首次亲眼见证!DNA复制与我们想象的并不同

肺部具有造血功能、DNA 聚合酶不需要引物、小脑不仅控制平衡,这些新发现不断在改写着教科书。近日,发表在《细胞》杂志上的一项研究首次观察了单个DNA分子的复制画面。结果发现,DNA复制的随机性要比人们想象的要多得多。这一结论足以引发人们对DNA复制和其它生物学过程的重新思考。 6月15日,发表Cell杂志上题为“Independent and Stochastic Action of DNA Polymerases in the Replisome”的研究中,科学家们首次观察到了单个DNA分子的复制画面,并且获得了一些惊人的发现。研究称,DNA复制的随机性要比人们想象的要多得多。 DNA复制基本知识 正式介绍这一新发现前,先来复习一下DNA复制相关的基础知识。DNA双螺旋结构是由两条方向相反的链构成。复制的第一步是在解旋酶(helicase)的作用下将双螺旋结构拆成两条单链。然后,在引物酶(primase)的作用下,每......阅读全文

DNA聚合酶的缺点

缺点无3'→5'阅读校正功能,在PCR扩增过程可引起错配,30次循环错配率约0.25%。措施:选择高保真Taq酶,如Pfu。原因:Pfu具有3'→5'外切酶活性。注意:Pfu扩增产物为平末端。

耐热DNA聚合酶简介

  耐热DNA 聚合酶(Taq DNA 聚合酶):1969年人们从美国黄石国家森林公园火山温泉中分离出一种嗜热的水生真菌Thermusaquaticus,能在70~ 75C生长,从该菌分离纯化得到一种耐热的、依赖DNA 的DNA 聚合酶,简称Taq DNA 聚合酶。  耐热DNA聚合酶是一种可抗高温

DNA聚合酶的功能

  1)通过核苷酸聚合反应,使DNA链沿5’→3’方向延长(DNA聚合酶活性)[1]  2)催化由3’端水解DNA链(3’→ 5’核酸外切酶活性,用于切除错配的碱基)[1]  3)催化由5’端水解DNA链(5’→ 3’核酸外切酶活性,用于切除引物)[1]  4)催化由3’端使DNA链发生焦磷酸解  

DNA聚合酶及其应用

(一)大肠杆菌DNA聚合酶I是Kornberg A. 1956年首先从大肠杆菌E。Coli 细胞中分离出来的。它是一种多功能性的酶,包括 3种不同的酶活力:5′→ 3′聚合酶活性(模板, 带3′-OH游离基团的引物、4dNTPs、 Mg2+ )。双链特异性的5'→3'核酸外切酶活性。

DNA聚合酶的功能

  [1] 聚合作用:在引物RNA'-OH末端,以dNTP为底物,按模板DNA上的指令由DNApolⅠ逐个将核苷酸  加上去,就是DNApolⅠ的聚合作用。 酶的专一性主要表现为新进入的脱氧核苷酸必须与模板DNA配对时才有 催化作用。dNTP进入结合位点后,可能使酶的 构象发生变化,促进3&

DNA聚合酶及其应用

(一)大肠杆菌DNA聚合酶I是Kornberg A. 1956年首先从大肠杆菌E。Coli 细胞中分离出来的。它是一种多功能性的酶,包括 3种不同的酶活力:5′→ 3′聚合酶活性(模板, 带3′-OH游离基团的引物、4dNTPs、 Mg2+ )。双链特异性的5'→3'核酸外切酶活性。

DNA聚合酶的种类

原核生物大肠杆菌DNA聚合酶DNA聚合酶最早在E.coli中发现,到目前为止已确定有5种类型,分别为DNA聚合酶Ⅰ、DNA聚合酶Ⅱ、DNA聚合酶Ⅲ、DNA聚合酶Ⅳ和DNA聚合酶V,都与DNA链的延长有关。其中DNA聚合酶I、Ⅱ、Ⅲ研究得比较明确。 DNA聚合酶Ⅰ是1956年由Arthur Kombe

