天津工生所酵母转录单元高效组装整合技术获进展
酿酒酵母广泛应用于能源燃料、化学品和天然化合物等的合成生产。开发简易高效的,能够在酵母染色体上组装整合大量转录单位的技术方法,实现复杂异源代谢途径在酵母中的组装与表达,是酵母合成生物学与代谢工程研究的热点。 中国科学院天津工业生物技术研究所微生物与合成生物学研究团队和新酶设计与酵母基因组工程研究团队合作,利用二型S内切酶组装方法优势,以及酵母自身的高效同源重组效率,经模块化设计建立了一套DNA组装和染色体整合方法,并命名为模块化两步组装(Modularized two-step,M2S)技术。通过该技术,可以在5天内整合完成由4个转录单元组成的β-胡萝卜素生物合成途径,并能整合出包含10个转录单元的合成途径,充分证明了M2S技术的快速高效性。 研究结果表明,基于该技术,在酵母体外完成大部分转录单元组装后,在酵母体内进行同源整合的DNA片段数目明显减少,装配效率显著提高,错配率显著降低,因此能够实现更多DNA片段的同步组装......阅读全文
胞内晶体蛋白基因的酿酒酵母真核表达
实验概要本实验将酿酒酵母作为胞内晶体蛋白的携带和表达宿主,同时,作为可能的营养体喂养海洋线虫P. redivivus将所表达的目的蛋白导入线虫机体,观察线虫的生长、发育、繁殖或是死亡情况,探讨胞内晶体蛋白对昆虫病原线虫以外的线虫是否具有营养作用。为此,首先构建一种重组大肠杆菌,其所携带的重组质粒能够
酿酒酵母培养基的制备实验——SC培养基
试剂、试剂盒酵母氮碱基葡萄糖SC-Ura 或 SC-Trp 或 SC-Len 或 SC-His 的混合物蒸馏水琼脂仪器、耗材锥形瓶实验步骤1. 在 1 L 的带螺旋盖的瓶中或锥形瓶中将下面的成分溶于 500 ml 水中,置于振荡器上混匀。酵母氮碱基 4.0 g,葡萄糖 12.0 g,SC-Ura 或
抗酿酒酵母抗体(ASCA)测定的临床意义是什么
用于炎症性肠病(IBD)诊断与鉴别诊断,是克罗恩病(CD)特异性抗体(70%)。
重组酿酒酵母生产纤维素乙醇研究取得新进展
以纤维素为原料发酵生产第二代燃料乙醇不仅是发展非粮食型新能源的主要出路之一,而且可以减轻农业废弃物对环境造成的污染,具有重要的经济和生态意义。纤维素乙醇工业化生产的理想途径是利用一种微生物在同一个反应器中完成纤维素酶制备、纤维素糖化及乙醇发酵的全过程,即联合生物加工工艺(Co
重组乙型肝炎疫苗(酿酒酵母)的成分和接种对象介绍
1、成分和性状 有效成分:乙型肝炎病毒表面抗原。 辅料:氢氧化铝、氯化钠。 2、接种对象 本疫苗适用于对乙型肝炎疫苗常规免疫无应答的16岁及以上年龄的乙型肝炎易感者。 以上所述“无应答者”系指按照常规免疫剂量和程序接种3剂乙型肝炎疫苗后,经采血确认其抗体水平未达到阳转者(≥10mIU/
人抗酿酒酵母抗体(ASCA)elisa试剂盒分析检测说明
检测范围: 48T 25 ng/L -800 ng/L使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本抗酿酒酵母抗体(ASCA)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人抗酿酒酵母抗体(ASCA)水平。用纯化的人抗酿酒酵母抗体(ASCA)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往
酿酒酵母做细胞工厂,改造后可合成名贵香料原料
近日,中科院大连化学物理研究所研究员周雍进团队在天然产物萜类合成生物学研究中取得新进展。团队在酿酒酵母中构建并优化了二萜香紫苏醇生物合成途径,通过全局调控中心代谢途径,实现了香紫苏醇的高效合成。相关成果发表在《代谢工程》上。 龙涎香是重要名贵高级香料,其实质是抹香鲸肠内分泌物的干燥品。近年来,研
化工大学重组酿酒酵母生产纤维素乙醇研究
北京化工大学在重组酿酒酵母生产纤维素乙醇研究取得新进展 以纤维素为原料发酵生产第二代燃料乙醇不仅是发展非粮食型新能源的主要出路之一,而且可以减轻农业废弃物对环境造成的污染,具有重要的经济和生态意义。纤维素乙醇工业化生产的理想途径是利用一种微生物在同一个反应器中完成纤维素酶制备、纤维素糖化
酿酒酵母的LiAc/ssDNA/PEG高效转化法实验_高效转化法
