Calcein释放实验检测细胞毒性T淋巴细胞活性实验

实验方法原理Calcein acetoxymethy1酯(Calcein-AM)是一种胞浆荧光标记物,本身无荧光,渗入细胞后细胞内酯酶催化生成的水溶性绿色荧光物质不易透出细胞。靶细胞用其标记后与效应细胞共育,再加Fluoro-Quench试剂(一种以Ca2+螯合的小牛血红蛋白主要成分、还含溴化乙啶试剂,它对细胞无毒,不能进入活细胞但可能进入膜已破损的死细胞),淬灭培养液中的荧光,在板式荧光扫描仪上定量测定活细胞内的荧光强度,与靶细胞对照孔(代表细胞100%存活)比较。即可计算效应细胞杀伤靶细胞百分比。本法简便可靠,无须收集和转移培养上清,重复性高,变异性小,测定数据自动输入计算机,适于大批量测定;可测CTL、LAK及NK细胞活性,还可在光学显微镜或荧光显微镜下直接观察细胞。 实验步骤1. 靶细胞的标记 用5μmol/L Calcein AM 37℃ 水浴30min进行标记。 2. 效-靶细胞作用 ......阅读全文

Calcein释放实验检测细胞毒性T淋巴细胞活性实验

实验方法原理Calcein acetoxymethy1酯(Calcein-AM)是一种胞浆荧光标记物,本身无荧光,渗入细胞后细胞内酯酶催化生成的水溶性绿色荧光物质不易透出细胞。靶细胞用其标记后与效应细胞共育,再加Fluoro-Quench试剂(一种以Ca2+螯合的小牛血红蛋白主要成分、还含溴化乙啶试

Calcein释放实验检测细胞毒性T淋巴细胞活性实验

            实验方法原理 Calcein acetoxymethy1酯(Calcein-AM)是一种胞浆荧光标记物,本身无荧光,渗入细胞后细胞内酯酶催化生成的水溶性绿色荧光物质不易透出细胞。靶细胞用其标记后与效应细胞共育,再加Fluoro-Quen

Calcein释放实验检测细胞毒性T淋巴细胞活性实验

            实验方法原理 Calcein acetoxymethy1酯(Calcein-AM)是一种胞浆荧光标记物,本身无荧光,渗入细胞后细胞内酯酶催化生成的水溶性绿色荧光物质不易透出细胞。靶细胞用其标记后与效应细胞共育,再加Fluoro-Quen

Calcein释放实验检测细胞毒性T淋巴细胞活性实验

实验方法原理 Calcein acetoxymethy1酯(Calcein-AM)是一种胞浆荧光标记物,本身无荧光,渗入细胞后细胞内酯酶催化生成的水溶性绿色荧光物质不易透出细胞。靶细胞用其标记后与效应细胞共育,再加Fluoro-Quench试剂(一种以Ca2+螯合的小牛血红蛋白主要成分、还含溴化

T淋巴细胞转化实验

            实验方法原理 T 细胞在体外培养时,受到非特异性有丝分裂原(如PHA、ConA)刺激后,可出现细胞体积增大,代谢旺盛,蛋白和核酸合成增加,即向淋巴母细胞转化。淋巴细胞转化率的高低可以反映机体的细胞免疫水平,因此可作为测定机体免疫功能的指标之一

T淋巴细胞转化实验

实验方法原理T 细胞在体外培养时,受到非特异性有丝分裂原(如PHA、ConA)刺激后,可出现细胞体积增大,代谢旺盛,蛋白和核酸合成增加,即向淋巴母细胞转化。淋巴细胞转化率的高低可以反映机体的细胞免疫水平,因此可作为测定机体免疫功能的指标之一。 淋巴细胞转化试验有形态计数法、MTT 法和同位素法三种。

T淋巴细胞转化实验

            实验方法原理 T 细胞在体外培养时,受到非特异性有丝分裂原(如PHA、ConA)刺激后,可出现细胞体积增大,代谢旺盛,蛋白和核酸合成增加,即向淋巴母细胞转化。淋巴细胞转化率的高低可以反映机体的细胞免疫水平,因此可作为测定机体免疫功能的指标之一

T-淋巴细胞增殖实验

实验步骤基 本 方 案 1 未 致 敏 T 淋巴细胞的活化材 料备选方案1 用抗体激活未致敏的T 细胞这种方法适用于当抗C D 3/T C R 复合物抗体不能有效结合小鼠辅助细胞上的F c 受体 ,或其可溶形式不能有效活化T 细胞时。值得注 意 的 是 ,在 某 种 抗 体(如 抗 G 7、Thy-

Calcein/PI细胞活性与细胞毒性检测试剂盒使用说明

使用说明:1.Calcein AM/PI检测工作液的配制:按照96孔板每孔100μl Calcein AM/PI检测工作液的体系,参考下表配制适量的Calcein AM/PI检测工作液,并充分混匀。10个样品100个样品1000个样品Calcein AM (1000X)1μl10μl100μlPI 

