江苏中药材地方标准引入PCR检测技术
近日,江苏省食品药品监管局在南京召开《江苏省中药材标准》(2016版)发行会。新发布的《江苏省中药材标准》中,最大的亮点为首次在药材鹿血中引入了DNA-PCR检测技术,这标志着江苏省中药材标准的研究已处于全国领先水平。 DNA-PCR检测技术全称是“脱氧核糖核酸聚合酶链式反应”。该技术具有响应快速、灵敏度高且特异性好的优点,是当前应用最广的分子生物学技术。该技术利用特异的引物可以从微量样品中扩增出相应特定的DNA片段,达到放大检测核酸信号的目的。同时该技术具有非常高的反应特异性,可以区分最少至几个核苷酸碱基的差异,因此在诊断性检测领域得到广泛应用。由于在进化过程中不同物种的遗传物质DNA存在序列上的保守性和多变性,尤其在物种内部具有较高的保守性,而物种之间存在较大的差异性,利用DNA-PCR技术的高度灵敏性和特异性,可以区分不同物种材料,尤其是具有较高经济价值的产品。 该检测技术由苏州红冠庄国药股份有限公司提出并研究,江......阅读全文
江苏中药材地方标准引入PCR检测技术
近日,江苏省食品药品监管局在南京召开《江苏省中药材标准》(2016版)发行会。新发布的《江苏省中药材标准》中,最大的亮点为首次在药材鹿血中引入了DNA-PCR检测技术,这标志着江苏省中药材标准的研究已处于全国领先水平。 DNA-PCR检测技术全称是“脱氧核糖核酸聚合酶链式反应”。该技术具有响应
PCR检测方案助力马兜铃酸快速检测-保障中药材安全使用
近日,中国中医科学院中药研究所所长陈士林及其课题组找到一种用于识别传统草药中是否含有马兜铃酸的方法,该项研究日前在线发表于自然出版集团的《科学报告》上。 马兜铃酸来自马兜铃科植物,是一种具有肾毒性和致癌性的化学物质。研究显示由马兜铃酸引发的基因突变高于比烟草和紫外线对人体的影响。自2001年开
中药材农药残留检测的主要方法
由于中药材的种植者缺乏合理使用农药的知识,同时,农药市场充斥着很多假冒伪劣产品, 种植者长期使用高毒及高残留农药,上述诸多原因造成了许多高毒及高残留农药在中药材中的残留,这严重制约了我国中药材走向国际草药市场。然而,令人感到鼓 舞的是国家药品监督管理局于2002年3月18日颁布并于6月1日施行的
中药材农药残留检测的主要方法
由于中药材的种植者缺乏合理使用农药的知识,同时,农药市场充斥着很多假冒伪劣产品, 种植者长期使用高毒及高残留农药,上述诸多原因造成了许多高毒及高残留农药在中药材中的残留,这严重制约了我国中药材走向国际草药市场。然而,令人感到鼓 舞的是国家药品监督管理局于2002年3月18日颁布并于6月1日施行的5中
PCR检测方法
PCR反应的zui大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性,但令人头痛的问题是易污染,极其微量的污染即可造成假阳性的产生。污染原因一、标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染,或标本放置时,由于密封不严溢于容器外,或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提取过程中,由于吸样枪污染
PCR产物的检测PCRELISA法
在一个引物的5’端标记上生物素以便使其能与包被板上的亲合素结合而固定PCR产物,而在另一引物的5’端标记FITC,用HRP标记的抗FITC抗体与之结合显色,即可进行常规ELISA检测。如设立标准对照,此技术还可用于定量分析。 【试剂与配置】 包被液:4.3mmol/L Na2HPO4,
PCR检测主要优势?
