Cell子刊:癌症发展的一种免疫机制
有时候,当免疫系统发生小错误时,身体将大规模地扩大其响应:发育中的T细胞和B细胞的DNA编辑错误,可引起血液肿瘤。现在,来自宾夕法尼亚大学佩雷尔曼医学院的研究人员表明,当切割和粘贴DNA片段的关键酶,击中染色体上所谓的“脱靶”点时,免疫细胞的发育就会导致动物模型发生癌症。了解这些编辑错误的确切性质,将有助于根据这些分子剪刀设计治疗酶。相关研究结果发表在本周的《Cell Reports》。延伸阅读:科学家破译肿瘤发展的关键步骤。 V(D)J重组酶——在免疫细胞表面产生特异性受体(与外来侵入者匹配,统称为抗原)的编辑酶,有时可能会错过其目标。本文资深作者、病理学系主任David Roth博士,在过去的二十年里,一直想弄清与癌症相关的V(D)J重组酶的错综复杂之处。Roth说:“更好地了解脱靶错误,可能会带来更安全版本的基因工程工具。” V(D)J重组酶只在免疫细胞成熟的早期阶段发挥作用。从骨髓中的这一阶段开始,不同组的抗体和......阅读全文
给细胞染色的碱性染色剂有哪些
碱性染料电离后染料离子带正电,可与酸性物质结合成盐.1、微生物实验室一般常用的碱性染料有美兰、甲基紫、结晶紫、碱性复红、中性红、孔雀绿和蕃红等,在一般的情况下,细菌易被碱性染料染色。2、细胞内的染色体染色剂有龙胆紫,醋酸洋红;DNA的染色剂有甲基绿、二苯胺等。
瑞氏染色中pH对细胞染色的影响
细胞的各大种成分均由蛋白质构成,由于蛋白质是两性电解质,所带正电荷的数量随溶液pH而定。对某一蛋白质而言,如环境pH
免疫酶染色试验_细胞免疫酶染色法
细胞免疫酶染色法(以检测血清中 EB 病毒 IgA 抗体为例说明)实验方法原理免疫酶染色试验 (immunoenzymatic staining test, IEST) 是用酶(如辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶等)标记已知抗体或抗原,与相应抗原或抗体结合,形成酶标记抗体-抗原复合物,复合物中的酶在遇到相
铁染色正常血细胞的染色反应有哪些?
1)细胞外铁: 观察骨髓小粒中的铁,呈弥散蓝色、颗粒状、小珠状或块状。根据骨髓小粒中铁的存在方式及量将细胞外铁分为(-)、(+)、(++)、(+++)、(++++)。 2)细胞内铁: 观察100个中幼红细胞和晚幼红细胞计算出铁粒幼红细胞的百分比。铁粒幼红细胞是指胞质中出现蓝色铁颗粒的幼红细
免疫酶染色试验_细胞免疫酶染色法
细胞免疫酶染色法(以检测血清中 EB 病毒 IgA 抗体为例说明)实验方法原理免疫酶染色试验 (immunoenzymatic staining test, IEST) 是用酶(如辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶等)标记已知抗体或抗原,与相应抗原或抗体结合,形成酶标记抗体-抗原复合物,复合物中的酶在遇到相
意外发现许多体外受精胚胎无法发育的真正原因
对于人类来说,一个受精卵并不能保证繁殖成功。大多数胚胎在受精后的几天内停止发育并死亡,通常是因为它们的染色体数量异常。现在,哥伦比亚大学瓦格洛斯医学院的研究人员发现,这些错误中的大多数是由于在细胞分裂的最初阶段DNA复制的自发错误。这些发现为人类生殖的基础生物学提供了新的见解,从长远来看,可能会提高
流式细胞计PI染色死细胞
PI能够插入双链DNA中。它被活细胞排斥但能穿透正在死亡或已经死亡的细胞的细胞膜。Ⅰ、材料1、PI(e.g.,Cat #537059,Calbiochem,San Diego,CA)2、缓冲体系:1×PBS(Ca2+ and Mg2+ free,e.g.,Cat#9240,Irvine Scient
流式细胞计PI染色死细胞
PI能够插入双链DNA中。它被活细胞排斥但能穿透正在死亡或已经死亡的细胞的细胞膜。Ⅰ、材料1、PI(e.g.,Cat #537059,Calbiochem,San Diego,CA)2、缓冲体系:1×PBS(Ca2+ and Mg2+ free,e.g.,Cat#9240,Irvine Scient