细胞毒性T淋巴细胞的诱导及检测

基 本 方 案 1 从 C TL 前体中诱导细胞毒性注意:反应细胞应根据抗原的种类选择是否需要进行体内致敏。材 料反应细胞来源:未致敏的或者体内致敏的小鼠脾脏细胞(见辅助方案 1 和 2致敏培养基刺激细胞来源:未修饰或半抗原修饰的小鼠脾脏细胞(见辅助方案 3)R P M I -1 0 完全培养基H

T、B淋巴细胞分离实验

实验方法原理 淋巴细胞与用溴花二氨基异硫氢化物(简称AET)处理的绵羊红细胞(SRBC)混合后,其中全部T淋巴细胞均能吸附AET—SRBC,形成牢固稳定而巨大的E—花环,较正常未处理的SRBC形成的E—花环百分比为高,而且形成快速,不易脱落,重复性好。再经淋巴细胞分层液分离时,AET—E花环易沉于管

T、B淋巴细胞分离实验

淋巴细胞主要分T淋巴细胞和B淋巴细胞两大亚群,它们具有不同的特性和功能,用于(1)免疫学研究(2)淋巴细胞的鉴定。实验方法原理淋巴细胞与用溴花二氨基异硫氢化物(简称AET)处理的绵羊红细胞(SRBC)混合后,其中全部T淋巴细胞均能吸附AET-SRBC,形成牢固稳定而巨大的E-花环,较正常未处理的SR

细胞活性和细胞毒性检测的实验方法

细胞数量确定1.将细胞悬浮液(100μL/孔)接种在96洞孔板中。将板在潮湿的培养箱中预孵育(例如,在37℃,5%CO2下)。2.向板的每个孔中加入10μLCCK8溶液。注意不要在孔洞中引入气泡,因为它们会干扰O.D.读数。3.将培养板在培养箱中孵育1-4小时。4.使用酶标仪测量450 nm处的吸光

乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测NK细胞活性实验

            实验方法原理 乳酸脱氢酶(LDH)是活细胞胞浆内含酶之一。在正常情况下,不能透过细胞膜。当靶细胞受到效应细胞的攻击而损伤时,细胞膜通透性改变,LDH可释放至介质中,释放出来的LDH在催化乳酸生成丙酮酸的过程中,使氧化型辅酶I(NAD+)变成

乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测NK细胞活性实验

实验方法原理乳酸脱氢酶(LDH)是活细胞胞浆内含酶之一。在正常情况下,不能透过细胞膜。当靶细胞受到效应细胞的攻击而损伤时,细胞膜通透性改变,LDH可释放至介质中,释放出来的LDH在催化乳酸生成丙酮酸的过程中,使氧化型辅酶I(NAD+)变成还原型辅酶I (NADH2),后者再通过递氢体-吩嗪二甲酯硫酸

乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测NK细胞活性实验

实验方法原理 乳酸脱氢酶(LDH)是活细胞胞浆内含酶之一。在正常情况下,不能透过细胞膜。当靶细胞受到效应细胞的攻击而损伤时,细胞膜通透性改变,LDH可释放至介质中,释放出来的LDH在催化乳酸生成丙酮酸的过程中,使氧化型辅酶I(NAD+)变成还原型辅酶I (NADH2),后者再通过递氢体-吩嗪

乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测NK细胞活性实验

            实验方法原理 乳酸脱氢酶(LDH)是活细胞胞浆内含酶之一。在正常情况下,不能透过细胞膜。当靶细胞受到效应细胞的攻击而损伤时,细胞膜通透性改变,LDH可释放至介质中,释放出来的LDH在催化乳酸生成丙酮酸的过程中,使氧化型辅酶I(NAD+)变成

细胞毒性T淋巴细胞的分类特征

CTL是以克隆为单位的不均质的细胞群,根据其细胞表面标志(表面抗原和表面受体)可分为3类:1、细胞毒或杀伤性T细胞(Tc):其表面抗原为CD3+,CD4+,CD8+,TCR有a和β两条多肽链组成。2、细胞毒性T辅助细胞(CTh):其细胞表面标志为CD3+,CD4+,CD8+,TCRaβ,它是原来的T

关于细胞毒性T淋巴细胞的简介

  细胞毒性T淋巴细胞(CTL),是白细胞的亚部,为一种特异T细胞,专门分泌各种细胞因子参与免疫作用。对某些病毒、肿瘤细胞等抗原物质具有杀伤作用,与自然杀伤细胞构成机体抗病毒、抗肿瘤免疫的重要防线。  细胞毒性T淋巴细胞又称杀伤性T淋巴细胞,是机体抗肿瘤机制的重要环节,也是肿瘤免疫过继疗法主要效应细

细胞毒性T淋巴细胞的作用机理

一、杀伤靶细胞的过程CTL杀伤靶细胞是一个连续过程,可分为三个阶段,主要研究内容如下:1、效应靶细胞结合:CTL是通过其膜上的受体TCR,即Ti-CD3分子与靶细胞结合,此时膜上的淋巴细胞功能相关抗原Ⅰ与靶细胞膜上的配基Ⅰ,又称细胞内粘附分子相互作用,即靶细胞与效应细胞初步接触。此时亲和力低,为非特

