发挥着极其重要的调控作用。AtWRKY53是拟南芥WRKY基因家族第III组成员。目前已有报道指出AtWRKY53在调控植物衰老和生物胁迫方面起着重要作用。干旱是
为什么有些基因高表达?
在我们的细胞中,DNA被折叠成数百万个小数据包,就像一根线上的珠子,使我们2米长的线性基因基因组,能够纳入一个直径只有约0.01毫米的细胞核中。然而,这些分子珠子,称为核小体,使DNA变得“不可读”。 因此,它们需要暂时无家可归,让基因被复制(转录)到用来制造蛋白质的信息中。细胞如何确保适当的接
农杆菌瞬时表达CRISPR编辑基因和快速筛选突变植株新方法
最近,美国康涅狄格大学和南京农业大学李义教授团队在Horticulture Research发表了题为“A method for the production and expedient screening of CRISPR/Cas9-mediated non-transgenic mutan
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肿瘤浸润T细胞高表达NK抑制性受体CD161
Cell | 绘制胶质瘤浸润T细胞图谱 T细胞是肿瘤免疫治疗的关键细胞,但是在弥漫性神经胶质瘤中T细胞的表达特征尚不清楚。弥漫性神经胶质瘤是人类原发性脑瘤的最常见类型,并且目前无法治愈。弥散性神经胶质瘤的主要类别包括复发-异柠檬酸脱氢酶(isocitrate dehydrogenase ID
CHO细胞表达系统与酵母细胞表达系统比较
CHO细胞表达系统与毕赤酵母表达系统是当前发展前景看好的两个表达系统,为了能够更加直观地对两个表达系统有一定的认识,特意在此篇中对两个表达系统作一定的比较,从而能够更进一步的对两个表达系统有更深的了解1.CHO细胞表达系统 (1)优点 CHO细胞属于成纤维细胞,既可以贴壁生
ClonePix技术快速筛选和开发高表达GPCR的哺乳细胞系(一)
ClonePixTM 2系统提供了一种全新、快速评估哺乳细胞系GPCR靶蛋白表达水平的方法 1. 用哺乳表达系统快速评估GPCR靶蛋白的內源表达水平 2. 增加发现最优细胞反应器的可能性 3. 减少细胞系/抗体开发的时间—避免有限稀释法 背景 哺乳细胞GPCRs的内源表达通常是非常低
ClonePix技术快速筛选和开发高表达GPCR的哺乳细胞系(二)
ClonePix2系统成像和挑取表达GPCR(M1)的细胞克隆 ClonePix2 成像和挑取阳性(CHO-M1)和阴性(CHO-K1)细胞。明场成像识别每个克隆的位置和形态,荧光成像识别高表达的M1。对PE标记的抗体,使用Cy5通道曝光6,000ms。 无论是直接标记方法还是双抗体方法,根据C
真核细胞表达系统的类型与常用真核细胞表达载体
原核表达系统是常被用来研究基因功能的成熟系统,由于原核表达系统具有包涵体蛋白不易纯化、蛋白修饰不完整等缺陷,人们也开始利用真核细胞表达系统来研究基因。自上世纪70年代基因工程 技术诞生以来,基因表达技术已渗透到生命科学研究的各个领域。并随着人类基因组计划实施的进行,在技术方法上得到了很大发展,时至今
无细胞表达系统——难度蛋白表达的福音
1964年有两个人开创了体外蛋白表达的先河,这两个人的名字大家必定不会陌生—马太和尼伦伯格。因为他们的创新思维让人类破译了编码氨基酸的64种翻译密码子。从此,体外蛋白表达开始为科学界所关注,不过彼时这个系统蛋白表达量低、持续时间短、稳定性差,使其未能得到进一步发展。 到80年代中期Sp
无细胞表达系统——难度蛋白表达的福音
1964年有两个人开创了体外蛋白表达的先河,这两个人的名字大家必定不会陌生—马太和尼伦伯格。因为他们的创新思维让人类破译了编码氨基酸的64种翻译密码子。从此,体外蛋白表达开始为科学界所关注,不过彼时这个系统蛋白表达量低、持续时间短、稳定性差,使其未能得到进一步发展。到80年代中期Spirin等对其进
测序新技术提供基因表达高精数据
原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2022/6/481704.shtm 科技日报北京6月27日电 (实习记者张佳欣)最近,日本东京理科大学的一个研究小组开发了一种新改进的单细胞RNA测序(scRNA-seq)技术。这种新方法,即终止子辅助固相互补DN
转基因植株的选择实验——转基因植株的生长和选择
实验材料幼胚盾片试剂、试剂盒24-DAgNO3毒莠定特美汀草铵膦玉米素仪器、耗材诱导培养基再生培养基实验步骤1. 将可能含有转化细胞的幼胚盾片置于愈伤诱导培养基上培养产生愈伤组织,诱导培养基中添加 0.5 mg/L 2 , 4-D 和 10 mg /L AgNO3。对农杆菌处理过的培养物,培养基中
嗅鞘细胞的细胞表达介绍
OECs表达胶质纤维酸性蛋白(GFAP),在血管壁形成终足,以及参与形成胶质界膜,此界膜大致勾勒出了嗅神经轴突与嗅球颗粒层嗅小球的交界线,OECs在免疫细胞化学超微结构特征以及与轴突的功能联系方面与星形胶质细胞存在明显不同。OECs对神经生长因子受体(P75NGR)Laminin细胞粘附分子L1