细胞内细胞因子染色步骤
1.样本准备:1) 收集细胞。经刺激和阻断处理的细胞(具体处理方案请参考文献进行),加细胞染色Buffer(或含0.1%BSA的PBS)制成单细胞悬液,调整细胞浓度约为1×107/ml。2) 取100μl细胞/管(约1×106细胞),分别加到做好标记的流式管底部。2.固定:1) 如需要表面染色,选用
血细胞化学染色的染色法—中性粒细胞碱性磷酸酶染色(NAP)的介绍
(1)血细胞化学染色的染色法—中性粒细胞碱性磷酸酶染色(NAP)的原理:中性粒细胞碱性磷酸酶在pH 9.6左右环境中,能水解磷酸萘酚钠底物释放出萘酚,后者与重氮染料偶联,可形成不溶性的有色沉淀(红色颗粒),定位于细胞酶活性所在处。 (2)血细胞化学染色的染色法—中性粒细胞碱性磷酸酶染色(NAP
细胞核基因组
每条染色体含1个DNA分子,1个细胞的全部遗传信息(基因)都编码在线状的DNA分子上。由于每个体细胞中有2套染色体(2n),故所含的DNA是由两个基因组(genome)构成。每个单倍体基因组约含3.2×109bp.人类基因的平均长度为1~1.5kb,所以基因组以足以编码1.5×106蛋白质,但实
Cell子刊:癌症发展的一种免疫机制
有时候,当免疫系统发生小错误时,身体将大规模地扩大其响应:发育中的T细胞和B细胞的DNA编辑错误,可引起血液肿瘤。现在,来自宾夕法尼亚大学佩雷尔曼医学院的研究人员表明,当切割和粘贴DNA片段的关键酶,击中染色体上所谓的“脱靶”点时,免疫细胞的发育就会导致动物模型发生癌症。了解这些编辑错误的确切性
形成胚胎,这里最易出错
当人类卵细胞受精时,两个包含染色体的细胞结构(中间的圆点)会合并成一个,然而这个过程经常会出错。 在一个精子使一个卵子受精后,如果一切按计划进行,两个染色体会联合成一个基因组。然而,对发育中的胚胎进行的观察表明,这一至关重要的过程经常出错——该发现有助于解释为什么至少一半新形成的人类胚胎的
培养细胞的染色实验——苏木精伊红染色法
培养细胞可用各种方法染色,有一般和特殊之分;一般染色为观察细胞一般形态之用,特殊染色为用于观察细胞的特殊成分和结构的染色方法。内容来源:组织培养和分子细胞学技术。实验材料苏木精试剂、试剂盒甘油冰醋酸伊红铵矾仪器、耗材载玻片盖玻片实验步骤1. 37 ℃温BSS漂洗3 次,每次20 秒~1 分钟;中性
人淋巴细胞姐妹染色体区分染色
实验概要人淋巴细胞姐妹染色体区分染色实验原理姐妹染色体在正常情况下化学组成及结构都是一致的,因此不能用单纯染色方法将之区别开来。 1973年Latt发现让细胞在含Brdu的培养基中培养了2个细胞周期,再以Hoechst33258染色后,两条姐妹染色单体就出现了色差,这就是姐妹染色但提到区分
不同浓度Van-Gieson染色液对细胞染色的研究
【摘要】 目的 不同浓度VG 氏染色液对细胞培养后的染色效果的研究,寻求理想的配置浓度。方法 大鼠肝星状细胞(HSC-T6)培养,细胞爬片,经乙醛刺激细胞活化后,通过HE、VG 氏染色,观察胶原纤维和肌源性成分的染色效果。结果 VG染液:A液(1%酸性品红水溶液)、B液(苦味酸饱和水溶
原代细胞培养中的六个错误做法
原代细胞培养与细胞株不同,两者在培养过程中的操作方法也不一样。这里对原代细胞操作过程中容易出现的6个错误及对应方法做一个说明。1.长时间水浴解冻因为原代细胞非常容易受到解冻过程的影响,所以在37℃水浴锅中解冻时,要在水中摆动溶解。在细胞半溶后(不要等到全部溶解),迅速拿到生物安全柜或超净台中,用1m
原代细胞培养中的六个错误做法
原代细胞培养与细胞株不同,两者在培养过程中的操作方法也不一样。这里对原代细胞操作过程中容易出现的6个错误及对应方法做一个说明。以下六种做法都是不正确的, 有这些习惯的使用者们一定要注意改掉错误试验方法1.长时间水浴解冻因为原代细胞非常容易受到解冻过程的影响,所以在37℃水浴锅中解冻时,要在水中摆动
血细胞分析仪WNR通道采样错误一例
案例经过周三上午审核血常规报告时,发现一结果未有白细胞计数及分类结果。查看标本,未见凝块及血少,遂重新上机复查,结果报警提示“WNR通道采样错误”,仍无法得到白细胞计数及分类结果。换另外几台血球仪,结果同前。WNR通道是常规白细胞、嗜碱性粒细胞和有核红计数通道,平时极少出现采样错误,这次出现感觉不一
