细胞培养基的配制的小窍门(五)

五、 注意事项1、 培养细胞使用的瓶子和饭盒应与提取RNA和培养细菌的瓶子和饭盒严格分开。因为用于处理提取RNA的DEPC水(0.1%焦炭酸二乙酯)是一种致癌物,可能影响细胞生长;而培养过细菌的用品也不应与细胞混用。2、 过滤时压力不可过大,否则细菌易滤过达不到除菌效果,或使滤膜破裂。分装时需根据使用量的多少选择合适大小的瓶子,并且每瓶只能装2/3体积的液体,过多时瓶子易爆或胶塞自喷。3、 滤器用毕立即刷洗,过蒸馏水,晾干收藏。......阅读全文

特殊培养基

  选择性培养基  选择性培养基是指根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基。其功能是使混合菌样中的劣势菌变成优势菌,从而提高该菌的筛选效率。  酵母菌富集培养基  葡萄糖5%,尿素0.1%,硫化铵0.1%,磷酸二氢钾0.25%,磷酸氢二钠0.05%,七水合硫酸镁0.1

YPD培养基

将下列组分溶解在0.9L水中:蛋白胨20g酵母提取物10g葡萄糖20g用水补足体积为1L后,高压灭菌。建议在高压灭菌之前,对色氨酸营养缺陷型每升培养基添加1.6g色氨酸,因为YPD培养基是色氨酸限制型培养基。为了配制平板,需要在高压灭菌前加入20g琼脂粉。

ONPG培养基

成分  邻硝基酚β-D-半乳糖昔(ONPG)        60mg  (O-Nitrophenyl-β-D-galactopyranoside)  0.01mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5)        10mL  1%蛋白胨水(PH7.5)             30mL 制法  将ONP

液体培养基的控制培养基的条件介绍

  (1) 控制培养基的pH 配制培养基必须根据微生物的特点调节pH。各大类微生物要求的适宜生长pH范围不同。如霉菌与酵母菌一般为5.0-6.0, 细菌为6.5-7.5.放线菌为7.5-8.5.培养基的pH与其C/N有极大关系。C/N高的培养基,例如培养各种真菌的培养基,经培养后其pH明显下降;相反

酿酒酵母培养基的制备实验——SC培养基

试剂、试剂盒酵母氮碱基葡萄糖SC-Ura 或 SC-Trp 或 SC-Len 或 SC-His 的混合物蒸馏水琼脂仪器、耗材锥形瓶实验步骤1. 在 1 L 的带螺旋盖的瓶中或锥形瓶中将下面的成分溶于 500 ml 水中,置于振荡器上混匀。酵母氮碱基 4.0 g,葡萄糖 12.0 g,SC-Ura 或

选择培养基和鉴别培养基的区别

鉴别培养基:利用细菌分解糖类和蛋白质的能力及其代谢产物的不同,在培养基中加入特定的作用底物和指示剂,观察细菌生长过程中分解底物所释放的不同产物,通过指示剂的反应不同来鉴别细菌。例如糖发酵管、克氏双糖铁琼脂(KIA)、伊红-亚甲蓝琼脂和动力-吲哚-尿素(MIU)培养基等。选择培养基:在培养基中加入抑制

衣原体培养基-鸡胚培养基的配制

[用途]培养增殖和分离鹦鹉热、性病淋巴肉芽肿和沙眼等衣原体。 [配法] 7日龄鸡胚3~5只。 精选产后10天内并10℃左右保存的受精鸡卵孵育,置38~39℃、相对湿度40%~60%的孵卵箱中孵育,4天后用检卵灯检视发育情况,挑出未受精及死亡者。生活鸡胚检视时可见清晰血管小团或花纹,其中有

关于固体培养基形式—平板培养基的简介

  培养平板培养基(culture plate)是被用于获得微生物纯培养的最常用的固体培养基形式,它是冷却凝固后的固体培养基在无菌培养皿中形成的培养基固体平面,常被简称为培养平板(plate)。也叫平面培养基、平皿培养基。  平板培养基常用于单孢分离,测定菌丝生长速度,观察菌落的形态,拮抗实验,测定

关于固体培养基的形式—快速制作斜面培养基和平板培养基的介绍

  有一种简捷快速制备斜面培养基的方法,现介绍如下:  制作培养基斜面,传统的方法是将试管每10支为一组扎成一捆,高压灭菌后,一支一支地摆成斜面,操作比较烦琐,占用面积又多,造成诸多不便。  1、将胶合板截成长18厘米(与试管长度相等或略短)、宽9厘米(比并排5支试管直径的总和略窄)的小块备用。  

合成培养基配制实验——无血清培养基的制备

实验材料ECM试剂、试剂盒蒸馏水仪器、耗材滤膜实验步骤1.  选择适宜的培养基质(ECM),先制备成贮存干液;2.  使用前,贮存干液用高纯度的蒸馏水稀释成0.1 mg/ml 浓度的使用液;3.  使用液用0.22 μm 孔径的微孔滤膜过滤除菌;4.  用吸管吸取使用液,均匀涂于消毒灭菌的细胞培养器

天然培养基与合成培养基的区别在哪?

