miR124a通过沉默FOXA2导致细胞内脂质积聚异常的机制探讨
参考文献:Mesenchyma stem cells as natural bio-factories for exosomes carrying miR-124a in the treatment of gliomas. Neuro-Oncology（IF7.786）关键技术：1. 重组病毒包装：慢病毒包装、稳转株；2. 分子生物学：Cre-loxP位点特异性重组酶系统；3. 检测分析：WST-1、Transwell、qRT-PCR、Western blot、纳米颗粒跟踪分析技术；4. 动物实验：裸鼠颅内移植瘤模型miR-124a通过沉默FOXA2导致细胞内脂质积聚异常从而引起细胞凋亡 胶质母细胞瘤是星形细胞肿瘤中恶性程度最高的胶质瘤，已有研究表明microRNAs（miRs）有希望成为胶质母细胞瘤的新型治疗方法。然而，何种miRs对抗胶质母细胞瘤的效果最佳，以及如何将miRs递送至胶质母细胞瘤是目前尚未......阅读全文
关于慢病毒载体的包装成分介绍
包装成分的构建应在不重组病毒的装配和感染力的前提下，尽可能地减少无关的HIV-1蛋白的表达，为野生型病毒的恢复设置障碍。Naldini等在构建包装质粒时，阻止env基因的表达。在此基础上，Zufferey等将包装包装质粒上表达调节蛋白Nef、Vif、Vpr和Vpu的4个基因分别删除或联合删除。这
慢病毒包装简要步骤及注意事项
慢病毒包装简要步骤以六孔板中的1孔为例，每个样品需要1×106个293T细胞。1. 取1.5 ml灭菌EP管，加入1.5 μg包装混合质粒和0.5 μg表达质粒以及250 μl的无血清培养基。轻柔混匀，室温孵育5 min。2. 取1.5 ml灭菌EP管，取9 μl 脂质体2000 l溶于250 μl
新技术用声波取外泌体诊断癌症
美国一研究小组9月18日在《美国国家科学院院刊》上发表研究报告称，他们开发出一种运用声波从血液中快速提取细胞外泌体的新技术，能显著改进外泌体或胞外囊泡的提取过程，运用这一技术的微流体便携装置，有望成为血检新工具，使医生快速获得癌症等疾病的特征信息。 细胞外泌体是活体细胞分泌的一种膜性囊泡，直径
一文了解肿瘤转移与外泌体
肿瘤转移是癌症致死的首要原因。长久以来，对肿瘤转移机理的研究一直聚焦于肿瘤与机体之间的相互作用。然而在近年来，由于外泌体被发现可以作为包括肿瘤在内细胞之间信息传递的一种新方式，肿瘤转移研究领域再度变得火热起来。我所（肿瘤转移的预警和预防研究所）以谢晓东博士为首的外泌体研究小组一直致力于研究肿瘤转
2020年自然研究热点——外泌体研究（三）
2．分子标志物分子标志物思路案例1外泌体分子标志物的研究是在表达谱的基础上进行更进一步的分析和筛选，并且通过扩大样本验证，来确认可以作为标志物的分子。这类研究与临床应用联系更紧密，近年来越来越受重视。2019年发表在Molecular Cancer（IF=10.679）上的文章Tumor-ori
2020年自然研究热点——外泌体研究（二）
2.外泌体获批项目中的热点分子由于外泌体的主要功能被认为是细胞之间的信息传递，了解它带有的蛋白质和多种RNA上的信息就变得尤其重要。2019年外泌体中标项目中带有热门话题miRNA、lncRNA和环状RNA的项目数量如下图（图4）所示。我们可以看到，外泌体中的miRNA和lncRNA过去研究的是比
外泌体与蛋白比较，分子质量谁大
1.凝胶过滤法 凝胶过滤法分离蛋白质的原理是根据蛋白质分子量的大小。由于不同排阻范围的葡聚糖凝胶有一特定的蛋白质分子量范围，在此范围内，分子量的对数和洗脱体积之间成线性关系。因此，用几种已知分子量的蛋白质为标准，进行凝胶层析，以每种蛋白质的洗脱体积对它们的分子量的对数作图，绘制出标准洗脱曲线。未知蛋
外泌体的前世今生与肿瘤诊断治疗
1983年华盛顿大学的CLIFFORD HARDING在JCB发表文章，使用电镜发现了微囊体。1985年加拿大麦吉尔大学生物化学系的BIN-TAO PAN，利用电镜发现了类似的现象，结果也发表在JCB。两年后，麦吉尔大学的实验室在JBC的文章，使用了EXOSOMES（外泌体）。 外泌体最早认为
前沿：外泌体研究缺了Simoa怎么行？