细胞毒性T淋巴细胞的分类特征

CTL是以克隆为单位的不均质的细胞群,根据其细胞表面标志(表面抗原和表面受体)可分为3类:1、细胞毒或杀伤性T细胞(Tc):其表面抗原为CD3+,CD4+,CD8+,TCR有a和β两条多肽链组成。2、细胞毒性T辅助细胞(CTh):其细胞表面标志为CD3+,CD4+,CD8+,TCRaβ,它是原来的T

细胞毒性T淋巴细胞的作用机理

一、杀伤靶细胞的过程CTL杀伤靶细胞是一个连续过程,可分为三个阶段,主要研究内容如下:1、效应靶细胞结合:CTL是通过其膜上的受体TCR,即Ti-CD3分子与靶细胞结合,此时膜上的淋巴细胞功能相关抗原Ⅰ与靶细胞膜上的配基Ⅰ,又称细胞内粘附分子相互作用,即靶细胞与效应细胞初步接触。此时亲和力低,为非特

细胞毒性T淋巴细胞的细胞试验过程

该试验测定被特定抗原攻击后抗原特异性CD8+T淋巴细胞的裂解或者引起的炎症反应。用细胞毒性T淋巴细胞(CTL)测试细胞介导免疫需要成功的抗原呈递,以及随之产生的细胞因子、细胞接触依赖的信号转导来产生记忆T淋巴细胞,这是T细胞应答的基础。CTL试验曾用于小鼠和大鼠,也用于大型动物模型,但标准的临床前评

免疫学实验T淋巴细胞亚群介绍

T淋巴细胞亚群介绍:  T淋巴细胞亚群的测定是检测机体细胞免疫功能的重要指标,且对某些疾病(如自身免疫病、免疫缺陷病、恶性肿瘤、血液病、变态反应性疾病等)的辅助诊断,分析发病机制,观察疗效及监测预后有重要意义。T淋巴细胞亚群正常值:  免疫荧光法、桥联酶免疫检测法、SPA花环法:  CD3+细胞阳性

关于细胞毒性T淋巴细胞的相关介绍

  细胞毒性T淋巴细胞(CTL),是白细胞的亚部,为一种特异T细胞,专门分泌各种细胞因子参与免疫作用。对某些病毒、肿瘤细胞等抗原物质具有杀伤作用,与自然杀伤细胞构成机体抗病毒、抗肿瘤免疫的重要防线。  细胞毒性T淋巴细胞又称杀伤性T淋巴细胞,是机体抗肿瘤机制的重要环节,也是肿瘤免疫过继疗法主要效应细

细胞毒性T淋巴细胞的基本信息

细胞毒性T淋巴细胞(CTL),是白细胞的亚部,为一种特异T细胞,专门分泌各种细胞因子参与免疫作用。对某些病毒、肿瘤细胞等抗原物质具有杀伤作用,与自然杀伤细胞构成机体抗病毒、抗肿瘤免疫的重要防线。细胞毒性T淋巴细胞又称杀伤性T淋巴细胞,是机体抗肿瘤机制的重要环节,也是肿瘤免疫过继疗法主要效应细胞之一。

细胞毒性T淋巴细胞的基本信息

细胞毒性T淋巴细胞(CTL),是白细胞的亚部,为一种特异T细胞,专门分泌各种细胞因子参与免疫作用。对某些病毒、肿瘤细胞等抗原物质具有杀伤作用,与自然杀伤细胞构成机体抗病毒、抗肿瘤免疫的重要防线。细胞毒性T淋巴细胞又称杀伤性T淋巴细胞,是机体抗肿瘤机制的重要环节,也是肿瘤免疫过继疗法主要效应细胞之一。

简述细胞毒性T淋巴细胞的分类特征

  CTL是以克隆为单位的不均质的细胞群,根据其细胞表面标志(表面抗原和表面受体)可分为3类:  1、细胞毒或杀伤性T细胞(Tc):其表面抗原为CD3+,CD4+,CD8+,TCR有a和β两条多肽链组成。  2、细胞毒性T辅助细胞(CTh):其细胞表面标志为CD3+,CD4+,CD8+,TCRaβ,

NK细胞活性检测实验步骤

  细胞毒检测技术包括补体依赖细胞毒试验、NK细胞介导的细胞毒试验和特异性CTL活性检测,常用的实验技术有后两种。NK细胞(natural killer cell)是在天然免疫系统发挥主要作用的效应细胞,可直接杀伤病毒感染的靶细胞和某些肿瘤细胞。而细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymp

关于细胞毒性T淋巴细胞的细胞试验介绍

  该试验测定被特定抗原攻击后抗原特异性CD8+T淋巴细胞的裂解或者引起的炎症反应。用细胞毒性T淋巴细胞(CTL)测试细胞介导免疫需要成功的抗原呈递,以及随之产生的细胞因子、细胞接触依赖的信号转导来产生记忆T淋巴细胞,这是T细胞应答的基础。CTL试验曾用于小鼠和大鼠,也用于大型动物模型,但标准的临床