其实每一种检测方法都有其擅长的应用场景。以病毒检测为例,通常的免疫学检测方法(胶体金、ELISA、化学发光等)的检测对象是病毒的抗原或抗体,相当于“侧面描绘”。由于人体从感染到抗原或抗体可检测到存在一个时间窗口期,因此免疫学检测方法一般不合适作为早期诊断。而核酸检测的检测对象是病毒的核酸分子,则是“
现场PCR检测方案
春暖花开,万物复苏,无论是自然界还是科学界,都在发生着日新月异的变化,近年来医疗诊断及食品安全监测领域的技术创新更是层出不穷,而这一切都离不开分子生物学检测手段的支持。目前大家对于即时现场检测的需求也十分多样化,比如,技术不太熟练的基层人员需要在短时间内能够得到准确的检测结果,或是在野外条件下需要携
PCR检测方法(一)
PCR反应的最大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性,但令人头痛的问题是易污染,极其微量的污染即可造成假阳性的产生。污染原因一、标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染,或标本放置时,由于密封不严溢于容器外,或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提取过程中,由于吸样枪污染导致
什么叫pcr检测
聚合酶链反应(PCR)的基本原理是一种酶促合成反应。即在模板DNA、引物和脱氧核糖核苷酸存在下,在DNA聚合酶的作用下,使DNA链扩增延伸。试验先通过加热变性,使DNA双螺旋的氢链断裂,解离成单链DNA;然后通过退火,突然降温使引物与其互补的模板在局部形成杂交链;然后再在DNA聚合酶、脱氧核糖核苷三
什么是PCR检测?
PCR(聚合酶链反应):类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。基本原理:PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性主要依赖于和靶序列两端互补的寡核苷酸引物,它由变性——复性——延伸三个基本反应步骤构成。所需材料:模板DNA正二价镁离子引物反应缓冲液T
多重PCR核酸检测
2020年3月11日,世卫组织总干事谭德赛在日内瓦召开的新闻发布会上宣布,新冠肺炎(COVID-19)疫情已经构成全球性大流行(pandemic)。截止到目前,中国的疫情在国内联防联控机制下已基本得到控制,而国外的情况却不容乐观。新冠肺炎疫情爆发于呼吸道疾病高发的季节,有各类呼吸道病原体单一感染或合
什么是PCR检测
聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。它具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点;能在一个试管内将所要研究 的目的基因或某一DNA片段于数小时内扩增至十万乃至百万倍,使肉眼能直接观察和判断;可从一
PCR检测方法(二)
3.实验操作注意事项:尽管扩增序列的残留污染大部分是假阳性反应的原因,样品间的交叉污染也是原因之一。因此,不仅要在进行扩增反应是谨慎认真,在样品的收集、抽提和扩增的所有环节都应该注意:(1)戴一次性手套,若不小心溅上反应液,立即更换手套。(2)使用一次性吸头,严禁与PCR产物分析室的吸头混用,吸头不
什么是PCR检测
聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。它具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点;能在一个试管内将所要研究 的目的基因或某一DNA片段于数小时内扩增至十万乃至百万倍,使肉眼能直接观察和判断;可从一
磐安县中药材检验检测中心挂牌成立
9月19日,伴随着第十届中国磐安中药材博览会暨2016年“友强杯”中国磐安中药寻宝越野公开赛的开幕,磐安县中药材检验检测中心挂牌成立了。 磐安县中药材检验检测中心挂牌成立标志着该县对中药材产业保驾护航能力上升到了一个新台阶。中心成立以后,可以投入更多的研发力量进行中药材方面的研究,不仅能够推动
中药材黄曲霉素检测技术概述(一)
一、 中药材质量安全现状 中药材是中医防病治病的重要基础。中药材在田间生长、采收加工、储藏运输等各个环节都会因污染霉菌而发生霉变。这些霉菌分泌的有毒代谢产物使中药材发霉变质,直接威胁到群众的用药安全。中药中的霉菌毒素主要有黄曲霉毒素,赭曲霉素,玉米赤霉烯酮,展青毒素,伏马毒素等。中药材的种类是影响真
中药材黄曲霉素检测技术概述(二)
5. 高效液相色谱分析 PriboFast KRC光化学衍生器 波长:254 nm HPLC-色谱柱 :黄曲霉毒素专用C-18色谱柱 150 x 4.6 mm; 流 动 相 :甲醇-水 45:55
中药材品质无损检测技术研究进展