DNA聚合酶的定义

  真核细胞有5种DNA聚合酶,分别为DNA聚合酶α(定位于胞核,参与复制引发,不具有5'-3'外切酶活性及3'-5'外切酶活性,有5'-3'聚合酶活性),β(定位于核内,参与高保真度复制,不具有5'-3'外切酶活性,其中疑似存在5&#

DNA聚合酶的特性

原核生物大肠杆菌DNA聚合酶DNA聚合酶最早在E.coli中发现,到目前为止已确定有5种类型,分别为DNA聚合酶Ⅰ、DNA聚合酶Ⅱ、DNA聚合酶Ⅲ、DNA聚合酶Ⅳ和DNA聚合酶V,都与DNA链的延长有关。 其中DNA聚合酶I、Ⅱ、Ⅲ研究得比较明确。DNA聚合酶Ⅰ是1956年由Arthur Kombe

DNA聚合酶的概述

  DNA聚合酶(DNA polymerase)是 细胞复制DNA的重要作用酶。DNA聚合酶 , 以DNA为复制模板,从将DNA由5'端点开始复制到3'端的酶。DNA聚合酶的主要活性是催化DNA的合成(在具备模板、 引物、dNTP 等的情况下)及其相辅的活性。  真核细胞有5种DNA

DNA聚合酶的特性

DNA聚合酶有多种,E.coli就有三种。通常DNA聚合酶具有以下共同特点: ①需要DNA模板,因此这类酶又称为依赖DNA的DNA聚合酶;②需要RNA或DNA作为引物(primer),即DNA聚合酶不能从头催化; ③催化dNTP加到引物的3'-OH末端,其速率为1000nt/min,因而DN

DNA聚合酶的发现

  在50年代的中期,A. Kornberg和他的同事们就想到DNA的复制必然是一种酶的催化作用,于是决心分离出这种酶并研究其结构和作用机制。为了达到这个目的,他们分离的蛋白,然后加到体外合成系统中即 同位素标记的dNTP、Mg2+及模板DNA,经过大量的工作,于1956年终于发现了DNA聚合酶Ⅰ(

DNA聚合酶的应用

E.coli的DNA pol Ⅰ涉及DNA损伤修复,在半保留复制中起辅助的作用。DNA polⅡ在修复损伤中也具有重要的作用。DNA polⅢ是一种多亚基的蛋白质,在DNA新链的从头合成中起复制酶的作用。复制的忠实性问题会影响到翻译的精确性,这种忠实性主要依赖于碱基的特异性配对。据估计每个碱基对将有

PCR-的起源

  聚合酶链式反应(英文:Polymerase chain reaction,缩写:PCR,又称多聚酶链式反应),是一项利用 DNA 双链复制的原理,在生物体外复制特定 DNA 片段的核酸合成技术。这项技术可在短时间内大量扩增目的基因,而不必依赖大肠杆菌或酵母菌等生物体。  诺贝尔化学奖得主凯利·穆

细胞化学词汇DNA自复制

中文名称:自复制英文名称:self-replicating定  义:质粒或其他染色体外DNA分子复制的时间以及速率不受染色体DNA控制的过程。应用学科:细胞生物学(一级学科),细胞遗传(二级学科)

细胞化学词汇DNA-复制起点

中文名称:DNA 复制起点英文名称:DNA replication origin定  义:DNA分子上的复制起始部位,为富含AT的序列,多呈十字形结构,是复制子的组成部分。DNA复制起点决定了复制的起始和起始频率。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

DNA复制执照因子的特点

(一)可启动DNA的复制作用。(二)自起动复制后即开始失去其活性。(三)不能通过核膜进入核内。

细胞化学词汇复制型DNA

中文名称:复制型DNA英文名称:replicative form DNA;RF-DNA定  义:单链核酸(DNA或RNA)病毒在复制期间所形成的由亲代单链分子与子代单链分子配对结合形成的DNA双链。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

