Nature子刊:解密DNA的X档案

DNA复制和DNA修复是所有生命的基本程序,也是生命科学领域的重要谜题。现在,Sheffield大学的研究团队揭开了这个谜题的关键部分。他们捕捉到了前所未有的细节,阐明了细胞分裂之后从DNA双链中去除分支DNA的分子机制。这项研究于六月六日发表在Nature Structural & Molecular Biology杂志上。 分支DNA(branched DNA)在美国经典科幻剧《X档案》中有不少戏份,联邦调查局探员Scully怀疑外星人将分支DNA插入了自己的血液。当然,在现实中分支DNA并不是外星人搞的鬼,我们体内每天都会生成这种分子。每一次细胞分裂都会出现分支DNA,它们是DNA复制必不可少的中间形态。 这项研究通过分子快照展示了FEN(Flap EndoNuclease enzymes)修剪DNA、恢复双链结构的具体过程。“FEN酶与肿瘤发展和突变有关,这项研究的发现可以帮助我们更好的诊断和治疗癌症。了......阅读全文

DNA重组(DNA-recombination)技术:DNA重组的载体2

二、噬菌体载体作为细菌寄生物的噬菌体,大多数具有编码多种蛋白质的基因,能利用宿主细胞的蛋白质合成体系,进行生长和增殖。构建的噬菌体载体,以λ噬菌体、M13和粘粒最为常用。㈠ λ噬菌体载体野生型λDNA是一种基因组为4.8 kb的线性双链DNA,全部序列已知,共编码50多个基因。其中约一半基因参与

DNA重组(DNA-recombination)技术:DNA重组与鉴定1

重组DNA是在体外用限制性内切酶,将不同来源的DNA分子进行特异地切割,获得的目的基因或DNA片段与载体重新连接,从而组成一个新的DNA杂合分子。重组的DNA分子能够通过一定的方式进入相应的宿主细胞,在宿主细胞中进行无性增殖,获得大量的目的基因或DNA片段,此过程称基因克隆。重组的DNA分子也能够在

DNA重组(DNA-recombination)技术:DNA重组的载体1

载体(vector)是携带靶DNA(目的DNA)片段进入宿主细胞进行扩增和表达的运载工具。常用的载体是通过改造天然的细菌质粒、噬菌体和病毒等构建而成。目前已构建成的载体主要有质粒载体、噬菌体载体、病毒载体和人工染色体等多种类型,亦可根据其用途不同分为克隆载体和表达载体二类。载体的构建和选择应考虑以下

DNA重组(DNA-recombination)技术:DNA重组的载体3

在作为载体时,这些噬菌体有一个很大的优点,即克隆到M13mp载体的外源DNA片段(双链),在子代噬菌体便成为了单链形式。故应用M13mp进行克隆,可方便地分离到大量含有外源DNA某一单链的DNA分子。这种单链DNA可在下列工作中作模板:①主要用作双脱氧链终止法进行DNA序列测定的模板;②制备仅有一条

DNA重组(DNA-recombination)技术:DNA重组与鉴定2

(1)CaCl2处理以后的转化: 当细菌处于0℃、二价阳离子(如Ca2+、Mg2+等)低渗溶液中时,细菌细胞膨胀成球形,处于感受态;此时转化混合物中的DNA形成抗DNA酶的羟基-钙磷酸复合物粘附于细胞表面,重组DNA在42℃短时间热冲击后吸附在细胞表面,在丰富培养基中生长数小时后,球状细胞恢复原

DNA重组(DNA-recombination)技术:DNA重组与鉴定3

当多克隆位点有外源DNA片段插入时,破坏此酶的N端阅读框架,产生无α互补功能的N端片段,因此在带有外源DNA片段的细菌在含有IPTG/X-gal的培养基上呈白色,见图7-11 。如果外源DNA插入片段相当短,不破坏β-半乳糖苷酶的氨基端氨基酸序列的阅读框,有时产生的重组体菌落不呈白色而是呈浅蓝色。4

聚合酶的功能特性

聚合作用在引物RNA'-OH末端,以dNTP为底物,按模板DNA上的指令由DNApolⅠ逐个将核苷酸加上去,就是DNApolⅠ的聚合作用。酶的专一性主要表现为新进入的脱氧核苷酸必须与模板DNA配对时才有催化作用。dNTP进入结合位点后,可能使酶的构象发生变化,促进3'-OH与5

