生化学家开发利用光控制细胞生物学的新方法
加拿大卡尔加里大学和阿尔伯塔大学研究人员合作开发了一种新方法可以利用光控制细胞水平的生物学行为。相关研究成果发表于2017年3月13日的《自然-方法》期刊。 这种工具被称为光可切割蛋白质,当暴露于光下时会分裂成两部分,使科学家以新的不同的方式研究和操纵细胞活性。科学家首先用光可切割蛋白将细胞蛋白与抑制剂连接,阻止细胞蛋白执行其通常的功能。随后通过光照细胞,使光可切割蛋白断裂,去除抑制剂,释放细胞内的蛋白质。由此这些蛋白开始执行其在细胞内的正常功能。 该工具相对容易操作并且广泛适用于涉及控制细胞内部过程的其他研究。研究人员表示,光敏蛋白的功效在于它可用于研究任何活细胞的内部工作。例如,光遗传学工具广泛用于激活小鼠的大脑活动。还可使用光可切割蛋白研究实验室中的单个细菌、酵母、人类细胞、甚至整个动物,如斑马鱼或小鼠等。其潜在应用包括研究发育生物学中哪些细胞发育成哪些组织的问题和基因编辑技术的可能性等。光可切割蛋白的基因将在Ad......阅读全文
英开发出新型光活性抗菌材料-黑暗环境中作用依旧
英国伦敦大学研究人员最近在《化学科学》杂志上发表论文称,他们研发出一种新型光活性抗菌材料,不仅可在光照条件下对细菌产生致命效果,在黑暗环境中亦具有很好的抗菌作用,现代医院如广泛使用这种抗菌材料,可有效降低院内感染。 院内感染是所有医院都不可忽视的问题,即使在建立了一系列严格清洁制度的现代化
AM:基于弯液面诱导成膜的光伏活性层制备技术
有机光伏器件由于其良好的溶液加工性、可制备柔性器件、透明度和颜色可调等优势受到关注。其中,基于全聚合物的太阳能电池(all-polymer solar cells)因自身良好的力学性能和优异的器件稳定性,被认为是可能实现未来应用的光伏器件。然而,目前报道的高效率全聚合物太阳能电池(PCE>15%
Calcein释放实验检测细胞毒性T淋巴细胞活性实验
实验方法原理Calcein acetoxymethy1酯(Calcein-AM)是一种胞浆荧光标记物,本身无荧光,渗入细胞后细胞内酯酶催化生成的水溶性绿色荧光物质不易透出细胞。靶细胞用其标记后与效应细胞共育,再加Fluoro-Quench试剂(一种以Ca2+螯合的小牛血红蛋白主要成分、还含溴化乙啶试
透化细胞和退化细胞器中测定比活性实验4
测定[γ-32P]ATP的比活性实验步骤准备下列材料:含有未知浓度mp] ATP的细胞裂解物样品10mg/ml激酶底物肽渐夜(Calbiochem)0.5mraol/L cAMP 溶液 I、Calbiochem)cA-PrK (Calbiochem)cA-PrK分析缓冲液lmol/L DTT储存液(
透化细胞和退化细胞器中测定比活性实验1
从标记的细胞或者细胞裂解物中提取ATP实验步骤1.从标记细胞提取ATP1) 备下列材料:本实验用到的所有溶液必须用Mlli - Q纯化的水或它的等价物配制。冰冷的4%高氣酺(v/v)三-n-辛胺1,1,2-三氮三m乙烷32p标记的细胞带螺帽的聚丙烯离心管测量范围PH4~8的PH试纸小心:高氣酸■
Calcein释放实验检测细胞毒性T淋巴细胞活性实验
实验方法原理 Calcein acetoxymethy1酯(Calcein-AM)是一种胞浆荧光标记物,本身无荧光,渗入细胞后细胞内酯酶催化生成的水溶性绿色荧光物质不易透出细胞。靶细胞用其标记后与效应细胞共育,再加Fluoro-Quench试剂(一种以Ca2+螯合的小牛血红蛋白主要成分、还含溴化
Calcein释放实验检测细胞毒性T淋巴细胞活性实验
实验方法原理 Calcein acetoxymethy1酯(Calcein-AM)是一种胞浆荧光标记物,本身无荧光,渗入细胞后细胞内酯酶催化生成的水溶性绿色荧光物质不易透出细胞。靶细胞用其标记后与效应细胞共育,再加Fluoro-Quen
透化细胞和退化细胞器中测定比活性实验2
用发光分析定量测定ATP实验步骤Sigma公司提供了 -种测定MP浓度的非常简单,灵敏&又方便的方法。其原理是用荧光素酶从荧光素和ATP中产生光。在荧光素/荣光素酶浓度恒定的情况下,可以绘制一条不同ATP浓度时产光量变化的标准曲线,因此可以很容易地对来自细胞裂解物的未知样品进行定量。然而,如果要测定