姊妹染色单体细胞简介
其原理是,当细胞接触到5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brdu)时,Brdu可作为核苷酸前体物,专一替代胸腺嘧啶掺入到新合成的DNA链中。只要通过两个细胞复制周期,就可使姐妹染色单体中的一条单体的DNA双链中,有一股链是掺入有Brdu的,而另一条单体的DNA双链中,两股链全掺入有Brdu.这样的细胞经过分
染色体的细胞起源
染色体起源是细胞核起源的核心过程,但依然还是未解之谜。迄今为止的学说主要有:共营模型(syntrophic model)、自演化模型(autogenous model)、病毒性真核生物起源模型(viral eukaryogenesis model)、外膜假说(exomembrane hypoth
正常血细胞的染色反应
1)粒细胞系统:原始粒细胞为阴性反应;自早幼粒细胞至中性分叶核粒细胞均呈阳性反应,并随细胞的成熟,阳性反应的程度逐渐增强;嗜酸性粒细胞的颗粒本身不着色,而颗粒之间的胞浆呈红色;嗜碱性粒细胞为阳性反应,阳性反应物质为大小不一的紫红色颗粒。2)红细胞系统:幼红细胞和红细胞均呈阴性反应。3)单核细胞系统:
正常血细胞的染色反应
1)粒细胞系统:原始粒细胞为阴性反应;自早幼粒细胞至中性分叶核粒细胞均呈阳性反应,并随细胞的成熟,阳性反应的程度逐渐增强;嗜酸性粒细胞的颗粒本身不着色,而颗粒之间的胞浆呈红色;嗜碱性粒细胞为阳性反应,阳性反应物质为大小不一的紫红色颗粒。2)红细胞系统:幼红细胞和红细胞均呈阴性反应。3)单核细胞系统:
肥大细胞染色实验
肥大细胞来源于未分化的间质细胞,分布于血管周围黏膜下、疏松结缔组织、肿瘤组织及过敏性疾病等组织中,易被异染性染料着色。内容来源《免疫组织化学实验技术及应用》实验方法原理肥大细胞形态较大(20~30 μm),细胞核较小,细胞质内充满许多的圆形嗜碱性颗粒。由于颗粒中含有肝素等成分的多硫酸脂,也属于硫酸黏
细胞染色及注意事项
1、细胞染色部位细胞表面染色胞内抗原染色同时标记胞膜和胞内抗原单色标记多色标记2、细胞表面标记表面抗原也可能表达于细胞内染色细胞表面标记的细胞一定是活的未标记细胞亲细胞抗体的存在,使染色复杂。可用洗涤白细胞的方法,或在不含离子的缓冲液中37C孵育1小时,可有效去除亲细胞抗体Fc受体,可以加外源性免
肥大细胞染色实验
实验方法原理 肥大细胞形态较大(20~30 μm),细胞核较小,细胞质内充满许多的圆形嗜碱性颗粒。由于颗粒中含有肝素等成分的多硫酸脂,也属于硫酸黏多糖类,能够被异染性染料着色,常用甲苯胺蓝染色法。实验材料 石蜡组织切片试剂、试剂盒 二甲苯无水乙醇中性树胶蒸馏水冰醋酸甲苯胺蓝仪器、耗材 滴管实验步骤
细胞免疫荧光染色实验
实验原理利用抗原抗体反应,鉴定细胞是否表达某种蛋白。细胞经固定后,用特异性抗体(一抗)识别目的蛋白,再用一抗的抗体(二抗)识别一抗,二抗一般耦联荧光基团或化学反应基团,通过荧光或化学发光显示目的蛋白。主要试剂防淬灭剂、DPBS、指甲油、4% PFA、10 μg/mL PI、10 μg/mL Hoec
细胞免疫荧光染色实验
实验原理利用抗原抗体反应,鉴定细胞是否表达某种蛋白。细胞经固定后,用特异性抗体(一抗)识别目的蛋白,再用一抗的抗体(二抗)识别一抗,二抗一般耦联荧光基团或化学反应基团,通过荧光或化学发光显示目的蛋白。主要试剂防淬灭剂、DPBS、指甲油、4% PFA、10 μg/mL PI、10 μg/mL Hoec
免疫组织/细胞化学染色2
四 结果分析 编号 阳性片 待检片 阴性对照 结论 1 - -
免疫组织/细胞化学染色1
一 基本原理免疫组织/细胞化学是利用抗原抗体具有高度特异性结合反应的原理,采用已知抗体检测组织或细胞的抗原物质,然后以适当的方式显示其结合信号以证明组织或细胞是否存在未知抗原,并进行定性、定位或定量的研究。二 基本步骤 1 三步法:以SP(链霉卵白素-过氧化物酶)试剂盒为例: 石蜡切片脱蜡至