实验材料细胞试剂、试剂盒LiAc仪器、耗材YPAD 平板YPAD 液体培养基实验步骤1. 取 10 μl 细胞在 YPAD 平板上涂布 2 cm2,培养过夜;或者接种 5 ml 的 YPAD 液体培养基,于 30℃ 震荡培养过夜。2. 将一瓶 YPAD 培养基于 30℃ 平衡过夜。3. 去 50 m
美酒get|西农等研发2株优良葡萄酒酿酒酵母
5月23日,中国轻工业联合会主持召开“中国本土葡萄酒酵母种质资源创新与产业化应用”成果技术鉴定会。中国酒业协会执行理事长王琦,中国工程院院士孙宝国、陈坚等专家组成的鉴定委员会认为由西北农林科技大学、安琪酵母股份有限公司、烟台张裕葡萄酿酒股份有限公司、中粮长城酒业有限公司、宁夏大学、御马国际葡萄酒业(
酿酒酵母的LiAc/ssDNA/PEG高效转化法实验_转化材料的制备
实验材料DNA试剂、试剂盒TE 缓冲液双蒸水仪器、耗材磁力搅拌器玻璃烧杯实验步骤一、单链载体 DNA 的制备1. 在 100 ml 灭菌 TE 缓冲液中溶解 200 mg 高分子量 DNA,置于磁力搅拌器上剧烈搅拌 2~3 个小时以混匀。2. 将载体 DNA 溶液分装成 9 个 10 ml 和 10
酿酒酵母生物合成类胡萝卜素研究取得新进展
近日,广东省科学院微生物研究所研究员朱红惠团队在酿酒酵母生物合成类胡萝卜素研究方面取得新进展。相关成果发表于《国际生物大分子杂志》(International Journal of Biological Macromolecules)。酿酒酵母细胞内转录因子INO2/INO4介导的代谢调控。研究团队
欧盟批准酿酒酵母制剂CNCM-I4407作为饲料添加剂
据欧盟官方公报消息,2020年2月4日,欧盟委员会发布法规(EU)2020/147号条例,批准酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)CNCM I-4407制剂作为断奶仔猪、母猪(以便对哺乳仔猪有益)和奶牛饲料添加剂,并修订法规(EC) No 2148/2004、(EC) N
酿酒酵母的LiAc/ssDNA/PEG高效转化法实验_转化含有质粒菌株
实验材料细胞试剂、试剂盒YPAD仪器、耗材培养瓶SC 减样选择培养基实验步骤1. 在一个 250 ml 的培养瓶中,接种该菌株到 25 ml 相应的 SC 减样选择培养基中,200 r/min 培养过夜。2. 检测每毫升细胞数,按 2.5X108 个细胞计算所需培养物体积。3. 将该体积的培养物加到
抗酿酒酵母抗体(ASCA)测定的参考值及临床意义
参考值 正常人:阴性 , ELISA法 临床意义 用于炎症性肠病(IBD)诊断与鉴别诊断,是克罗恩病(CD)特异性抗体(70%)。
酿酒酵母培养基的制备实验——YPAD培养基的制备
试剂、试剂盒酵母提取物蛋白胨葡萄糖偏硫酸腺嘌呤琼脂水仪器、耗材锥形瓶实验步骤1. 在 1 L 的带螺旋盖的瓶中或锥形瓶中将下面的成分溶于 500 ml 水中,置于振荡器上。酵母提取物 6.0 g,蛋白胨 12.0 g,葡萄糖 12.0 g,偏硫酸腺嘌呤 60.0 mg,琼脂 10.0 g,加水到 6
中科院天津工生所:人工合成三萜酸类膳食补充剂获进展
中科院天津工业生物技术研究所研究员张学礼在三萜酸类膳食补充剂的人工细胞合成方面取得重要进展。相关成果日前发表于《代谢工程》。 据了解,山楂、枇杷、苹果、枣和梨等水果的表皮蜡质中含有微量的高值三萜酸类活性成分。这种成分在抗病毒、糖尿病控制和皮肤修复等方面具有广泛用途,是一类重要的膳食补充剂。
天津工生所等在阿拉伯糖转运蛋白功能研究中获进展
五碳糖的利用是生物质资源转化为燃料和化工产品的重要瓶颈之一。阿拉伯糖是一种重要的五碳糖,是生物质中含量位于第三位的碳水化合物,仅次于葡萄糖和木糖,对阿拉伯糖的有效利用是控制生物炼制成本实现经济化的必要因素之一。然而,常用的微生物酿酒酵母并不能利用阿拉伯糖,通过现代代谢工程手段对酿酒酵母进行分子改
我国学者成功将氢化可的松产量进一步提高286%
氢化可的松作为重要的甾体激素类药物,具有抗病毒、消炎、抗过敏及抗休克等重要药理学作用,也可作为前体合成其他类固醇药物,如泼尼松龙、甲基泼尼松龙、地塞米松、倍他米松、曲安奈德龙和倍氯米松等。目前,氢化可的松的工业化生产多采用半生物合成的方式,化学合成结合最后一步的生物转化,但是该方法常伴有副产物生
工程策略进行复杂天然产物人参皂苷的异源生物合成