透化细胞和退化细胞器中测定比活性实验3
用高效液相层析定量测定ATP实验步骤1)准备下列材料:Whatman Partisphere SAX高效液相层析柱和保护柱线性梯度洗脱液设定在254nm的紫外线监测仪装配好的0.2;mi Whatman滤膜和滤器0.2^?过滤的Milli-Q水0.2/im S@_0,:5m〇l/LNH4H2ro4
Calcein释放实验检测细胞毒性T淋巴细胞活性实验
实验方法原理 Calcein acetoxymethy1酯(Calcein-AM)是一种胞浆荧光标记物,本身无荧光,渗入细胞后细胞内酯酶催化生成的水溶性绿色荧光物质不易透出细胞。靶细胞用其标记后与效应细胞共育,再加Fluoro-Quen
光散射法检测细胞凋亡的介绍
在FCM 系统中,被检细胞在液流中通过仪器测量区时,经激光照射,细胞向空间360°立体角的所有方向散射光线,其中前向散射光( FSC) 的强度与细胞大小有关,而侧向散射光(SSC) 的强度与质膜和细胞内部的折射率有关。细胞凋亡时,细胞固缩,体积变小,核碎裂形成,细胞内颗粒往往增多,故凋亡细胞FS
光毒性和细胞毒性的区别
光毒性开放分类: 生物强烈的阳光中的紫外线本身就能够造成严重的日光性皮炎,甚至皮肤癌。许多药物对人体不会造成伤害,但在阳光中的紫外线的作用下,渗入人体皮肤蛋白质中的这些药物便会发生化学反应,从而引发皮肤过敏症。强烈的阳光可使药物活化,直接破坏或杀死皮肤细胞,使暴露在光线下的皮肤在日晒后的几分钟或几小
细胞器的光镜观察(1)
[实验用品] 1.材料:洋葱鳞茎、口腔上皮细胞、盖片培养的单层动物细胞、蟾蜍肾脏切片;猫或兔的脊神经节切片、马蛔虫子宫切片。 2.器具:光学显微镜、载玻片、盖玻片、小镊子、吸管、牙签、吸水纸、擦镜纸、剪刀、恒温水浴箱、小培养皿、小染色缸、大平皿。 3.试剂:中性红-詹纳
关于瘤细胞光镜特征的简介
细胞体积较大或中等,呈圆形,椭圆或不规则。核为圆形、卵圆形或不规则形,有胚胎样核,其核形弯曲,核膜一侧平滑微凸,另一侧凹陷有多个切迹。有的瘤细胞核类似霍奇金的R-S细胞样的双核瘤细胞,但无诊断性R-S细胞。有时可见排列为马蹄形或花环状的多核巨细胞,染色质为粗块状,核仁明显嗜酸性。
细胞器的光镜观察(2)
(三)方法 1. 动物细胞骨架的显示方法 (1)无菌条件下,在25 ml 培养瓶中放入清洁无菌的盖玻条,然后接种3 ml左右的细胞悬液,盖紧瓶塞,37℃恒温箱内培养24小时。 (2) 取出盖玻片条,浸入装有6mmol磷酸缓冲液的小瓶中5~
中科院生物物理研究所:活性“蛋白质”-捕光“梦工厂”
蛋白质,英文名称“protein”,是生物体中广泛存在的一类生物大分子,也是生命活动的主要承担者。 时值春暖花开,在中国科学院生物物理研究所寻访,本报记者在这里看到的“蛋白质”,不仅充满科学的奥妙和神奇,而且彰显出其应有的活泼、活性与活力,恍若走进一所“梦工厂”。那么
自然杀伤细胞活性测定的相关内容
【概述】 自然杀伤细胞(NK)介导天然免疫应答,它不依赖抗体和补体,即能直接杀伤靶细胞,如肿瘤细胞或受病毒感染的细胞等;此外,尚有免疫调节功能,也参与移植排斥反应和某些自身免疫病的发生发展。 【参考值】 51Cr释放法:自然释放率
巨噬细胞吞噬功能测定的促凝血活性
激活巨噬细胞可产生一种与膜结合的凝血活性因子,加速正常血浆的凝固,为此取已经37℃预温的正常兔血浆和cac12混合液,加入经粘附单层巨噬细胞的试管中,移置37℃,即时记录血浆凝固时间。实验证明当巨噬细胞与lps、肿瘤相关抗原或hbsag等温育后,可见血浆凝固时间明显缩短。本法稳定方便,也是检测不
自然杀伤细胞活性的正常值是什么
自然释放率要求
NADPH细胞色素C(P450)活性测定
NADPH-细胞色素C(P-450)是一种血红素蛋白,它是一个末端氧化酶,由于当它处于还原形式时,与一氧化碳结合形成一种亚铁羰基加成物。在可见光450nm处有最大的吸收峰,故命名为细胞色素P-450,和其他的天然血红素相同,分子中的铁原子是以与原卟啉IX呈符合物的形式存在,肝中含细胞色素P-450酶