天然培养基是指来自动物体液或利用组织分离提取的一类培养基,如血浆、血清、淋巴液、鸡胚浸出液等。组织培养技术建立早期,体外培养细胞都是利用天然培养基。但是由于天然培养基制作过程复杂、批间差异大,因此逐渐为合成培养基所替代。目前广泛使用的天然培养基是血清,另外各种组织提取液、促进细胞贴壁的胶原类物质在培

使用适应性培养基或条件培养基制备

(1)培养同源细胞(未克隆前时的同一细胞)至半汇合状态时,更换一次培养液,再继续培养24~48小时后,吸出所有培养液。(2)离心:3000~4000/分离心10分钟,吸取上清液。(3)滤过:再经直径0.22μm滤孔的滤膜过滤,低温冻存贮备用;用时取1分适应培养基+2分培养基混合使用。

简介烟草培养基愈伤组织诱导培养基制备

  以MS培养基母液为基础,向洁净铝锅中顺序加入大量元素20×母液100mL,微量元素100×母液20mL,铁盐100×母液20mL ,维生素100×母液20mL,肌醇200×母液10mL,甘氨酸200×母液10mL,配制得MS培养基后,再加入0.5mg·L-1的BA8mL,0.5mg·L-1的NA

甘氨酸培养基

成分  布氏(Brucella)肉汤              1000mL  琼脂                     1.6g  甘氨酸(glycine)(又称氨基乙酸aminoacetic acid) 10.0g制法  将以上成分混合,加热溶解,校正pH7.0±0.2,分装13mm×100

培养基的种类

根据培养基的物理性质,可分为液体培养基、固体培养基和半固体培养基。液体培养基:用各种营养成分加水配成,或用天然物质的浸汁(麦芽汁、豆芽汁等)制成。中海培养基组分均一,适宜各类微生物的营养生长。广泛应用于实验研究及大规模工业生产中,有利于广泛获得大量菌体或代谢产物。液体培养基是用于不需要挑选单克隆的大

培养基灭菌方法

培养基的灭菌方法1、高压蒸汽灭菌:高压蒸汽灭菌适合于耐高温培养基、接种器械和蒸馏水的灭菌。培养基在爱制备过程中混入各种杂菌,分装后应立即灭菌,至少应在24h内完成灭菌工作。灭菌时一般是在0.105MPa压力下,温度121℃时,灭菌15~30min即可。消毒时间不宜过长,也不能超过规定的压力范围,否则

固体培养基配制

试剂、试剂盒 琼脂胰化蛋白胨NaClNaOH四环素仪器、耗材 玻璃瓶烧瓶实验步骤 一、极限培养基平板800 ml水加入15 g琼脂,高压灭菌15 min。然后加人200 ml无菌的5 X 极限培养液和碳源。待冷却至50°C,加人补充成分。每个10 cm平板倒入32~40 ml 培养基(每升培

培养基的配制

1.配料:配方换算→在容器中加入少量水(蒸馏水,自然水)→按照配方称取各种药品(依次加入)→加足所需水量。2.溶解:淀粉溶解:少量冷水调成糊状。加热溶解,边加热边搅拌以防止烧焦。3.调PH:用1N的盐酸或1N的NaOH把培养基调节到所要求的值。4.过滤:滤纸或棉花进行过滤。5.分装:一般培养基放在三

外周血培养基配制

一、配制用水培养基的大部分是水,所以水的质量直接影响培养基的质量。按Waymouth标准,水的电阻应为200万欧姆,一般实验室里以玻璃蒸馏器制备的双蒸水或三蒸水可以符合使用条件。二、培养基培养基有天然、人工两种。一般实验室使用的是RPMI-1640粉末培养基,以双蒸或三蒸水配制。NaHCO3(或HC