聚合酶的特性是什么

  聚合作用  在引物RNA'-OH末端,以dNTP为底物,按模板DNA上的指令由DNApolⅠ逐个将核苷酸加上去,就是DNApolⅠ的聚合作用。酶的专一性主要表现为新进入的脱氧核苷酸必须与模板DNA配对时才有催化作用。dNTP进入结合位点后,可能使酶的构象发生变化,促进3'-OH与

聚合酶的基本特性

聚合作用在引物RNA'-OH末端,以dNTP为底物,按模板DNA上的指令由DNApolⅠ逐个将核苷酸加上去,就是DNApolⅠ的聚合作用。酶的专一性主要表现为新进入的脱氧核苷酸必须与模板DNA配对时才有催化作用。dNTP进入结合位点后,可能使酶的构象发生变化,促进3'-OH与5

PMS2基因编码的功能和结构描述

该基因编码的蛋白质是失配修复系统的关键组成部分,其功能是纠正DNA复制和同源重组过程中可能发生的DNA失配、小插入和缺失。该蛋白与mutl同源1(mlh1)基因的基因产物形成异二聚体,形成mutlα异二聚体。mutlα异二聚体具有一种内核溶解活性,在mutsα和mutsβ异二聚体识别不匹配和插入/删

遗传风险基因信号通路相关因子PMS2

该基因编码的蛋白质是失配修复系统的关键组成部分,其功能是纠正DNA复制和同源重组过程中可能发生的DNA失配、小插入和缺失。该蛋白与mutl同源1(mlh1)基因的基因产物形成异二聚体,形成mutlα异二聚体。mutlα异二聚体具有一种内核溶解活性,在mutsα和mutsβ异二聚体识别不匹配和插入/删

实体肿瘤检测PMS2基因介绍

该基因编码的蛋白质是失配修复系统的关键组成部分,其功能是纠正DNA复制和同源重组过程中可能发生的DNA失配、小插入和缺失。该蛋白与mutl同源1(mlh1)基因的基因产物形成异二聚体,形成mutlα异二聚体。mutlα异二聚体具有一种内核溶解活性,在mutsα和mutsβ异二聚体识别不匹配和插入/删

PMS2基因突变因子与药物介绍

该基因编码的蛋白质是失配修复系统的关键组成部分,其功能是纠正DNA复制和同源重组过程中可能发生的DNA失配、小插入和缺失。该蛋白与mutl同源1(mlh1)基因的基因产物形成异二聚体,形成mutlα异二聚体。mutlα异二聚体具有一种内核溶解活性,在mutsα和mutsβ异二聚体识别不匹配和插入/删

DNA损伤修复信号通路相关因子PMS2

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PMS2正相关基因编码功能描述

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PNAs:人类基因组中藏着病毒的“灵魂”

  研究者们发现,从远古时期开始,我们的祖先的DNA中就藏有病毒的"灵魂"。其中一些病毒一旦被唤醒,将会是十分危险的。最近一项研究中,科学家们找到了新的藏在我们DNA中的病毒"灵魂"。  通过筛查2500份人类基因组,研究者们发现有36种病毒随着进化过程在不断地累积。其中有19种病毒此前从未见过,其

核糖核酸酶H的基本特征

在许多反转录病毒中与多功能酶的反转录酶有关,在病毒基因组进入DNA转录的不同阶段执行重要的功能。在真细菌中,核糖核酸酶H确信在以下方面是所必需的:从Okazaki片段去除RNA引物时、在转录子进入DNA聚合酶I启动DNA合成所用引物的转录过程时,以及在去除R-环为在大肠杆菌染色体复制起点提供不规则D

关于核糖核酸酶H的特征介绍

  在许多反转录病毒中与多功能酶的反转录酶有关,在病毒基因组进入DNA转录的不同阶段执行重要的功能。在真细菌中,核糖核酸酶H确信在以下方面是所必需的:从Okazaki片段去除RNA引物时、在转录子进入DNA聚合酶I启动DNA合成所用引物的转录过程时,以及在去除R-环为在大肠杆菌染色体复制起点提供不规