在天然宿主中,复杂天然产物的生物合成和存储存在跨越多种类型亚细胞区室(如线粒体、内质网、脂滴、液泡等)的特征,甚至还存在跨越不同组织器官的特征。例如紫杉醇、阿托品生物碱、人参皂苷、大麻素和甾体激素等天然产物的生物合成过程中,其酶、辅因子和中间体等常常具有区室分布的特征。这些特征虽然是宿主长期适应
酿酒酵母培养条件实验——液体培养基中细胞滴度的检测
实验方法原理酵母在琼脂或液体培养基中的理想培养温度是30℃,培养皿平板应倒置放入塑料盒中,于孵箱或培养室内进行培养。当孵育时间超过2或3天时,塑料盒可防止平板上的琼脂干裂。当使用液体培养基培养时,要使用旋转式或往复式摇床,至少每分钟200转,以保证充分通气;进行大体积液体培养时使用锥形瓶,培养基为瓶
天津工生所等构建出新型基因组随机突变系统
与传统的定向进化相比,体内连续进化的研究仍处在较初级的阶段。目前仅在大肠杆菌或酿酒酵母等模式微生物底盘中构建出了体内连续进化系统,而这些系统本身存在局限,体内连续进化技术还需进一步的发展和完善,以满足更广泛的需求。 中国科学院天津工业生物技术研究所研究员张学礼带领的微生物代谢工程团队、研究员毕
新研究丰富酵母基因表达调控-提升产物合成效率
华南理工大学食品科学与工程学院教授黄明涛团队对酿酒酵母中的未折叠蛋白响应元件(UPRE)进行了改造,并应用于基因表达的动态调控。相关成果于4月30日在美国《国家科学院院刊》(PNAS)以“创制UPRE2突变体用于酵母基因的动态调控”(Tailored UPRE2 variants for dynam
天津工生所等构建出新型基因组随机突变系统
与传统的定向进化相比,体内连续进化的研究仍处在较初级的阶段。目前仅在大肠杆菌或酿酒酵母等模式微生物底盘中构建出了体内连续进化系统,而这些系统本身存在局限,体内连续进化技术还需进一步的发展和完善,以满足更广泛的需求。 中国科学院天津工业生物技术研究所研究员张学礼带领的微生物代谢工程团队、研究员毕
华南理工团队最新成果丰富酵母基因表达
4月30日,华南理工大学食品科学与工程学院黄明涛教授课题组对酿酒酵母中的未折叠蛋白响应元件(UPRE)进行了改造,并应用于基因表达的动态调控。该成果以“Tailored UPRE2 variants for dynamic gene regulation in yeast”为题,发表在《美国国家科学
欧盟延长一种酿酒酵母作为奶羊饲料添加剂的授权期限
据欧盟官方公报消息,2019年5月28日,欧盟委员会发布法规(EU)2019/857,批准延长酿酒酵母CNCM I-1077作为奶山羊和奶绵羊饲料添加剂的授权日期。 酿酒酵母CNCM I-1077作为饲料添加剂属于添加剂类别“动物技术添加剂”,功能分组上属于 “肠道菌群稳定剂”。酿酒酵母CNC
酿酒酵母的LiAc/ssDNA/PEG高效转化法实验_快速简便的转化法
实验材料酵母菌试剂、试剂盒LiAc仪器、耗材YPAD 平板YPAD 液体培养基实验步骤1. 将 10 μl 接种物在 YPAD 平板上涂布 2.0 cm2,培养过夜。2. 对一个转化来说,在微量离心管中用 1.0 ml 灭菌水悬浮一接种环酵母菌。3. 离心沉淀细胞,将水去掉。4. 用 500 μl
清华大学生科院Cell:酿酒酵母“催化后剪接体”的结构
这篇题为Structure of the Post-catalytic Spliceosome from Saccharomyces cerevisiae的论文首次展示了pre-mRNA中3’剪接位点的识别状态,该结构为回答RNA剪接反应过程中pre-mRNA中的3’剪接位点如何被识别,第二步转
Chem-Soc-Rev综述酿酒酵母染色体人工合成的技术和方法
DNA测序技术的迅猛发展,使得我们可以比以往任何时候都更加方便地“阅读”生物体的遗传编码序列,但是很多复杂生命信息很难单纯通过DNA测序获知,如果能够人工合成染色体,实现DNA认知从“阅读时代”到“书写时代”的转变,将有助于对复杂生命现象的理解。近日Chem Soc Rev杂志刊登了天津大学元英
天津工生所揭示与工业酵母高温发酵性能相关的遗传变异
酿酒酵母作为一种重要的工业生物,不仅被广泛用于传统食品发酵工业,也是合成生物学和现代发酵工业最常用的底盘细胞之一,用于生物燃料、大宗化学品、天然化合物、医药原料等多元化产品的研发,具有巨大的市场潜力和社会经济效益。酿酒酵母细胞生长需要合适的温度,温度的变化将导致细胞生长和繁殖速度的改变以及细胞酶