培养基灭菌方法

培养基的灭菌方法1、高压蒸汽灭菌:高压蒸汽灭菌适合于耐高温培养基、接种器械和蒸馏水的灭菌。培养基在爱制备过程中混入各种杂菌,分装后应立即灭菌,至少应在24h内完成灭菌工作。灭菌时一般是在0.105MPa压力下,温度121℃时,灭菌15~30min即可。消毒时间不宜过长,也不能超过规定的压力范围,否则

培养基制备技术

一、玻璃器皿的清洗  在制备培养基的过程中,首先要使用一些玻璃器皿,如试管、三角瓶、培养皿、烧杯和吸管等。这些器皿在使用前都要根据不同的情况,经过一定的处理,洗刷干净。有的还要进行包装,经过灭菌等准备就绪后,才能使用。1、新购的玻璃器皿  除去包装沾染的污垢后,先用热肥皂水刷洗,流水冲净,再浸泡于1

庖肉培养基

成分  牛肉浸液       1000mL  蛋白胨        30g  酵母膏        5g  磷酸二氢钠      5g  葡萄糖        3g  可溶性淀粉      2g  碎肉渣适量  pH7.8制法  1 称取新鲜除脂肪和筋膜的碎牛肉500g,加蒸馏水1000mL和1mo

培养基的灭菌

  一般培养基可采用121°C高压蒸汽灭菌15分钟的方法。在各种培养基制备方法中,如无特殊规定,即可用此法灭菌。  某些畏热成分,如糖类,应另行配成20%或更高的浓液,以过滤或间歇灭菌法消毒,以后再用无菌操作技术、定量加于培养基。明胶培养基亦应用较低温度灭菌。血液、体液和抗生素等则应以无菌操作技术抽

鉴别培养基

  EMB培养基  常用于鉴别E.coli  蛋白胨10g,乳糖5g,蔗糖5g,磷酸氢二钾2g,伊红Y0.4g,美蓝0.065g,蒸馏水1000g,pH7.2  2216E培养基配方  分离海洋微生物的培养基配方  蛋白胨5g,酵母膏1g,磷酸高铁0.01g,琼脂15-20g,陈海水1000ml,煮

简述培养基配制

  一、配制用水  培养基的大部分是水,所以水的质量直接影响培养基的质量。按Waymouth标准,水的电阻应为200万欧姆,一般实验室里以玻璃蒸馏器制备的  双蒸水或三蒸水可以符合使用条件。  二、培养基  培养基有天然、人工两种。一般实验室使用的是RPMI-1640粉末培养基,以双蒸或三蒸水配制。

肉汤培养基制备

贵阳中医学院基础医学实验教学中心网站肉汤培养基制备实验仪器、耗材 鲜牛肉末蛋白胨氯化钠蒸馏水实验步骤 去脂、去筋鲜牛肉末50g,加水100ml,搅匀,放冰箱过夜,取出煮沸30分钟,用纱布过滤,补足水量为100ml,即为牛肉浸液。加入蛋白胨1g,氯化钠0.5g,加热溶解。调整PH值为7.6,煮沸10分

培养基的制备

目的要求  1.掌握一般培养基制备的原则和要求。  2.熟悉一般培养基制备的过程。  操作步骤  一、培养基的制备原则和要求  培养基是根据各类微生物生长繁殖的需要,用人工方法把多种物质混合而成的营养物。一般用来分离、培养菌类。常用的培养基有基础培养基、增菌培养基、选择

什么是培养基

采用化学成分未知或不全知的天然有机营养物质配制而成的培养基。常用的天然有机营养物质有马铃薯、小麦、大豆粉、高粱粉、薯类、胡萝卜、米糠、麸皮、各种秸秆、木屑、甘蔗渣、棉籽壳、豆腐渣、酒糟、禽畜粪等。天然培养基营养齐全,取材容易,价格低廉,配制方便,是培养菌种和栽培生产理想的培养基。但是由于同一天然物质

培养基的配制

  一、配制用水  培养基的大部分是水,所以水的质量直接影响培养基的质量。按Waymouth标准,水的电阻应为200万欧姆,一般实验室里以玻璃蒸馏器制备的  双蒸水或三蒸水可以符合使用条件。  二、培养基  培养基有天然、人工两种。一般实验室使用的是RPMI-1640粉末培养基,以双蒸或三蒸水配制。

无血清培养基

细胞培养(cell culture)就是从机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后在适宜的培养基 中,让这些细胞生长和增殖。体外细胞培养最常见的是合成培养基如DMEM,F12,MEM等混合一定比例的牛血清进行培养;但是大量使用牛血清制品有许多缺陷,如,动物源成分,无法用于临床研究;成分复杂