目前中药材品质检测的方法主要分为有损检测和无损检测两类。有损检测即常规检测方法,包括气相色谱法、高效液相色谱法、高效液相色谱-质谱联用法等,这些方法可以对中药材品质进行检测,但是检测的周期长,成本高,并且对中药材具有破坏性,不适合现场的快速检测。无损检测包 X 射线技术、计算机视觉技术、核磁共振
PCR(RTPCR)反转录-定性检测方法
1、试剂 (1)10倍 RT 缓冲液:500mmol/L Tris·Cl(pH8.0),0.60 mmol/L MgCl2,400mmol/L KCl,10mmol/L DTT。 (2)10倍 PCR 缓冲液:100mmol/L Tris·Cl(pH8.3),500mmol/L kCl,15
中药材中黄曲霉毒素检测:HPLC(药典方法)
黄曲霉毒素危害:黄曲霉毒素是一类真菌(如黄曲霉和寄生曲霉)的有毒的代谢产物,它们具有很强的致癌性,主要存在于药材、谷物、坚果、棉籽以及动物饲料相关的产品中。其毒性远远高于氰化物、砷化物和有机农药的毒性,其中以B1毒性最大。当人摄入量大时,可发生急性中毒,出现急性肝炎、出血性坏死、肝细胞脂肪变性和胆管
免疫PCR(ImmunoPCR)概念、组成和免疫PCR产物的检测
(一) 免疫PCR技术的概念免疫PCR是一种抗原检测系统,将一段已知序列的DNA片段标记到抗原抗体复合物上,再用PCR方法将这段DNA扩增,然后用常规方法检测PCR产物。免疫PCR集PCR的高灵敏度与抗体和抗原反应的特异性于一体。其突出的特点是指数级的扩增效率带来了极高的敏感度,能检出浓度低至2ng
PCR法检测支原体
PCR法是20世纪80年代中期建立起来的一种体外DNA扩增技术,其基本原理是酶促DNA合成反应,即在DNA模板、引物和脱氧核糖核酸存在下,经DNA聚合酶的作用,使DNA 链扩增延伸。该方法具有灵敏度高、特异性强、快速的特点,但其对实验环境的要求严格,实验成本较高,有时还有假阳性的现象出现。1、仪
弓形体的PCR检测
弓形体有广泛的自然疫原性,人体多为隐性感染,抵抗力低时可以有临床表现。弓形体的诊断较困难,血清学方法敏感性较高但有交叉性出现假阳性而且无法确定近期感染、远期感染或一过性感染。确诊的方法是活组织检查或动物接各,这些方法阳性率太低不能推广。PCR检测可以检出样本中1-2个病原体而且准确性高,是目前对
PCR法检测支原体
实验方法原理PCR法的基本原理是酶促DNA合成反应,即在DNA模板、引物和脱氧核糖核酸存在下,经DNA聚合酶的作用,使DNA链扩增延伸。实验材料细胞样品试剂、试剂盒dNTPTapDNA聚合酶琼脂糖矿物油支原体检测试剂盒仪器、耗材超净工作台PCR仪电泳仪凝胶成像分析系统台式离心机旋涡混悬器实验步骤1.
什么是荧光PCR检测
荧光定量PCR是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针,对PCR产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程,结合相应的软件可以对产物进行分析,计算待测样品模板的初始浓度。原理: PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探
多重PCR法检测STEC
产志贺毒素大肠杆菌(STEC)具有很强的致病性,全球范围内由其引发的食物中毒和其他公共卫生事件呈逐年升高之势,严重威胁人类的健康。开发快速可靠的检测手段对其引发的食源性疾病的监测、控制和预防意义重大。本文结合对STEC分子生物学特征的研究,着重介绍了多重PCR检测技术在检测食品中STEC方面的
PCR产物的电泳检测
PCR产物的电泳检测时间一般为48h以内,有些最好于当日电泳检测,大于48h后带型不规则甚致消失。常见问题如下: 一、假阴性,不出现扩增条带 PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备,②引物的质量与特异性,③酶的质量及, ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。 模板
荧光定量PCR检测方法
所谓实时荧光定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。 检测方法 1.SYBRGreenⅠ法: 在PCR反应体系中,加入过量SYBR荧光染料,SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后,发射荧光信
数字PCR检测技术介绍
数字PCR(Digital PCR-dPCR)技术是一种新的核酸检测和定量方法,又称单分子PCR,它的原理是将一个标准PCR反应分配到大量微小的反应器中,在每个反应器中包含或不包含一个或多个拷贝的目标分子( DNA模板) ,实现“单分子模板PCR扩增”。 扩增结束后,通过阳性反应器的数目“数出”目标