细胞凋亡检测实验——Caspase3活性检测法
实验方法原理Caspase家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用,其中caspase-3为关键的执行分子,它在凋亡信号传导的许多途径中发挥功能。Caspase-3正常以酶原(32KD)的形式存在于胞浆中,在凋亡的早期阶段,它被激活,活化的Caspase-3由两个大亚基(17KD)和两个小亚基(
活性硫物种抑制依赖性细胞死亡机制
日本东北大学研究团队日前报告说,他们发现,机体内大量存在的生理活性物质——活性硫物种可分解细胞内的蛋白质聚集体,进而抑制依赖性细胞死亡的机制,这表明活性硫物种有可能用于治疗神经变性疾病。 活性硫物种由多个硫原子连接而成,是一类用于调控细胞活动的关键生物信号分子,其水平波动与一些生理
125IUdR释放试验测定NK细胞活性
实验方法原理 25I-UdR(125I-2′脱氧尿嘧啶核苷)是胸腺嘧啶核苷的类似物,作为DNA合成的前体物,能相当特异地取代胸腺嘧啶核苷掺入到细胞核DNA链上。因此,可用125I-UdR标记体外传代培养的肿瘤细胞作为靶细胞,以外周血分离的单个
《Nature》:生病时适度饥饿可以增强免疫细胞活性
当我们生病时,我们常常没有食欲。这对我们的新陈代谢也有影响:因为它不再提供碳水化合物,它转换成燃烧脂肪。这就产生了被称为酮体的能量丰富的分子。这些可能有助于我们的身体更好地应对病毒。至少目前的研究结果是这样的。波恩大学医院临床化学和临床药理学研究所的Christoph Wilhelm教授解释说:“我
简述NK细胞活性测定(NK)的检查过程
一、NK细胞活性测定(NK)的检查过程: 取传代后24h生长良好的YAC-1细胞(存活率>95%)按1×106/mL YAC-1细胞悬液加3H-TdR 10uCi进行标记,于37℃、5%CO2培养箱中培养2h,每30min振荡1次。标记后的细胞用培养液洗涤3次,重悬于培养液中,使细胞浓度为1×
NK细胞活性测定:LDH法原理和实验步骤
一、原理 活细胞的胞浆内含有LDH。正常情况下,LDH不能透过细胞膜,当细胞受到NK细胞的杀伤后,LDH释放到细胞外。LDH 可使乳酸锂脱氢,进而使NAD还原成NADH,后者再经递氢体吩嗪二甲酯硫酸盐(PMS)还原碘硝基氯化四氮唑(INT),INT 接受H+被还原成紫红色甲月赞类化合物。在酶
关于自然杀伤细胞活性的注意事项介绍
(1) 自然杀伤细胞活性— 要求效/靶细胞比为100∶1,若比>100∶1,自然杀伤率不呈对数增加。且标本用量亦大。 (2) 自然杀伤细胞活性— 标记靶细胞放置时间不宜过久。因随时间延长死细胞增加,自然释放率欠准确。 (3) 自然杀伤细胞活性— 标记的125IUdR浓度要合适,要求125IU
调整Treg细胞功能提高身体的抗癌免疫活性
通过精确调整关键免疫细胞的功能,科学家们寻找到一种完全新型的癌症免疫疗法(利用人体的免疫系统攻击肿瘤)。 值得注意的是,在利用免疫功能使肿瘤萎缩的同时,不引发不期望的自身免疫反应。新的研究在动物体内开展,目前还没有在人类临床中使用。 费城儿童医院(CHOP)Wayne W. Ha
简述NK细胞活性测定(NK)的临床意义
一、NK细胞活性测定(NK)的临床意义: 异常结果:受试样品组的NK细胞活性显著高于对照组的NK细胞活性,可判定该项试验结果阳性。活性升高,常见于病毒感染的早期,Down综合征,接受器官移植、骨髓移植的患者等及免疫增强剂治疗患者。活性降低,常见于恶性肿瘤、重症联合免疫缺陷病,AIDS和免疫抑制
免疫学实验NK细胞活性测定(NK)介绍
NK细胞活性测定(NK)介绍: 自然杀伤(NK)细胞是一群异质性多功能的免疫细胞,是与特异性免疫应答无关的自然毒杀伤细胞。它对体内多种细胞,特别是T、B淋巴细胞有调节作用。它所介导的裂解细胞作用不受主要组织相溶性复合体的限制。自然杀伤细胞不仅对癌细胞,对病毒、胞内寄生菌和老化变异细胞也具有极强