核糖核酸酶H的特征介绍

  在许多反转录病毒中与多功能酶的反转录酶有关,在病毒基因组进入DNA转录的不同阶段执行重要的功能。在真细菌中,核糖核酸酶H确信在以下方面是所必需的:从Okazaki片段去除RNA引物时、在转录子进入DNA聚合酶I启动DNA合成所用引物的转录过程时,以及在去除R-环为在大肠杆菌染色体复制起点提供不规

核糖-核酸酶H的特征

在许多反转录病毒中与多功能酶的反转录酶有关,在病毒基因组进入DNA转录的不同阶段执行重要的功能。在真细菌中,核糖核酸酶H确信在以下方面是所必需的:从Okazaki片段去除RNA引物时、在转录子进入DNA聚合酶I启动DNA合成所用引物的转录过程时,以及在去除R-环为在大肠杆菌染色体复制起点提供不规则D

基因工程的载体3

⑷基因组成 lDNA至少包括61个基因,大多基因按功能相似性成簇排列,其中一部分为噬菌体生命活动的必须基因,另一部分约1/3为非必须区段。 3. l噬菌体载体的类型 插入型 (Insertion vectors )

软X射线源上X射线能谱与X射线能量的测量

本文介绍了国内首次利用针孔透射光栅谱仪对金属等离子体Z箍缩X射线源能谱的测量结果及数据处理方法。同时用量热计对该源的单脉冲X射线能量进行了测量并讨论了其结果。

清华大学生科院最新Nature子刊文章

  2016年5月16日,清华大学大学生命学院朱听课题组与化学系刘磊课题组合作在Nature Chemistry杂志在线发表了题为 “A synthetic molecular system capable of mirror-image genetic replication and transc

PCR技术的基本原理

⑴PCR技术的基本原理:该技术是在模板DNA、引物和四种脱氧核糖核苷酸存在下,依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应。DNA聚合酶以单链DNA为模板,借助一小段双链DNA来启动合成,通过一个或两个人工合成的寡核苷酸引物与单链DNA模板中的一段互补序列结合,形成部分双链。在适宜的温度和环境下,DNA聚合酶将

概述外显子捕捉的操作步骤及原理

  (1)基因组DNA经“霰弹法”切成小片段后,克隆在位于“外显子捕捉序列”下游的克隆位点上。  (2)将这些重组载体汇总后感染反转录病毒的专宿包装细胞系(ecotropicretroviral packaging cell line)——ψ2细胞系。ψ2细胞提供蛋白质产物使载体(自身不能合成病毒蛋

具有遗传风险的基因介绍PMS2基因

该基因编码的蛋白质是失配修复系统的关键组成部分,其功能是纠正DNA复制和同源重组过程中可能发生的DNA失配、小插入和缺失。该蛋白与mutl同源1(mlh1)基因的基因产物形成异二聚体,形成mutlα异二聚体。mutlα异二聚体具有一种内核溶解活性,在mutsα和mutsβ异二聚体识别不匹配和插入/删

​DNA损伤修复信号通路PSM2基因的临床解释

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PMS2基因的结构及作用

该基因编码的蛋白质是失配修复系统的关键组成部分,其功能是纠正DNA复制和同源重组过程中可能发生的DNA失配、小插入和缺失。该蛋白与mutl同源1(mlh1)基因的基因产物形成异二聚体,形成mutlα异二聚体。mutlα异二聚体具有一种内核溶解活性,在mutsα和mutsβ异二聚体识别不匹配和插入/删

正相关基因PMS2基因的临床解释

该基因编码的蛋白质是失配修复系统的关键组成部分,其功能是纠正DNA复制和同源重组过程中可能发生的DNA失配、小插入和缺失。该蛋白与mutl同源1(mlh1)基因的基因产物形成异二聚体,形成mutlα异二聚体。mutlα异二聚体具有一种内核溶解活性,在mutsα和mutsβ异二聚体识别不匹配和插入/删

生物实验室原理篇pcr技术原理

  pcr(聚合酶链式反应)是1985年由英国PE-Cetus企业的生物学家Kary?Banks?Mullis创造发明的这种可在离体迅速测序特殊遗传基因或DNA编码序列的技术性。它的基本概念类似DNA的天然拷贝全过程,其非特异关键取决于和靶编码序列两边相辅相成的寡核苷酸引物,它由转性——复性——拓宽