细胞化学词汇DNA单向复制

单向复制是指RODC(只读域控制器)的更改可以入站复制但无法出站复制。单向复制,通过限制可以来自于分支的潜在恶意更改无法复制到RODC,有助于提高安全性。

细胞化学词汇DNAθ型复制

θ型复制是DNA在复制原点解开成单链状态的复制,其分别作为模板,各自合成其互补链,出现两个叉子状的生长点,也叫做复制叉。

关于DNA复制的相关介绍

  DNA复制是生物遗传的基础,是所有生物体中最基本的过程。而这一过程是半保留复制,是以最开始的双链分子中的一条作为模板进行DNA复制,产生两个完全一致的DNA分子。细胞水平的校正和纠错机制能确保非常精确地复制DNA的拷贝。DNA复制发生在基因组的特定位置也就是起始点,DNA分子在起始点形成复制叉开

复制型DNA的结构特点

中文名称复制型DNA英文名称replicative form DNA;RF-DNA定  义单链核酸(DNA或RNA)病毒在复制期间所形成的由亲代单链分子与子代单链分子配对结合形成的DNA双链。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

DNA复制的其它方式

DNA还可能存在其他两种复制方式,都以原来亲本DNA双链分子作为模板链。全保留复制(conservative replication):保守复制会使两条原始模板DNA链以双螺旋结合在一起,并产生由两条含有所有新DNA碱基对的新链组成的拷贝。分散复制(dispersive replication):分

关于DNA复制的起源介绍

  DNA的复制是对那些坚持达尔文主义世界观的的人们的一项基本挑战。作为生物信息被复制并传递给后代的过程,这是一个对于细胞的自我复制过程必要的机制。细胞的自我复制对于任何选择性的过程中都是必要的,比如自然选择。因此,试图用自然选择来解释这个机制巨大的复杂性需要人们先要假设他们想解释的东西的客观存在。

DNA复制的其它方式

DNA还可能存在其他两种复制方式,都以原来亲本DNA双链分子作为模板链。全保留复制(conservative replication):保守复制会使两条原始模板DNA链以双螺旋结合在一起,并产生由两条含有所有新DNA碱基对的新链组成的拷贝。分散复制(dispersive replication):分

DNA半不连续复制过程

DNA复制时,以3‘→5‘走向为模板的一条链合成方向为5‘→3‘,与复制叉方向一致,称为前导链;另一条以5‘→3‘走向为模板链的合成链走向与复制叉移动的方向相反,称为后随链,其合成是不连续的,先形成许多不连续的片段(冈崎片段),最后连成一条完整的DNA链。

DNA的滚环复制过程

环状DNA可以采取上述典型的DNA复制方式进行复制,即从复制起点开始,双向同时进行,形成θ样中间物,故又称"θ"型复制,最后两个复制方向相遇而终止复制。但有些环状DNA采用另个一种方式,即滚环复制。例如许多病毒DNA的复制、F因子在接合(conjugation)转移时其DNA的复制,以及许多基因扩增

什么是DNA的复制型?

在未受照射的细菌中,复制位点(replicating site)或生长点开始于DNA分子的起始点,并且复制点围绕环形分子半保留地发生复制。照射后,合饼应用溴尿嘧啶标记和氯化铯梯度离心的方法观察到复制型与正常不同。在此方法中,用3H一胸腺嘧啶预先标记大肠杆菌几个世代。预先标记的细胞或受照射或不受照射,

DNA滚环式复制过程

环状DNA可以采取上述典型的DNA复制方式进行复制,即从复制起点开始,双向同时进行,形成θ样中间物,故又称"θ"型复制,最后两个复制方向相遇而终止复制。但有些环状DNA采用另个一种方式,即滚环复制。例如许多病毒DNA的复制、F因子在接合(conjugation)转移时其DNA的复制,以及许多基因扩增

DNA复制的定义和功能

DNA复制是指DNA双链在细胞分裂以前进行的复制过程,从一个原始DNA分子产生两个相同DNA分子的生物学过程。DNA复制是通过名为半保留复制的机制来得以顺利完成的。DNA复制发生在所有以DNA为遗传物质的生物体中,是生物遗传的基础。