什么是外泌体 外泌体（Exosome）是细胞分泌的一种细胞外囊泡（Extracellular vesicle，EV），直径约为30至150nm，具有脂质双分子层膜结构，含有多种蛋白质、核酸、脂质等成分。几乎所有类型的细胞，都可以产生并释放外泌体。外泌体由细胞分泌释放出来，通过体液传播，
NTA用于外泌体定量的准确性
希尔博士的意见是： NTA可以提供样本中颗粒的粒径分布和绝对浓度，但不能够以NTA所提供的浓度数值这个单一的指标来定量外泌体。 首先，我们必须理解NTA检测原理：该技术基于布朗运动，通过视频分析颗粒计数，可同时获取样本中颗粒的粒径和绝对浓度。 因此，样本中的所有颗粒，都会被侦测
2020年自然研究热点——外泌体研究（一）
一、外泌体研究热度持续攀升外泌体（exosome）是活细胞分泌的30-200nm的囊泡，在电镜下具有非常明显单层膜结构，通常为茶托型或一侧凹陷的半球形。其主要来源于细胞内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体，经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中。多种细胞在正常及病理状态下均可分泌外泌体，它们广泛存在
Cell－Reports：外泌体miRNA如何影响细胞通讯？
2013年，美国、德国3位科学家凭借他们所发现的细胞囊泡运输的调节机制，荣获2013年诺贝尔生理学或医学奖。外泌体（exosomes）作为人体内一类重要囊泡，也开始受到越来越多的关注。科学家们已发现，外泌体会参与到免疫应答、凋亡、血管生成、炎症反应、凝结等重要的生物过程中，细胞会通过分泌外泌体，
外泌体及其蛋白质组学研究
外泌体是什么？ 外泌体（Exosome），是一种能被大多数细胞分泌的微小膜泡，具有脂质双层膜结构，直径大约40-200 nm。外泌体存在于体液中，包括血液、唾液、尿液和母乳等，不同组织来源的外泌体在内容物组成和功能方面存在差异，这种差异受到细胞外基质和微环境的动态调控。越来越多的证据表明，宿主
细胞外泌体/微囊泡解析专题（一）
外泌体是细胞分泌的纳米囊泡（EV），其直径大小为30-150nm之间，具有闭合的脂质双分子层结构。 它几乎存在于所有体液中，并在其表面以及胞内中携带各种分子（蛋白质，脂质和RNA等物质外泌体携带大量特异性的蛋白质（如细胞因子、生长因子）以及功能性的mRNAs、miRNAs等生物活性物质，在体
神经细胞与外泌体研究进展
胶质细胞与外泌体 胶质细胞占CNS细胞的90%，主要包括小胶质细胞、星形胶质细胞以及少突胶质细胞。小胶质细胞是存在于CNS的巨噬细胞，占CNS细胞总数的10%。在生理状态下，小胶质细胞主要起到免疫监视作用。脑缺血后，小胶质细胞分泌肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α
美国研究发现外泌体促进中风后恢复
在本月发表于《Translational Stroke Research》杂志上的文章中，由美国国立卫生研究院资助的动物科学家展示了一种新的中风治疗方法的脑成像数据，该方法可导致猪在中风后完全康复。 UGA再生生物科学中心的Stice和他的同事报告了中线移位（即将大脑推向一侧）期间的第一个观察
为什么运动可以促进外泌体的释放
长期运动后产生的外泌体，确实能够保护受损的心肌细胞。那么到底是外泌体中的哪种成分在起作用呢？研究人员对外泌体进行了NGS测序，发现游泳训练组和不运动组的小鼠外泌体miRNA有很大差别，游泳训练显著上调了一簇多个miRNA。他们将其分别在心肌细胞缺氧复氧模型中进行功能测试和筛选。发现多个miRNA，尤
细胞外泌体/微囊泡解析专题（三）
B、D图： 显示两组样本外泌体CD47表达异常，乳腺癌组CD47明显表达减少，统计学差异P值=0.004说明巨噬细胞启动吞噬效力。E图：在B、D图个选取N=60人份血液标本。 未配对t检验，P值
细胞外泌体/微囊泡解析专题（二）
培养细胞图A：Apogee A50- MicroZL光散射器， 小角度光散射（SALS），中角光散射（MALS）和大角度光散射（LALS）全方位检测细胞内部颗粒，图D，E F：Apogee Mix ZL微珠微珠作为内参，设置阈值。图G：设置样本空白、同型对照可以观察到MDA-MW-231 MCF-
研究揭示缺氧外泌体对肝癌的影响