真核细胞表达系统3
由于腺病毒易于培养、纯化,宿主范围广,故采用该类病毒构建的载体被广泛应用腺病毒载体的构建依赖于腺病毒穿梭质粒和包装载体之间的同源重组。但是哺乳动物细胞内的这种同源重组效率很低,利用细菌内同源重组法构建重组体效率会大大提高,即将外源基因插入到腺病毒穿梭质粒中,形成转移质粒,将其线性化后与腺病毒包装质粒
真核细胞表达系统1
自上世纪70年代基因工程技术诞生以来,基因表达技术已渗透到生命科学研究的各个领域。并随着人类基因组计划实施的进行,在技术方法上得到了很大发展,时至今日已取得令人瞩目的成就 。随着人类基因组计划的完成,越来越多的基因被发现,其中多数基因功能不明。利用表达系统在哺乳动物细胞内表达目的基因是研究基
真核细胞表达系统2
在病毒感染晚期,由于大量外源蛋白的表达引起昆虫细胞的裂解,胞质内的物质释放出来,与 目的蛋白混在一起,从而使蛋白的纯化工作变得很困难,另外水解酶的释放会降解重组蛋白。为了克服以上这些困难,科学工作者先后尝试用丝蛾肌动蛋白基因启动子或杆状病毒ie-1基因启动子表达外源蛋白,但效果都不明显。Farr
再生植株培养的概念
中文名称再生植株培养英文名称replant culture定 义从外植体上通过各种途径直接或间接诱导出再生植株的培养技术。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞培养与细胞工程(二级学科)
植株再生的过程介绍
经原生质体培养的植株再生一般经过细胞壁再生,细胞分裂成细胞团、愈伤组织(或胚状体)、植株再生这几个过程。①细胞壁再生:原生质体在合适条件下短时间内开始膨胀,叶绿体重排,并开始合成新的细胞壁,进而由球形变成椭圆形。②细胞分裂:不同的植物细胞分裂时间不同。为了细胞能持续分裂,应注意及时添加新鲜培养液。③
研究揭示气孔保卫细胞分裂精细调控机制
气孔是分布在所有陆地植物叶片表面的特化表皮细胞结构。气孔保卫细胞根据环境条件变化和节律发生“运动”改变气孔大小,调控植物与外界的气体交换和水分蒸发,直接影响了光合作用碳同化和水分利用效率。模式植物拟南芥FOUR Lips (FLP) 是最早被发现的气孔发育关键基因之一。FLP基因突变可导致保卫细
应用TFC系列土壤养分测试仪之Ⅴ植株性饲料或植株样品
全氮、磷、钾比色测定(速测法、供参考) (参考国标:GB6432-86;GB6437-86) 一、待测液制备:称 取均匀磨细(0.5mm)样品0.5000克,放入100毫升消煮管中,加5毫升浓硫酸摇匀后再慢慢加入2毫升双氧水,并充分摇动,放在电炉上小火加热消 煮至发白烟(剧烈反应停止),取下自然冷却
体内无细胞DNA的表达
对于一些由缺乏三种特定蛋白质的基因突变引起的疾病(如Leber先天性黑蒙和血友病),直接的想法是将能够表达相关蛋白质的基因“播种”到体内,而不是“种”到基因组中,但在细胞质中自由表达。最典型的例子是几种批准的病毒转染基因疗法(如FDA批准的用于治疗遗传性眼病的基因药物“Luxturna”)。这种方法
造血干细胞的表达
荧光标记单参数检测造血干细胞(CD34-FITC)实验步骤展开荧光标记双参数检测造血干细胞实验步骤展开荧光标记三参数检测造血干细胞(ProCOUNT法)实验步骤展开
造血干细胞的表达
荧光标记单参数检测造血干细胞(CD34-FITC) 荧光标记双参数检测造血干细胞 荧光标记三参数检测造血干细胞(ProCOUNT法) 实验步骤
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CHO细胞表达体系及其特点
子生物学、分子免疫学等学科的发展使基因工程疫苗具有越来越重要的地位。在基因工程疫苗研究的动物细胞表达系统中,最具代表性的就是中国仓鼠卵巢细胞(Chinese Hamster Ovary,CHO)。它是用来表达外源蛋白最多也最成功的一类细胞。本文就 CHO细胞表达系统在疫苗研制中的应用做一综述。C
细胞的分化与基因表达
细胞分化是个体发育过程中细胞之间产生稳定差异的过程。所以,细胞分化是指同源细胞通过分裂,发生形态、结构与功能特征稳定差异的过程。细胞分化的实质是基因选择性表达的结果,在个体发育过程中基因按照一定程序相继激活的现象,称为基因的差次表达(differential expression)或顺序表达(Seq
无细胞蛋白表达技术介绍
无细胞蛋白表达技术是指用含有蛋白合成必需的组分(核糖体,转运RNA,氨酰合成酶,启动/延伸/终止因子,三磷酸鸟苷,ATP,Mg2+和K+)的细胞裂解物在体外进行蛋白合成。与传统的基于细菌或真核细胞的蛋白表达系统相比较,无细胞蛋白表达系统具有独特的优势,包括节约时间、提高具有功能的、可溶的、全长蛋白的
转基因植株的选择实验
实验材料 幼胚盾片试剂、试剂盒 2 4-D AgNO3毒莠定特美汀草铵膦玉米素仪器、耗材 诱导培养基再生培养基实验步骤 1. 将可能含有转化细胞的幼胚盾片置于愈伤诱导培养基上培养产生愈伤组织,诱导培养基中添加 0.5 mg/L 2 , 4-D 和 10 mg /L AgNO3。对农杆菌处理