原发性肝癌（primary liver cancer，PLC）是一种常见的高度恶性肿瘤，其全球发病率逐年增长，在肿瘤相关死亡原因中位居第2位。而肝细胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）在原发性肝癌中占比接近90%，全世界每年有超过70万人死于肝细胞癌，仅我国就占了死亡
NTA用于外泌体定量的准确性
NTA可以用来外泌体定量吗？NTA可以提供样本中颗粒的粒径分布和绝对浓度，但不能够以NTA所提供的浓度数值这个单一的指标来定量外泌体。首先，我们必须理解NTA检测原理：该技术基于布朗运动，通过视频分析颗粒计数，可同时获取样本中颗粒的粒径和绝对浓度。因此，样本中的所有颗粒，都会被侦测并计入，而不能筛选
病毒包装技术——慢病毒生产及使用操作手册
一、实验流程制备慢病毒表达质粒及其辅助载体，四个质粒共转染293T细胞，转染后6h更换为完全培养基，培养48和72h后，分别收集富含慢病毒颗粒的细胞上清液，病毒上清液通过超离心浓缩病毒。二、实验材料慢病毒载体包装系统为四质粒系统， 组成为Gag/pol、vsvg、rev及pLenti-X-EGFP表
梅毒螺旋体诱导巨噬细胞分泌的外泌体特征
为了探讨梅毒螺旋体（Tp）体外诱导巨噬细胞分泌的外泌体特征及其对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）增殖水平的影响，中国医学科学院 许卜方、王千秋等人自雄兔睾丸分离Tp。将人单核巨噬细胞（THP-1）诱导为巨噬细胞后，分为实验组（Tp刺激）和对照组（不用Tp刺激），12 h后继续培养48 h，收集巨噬
病毒包装技术2——慢病毒生产及使用操作手册
锐赛小课堂0625-107 一、实验流程 制备慢病毒表达质粒及其辅助载体，四个质粒共转染293T细胞，转染后6h更换为完全培养基，培养48和72h后，分别收集富含慢病毒颗粒的细胞上清液，病毒上清液通过超离心浓缩病毒。 二、实验材料 慢病毒载体包装系统为四质粒系统， 组成为
MSC来源的外泌体对骨折愈合的作用
据估计，美国每年大约有1500万新发生的骨折患者，主要是由车祸、运动伤害或工作事故引起。相当一部分的患者（10-15%）会发生延迟愈合或不愈合，这需要延长治疗或重复治疗，对治疗成本和生活质量都有很大影响。骨折的修复是一个复杂的过程，需要利用内源性的细胞再生潜力来恢复原始的骨骼结构。 间充质干细胞（M
外泌体与胰腺癌之间的神秘关系
圣母大学（University of Notre Dame）研究人员表示，他们已发现了一种治疗胰腺癌的新方法。 据《合众国际社》报道，领导此次研究的是圣母大学的伊尔（Reginald Hill）教授，他的团队希望能揭示FDA批准的癌症药物中一些并不对胰腺癌产生效果的原因。研究小组发现，通过阻断
外泌体lncRNA介导的淋巴转移机制的揭秘
外泌体是指包含多种RNA（环状RNA、miRNA、LncRNA和mRNA等）和蛋白质的盘状囊泡（30-200nm）。几乎所有类型的细胞均可分泌外泌体，且外泌体天然存在于各种体液中，包括血液、唾液、尿液、脑脊液和乳汁等。外泌体被视为特异性分泌的膜泡，能够参与细胞间通讯。目前，有关外泌体分泌、摄取、
嵌合外泌体提高肿瘤免疫治疗效果。
外泌体是细胞分泌产生的一种囊泡型天然生物颗粒，在体内具有独特的转运路径和生物学功能，以此创建的新剂型有望在体内复杂环境下实现精准递送和预期疗效，在肿瘤个体化治疗领域具有广阔的应用前景。 北京时间2021年10月14日，中国科学院过程工程研究所（以下简称过程工程所）生化工程国家重点实验室科研
血清外泌体中的miRNA作为KD诊断biomarker
皮肤粘膜淋巴结综合症（muco-cuta-meous lymph node syndrome，MCLS）又称川崎病（Kawasaki disease），是一种以全身血管炎变为主要病理的急性发热性出疹性小儿疾病。虽然已有的研究已经发现一些血来源的蛋白分子或者miRNA有潜在的诊断能力，但是，其有效
外泌体决定肿瘤转移的器官特异性
一项研究表明，肿瘤细胞通过释放外泌体，使受纳器官做好准备，形成转移灶。 癌细胞通过血液由起源部位传播扩散到远处器官是癌症相关死亡的主要原因。这个过程并不随机；相反，一些种类的癌症细胞会通过一系列分子程序，优先寻找特定器官，并在该处筑巢。这种寻找目的地的行为涉及到逃避原发肿瘤的癌细胞（有时也被称