YPD培养基
将下列组分溶解在0.9L水中：蛋白胨20g酵母提取物10g葡萄糖20g用水补足体积为1L后，高压灭菌。建议在高压灭菌之前，对色氨酸营养缺陷型每升培养基添加1.6g色氨酸，因为YPD培养基是色氨酸限制型培养基。为了配制平板，需要在高压灭菌前加入20g琼脂粉。......阅读全文
YPD培养基
将下列组分溶解在0.9L水中：蛋白胨20g酵母提取物10g葡萄糖20g用水补足体积为1L后，高压灭菌。建议在高压灭菌之前，对色氨酸营养缺陷型每升培养基添加1.6g色氨酸，因为YPD培养基是色氨酸限制型培养基。为了配制平板，需要在高压灭菌前加入20g琼脂粉。
毕赤酵母必须要用YPD培养基活化
因为毕赤酵母刚从超低温冰箱或者冷藏柜取出后，活性很低，如果保存时间过长甚至可能已经死亡，此时如果不经过活化就直接用会造成适应期长，生长缓慢甚至没有生长现象，进而影响实验的进程和准确性。YPD 或YEPD作为酵母菌常用的培养基，可以使处在低温的毕赤酵母生长繁殖，并且恢复保持到较高的活性。在日常实验过程
毕赤酵母必须要用YPD培养基活化？为什么
因为毕赤酵母刚从超低温冰箱或者冷藏柜取出后，活性很低，如果保存时间过长甚至可能已经死亡，此时如果不经过活化就直接用会造成适应期长，生长缓慢甚至没有生长现象，进而影响实验的进程和准确性。YPD或YEPD作为酵母菌常用的培养基，可以使处在低温的毕赤酵母生长繁殖，并且恢复保持到较高的活性。在日常实验过程中
酵母培养基YPD与YPDS区别及各成分作用
YPD1% Yeast Extract（酵母膏），2% Peptone（蛋白胨），2% Dextrose (glucose)（葡萄糖），若制固体培养基，加入2%琼脂粉YPDS1%Yeast extract（酵母膏），2%peptone（蛋白胨），2%dextrose(glucose) （葡萄糖），
YPD和MD培养基在培养酵母菌用途上的区别
ypd为全营养培养基，用于繁殖用。md为营养缺陷型培养基，用于筛选菌株用
酵母人工染色体的应用
实验方法原理 直到 20 世纪 80 年代中期，尚无技术可用于基因组 DNA 黏性大片段的分离、扩增和分析。在此之前，如果要对某一 DNA 片段进行详细的物理和功能研究，该 DNA 的长度应能够装入 λ 噬菌体颗粒或黏粒载体。
酵母人工染色体的应用
实验方法原理 直到 20 世纪 80 年代中期，尚无技术可用于基因组 DNA 黏性大片段的分离、扩增和分析。在此之前，如果要对某一 DNA 片段进行详细的物理和功能研究，该 DNA 的长度应能够装入 λ 噬菌体颗粒或黏粒载体。实验材料 酿酒酵母试剂、试剂盒 甘油仪器、耗材 脉冲场凝胶电泳仪选择性培养
LiCl法转化毕赤酵母菌
实验概要本实验介绍了用LiCl法将重组质粒导入毕赤酵母菌X-33的转化方法。主要试剂甘油，YPD培养基，50% PEG，1 mol/L LiCl，Sac I主要设备摇床，高速离心机，1.5 ml微量离心管，水浴锅实验材料重组质粒pPIC6αA-APC，毕赤酵母菌X-33实验步骤1. 取毕赤酵母甘油种
酵母人工染色体的应用
直到 20 世纪 80 年代中期，尚无技术可用于基因组 DNA 黏性大片段的分离、扩增和分析。在此之前，如果要对某一 DNA 片段进行详细的物理和功能研究，该 DNA 的长度应能够装入 λ 噬菌体颗粒或黏粒载体。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理直到 20 世纪 80 年代
酵母菌培养液是怎么配制的
YPD 或YEPD，：Yeast Extract Peptone Dextrose Medium(1L)，又叫酵母浸出粉胨葡萄糖培养基，加入琼脂的又叫酵母膏胨葡萄糖（YPD）琼脂培养基，用于酵母菌的培养配方：1% Yeast Extract（酵母膏） ，2% Peptone（蛋白胨） ，2% Dex
酵母表达载体的构建与酵母转化
实验概要本实验介绍了酵母表达载体的构建、酵母转化方法及酵母抗逆实验。主要试剂试剂配制：1 .1 M Tris.Cl(pH 7.5)(100 ml)：12.1g Tris碱，加80 ml ddH2O，浓HCl调pH 7.5，定容至100 ml；2. 0.5 M EDTA(pH 8.0) (100 ml
酵母菌二倍体细胞的孢子形成实验
实验材料 酵母菌试剂、试剂盒 YPD仪器、耗材 培养皿培养箱实验步骤 一、在平板上形成孢子1. 挑或选择性平板上的酵母菌单菌落接种在孢子形成平板上。 如果无需选择的活，细胞在转移到孢子形成平板之前，可以在YPD平板上先培养几天。单个菌落在YPD平板上生长3~4天，而对小块细胞来说，可在平板上生长2
减数分裂作图实验
实验材料酵母菌株试剂、试剂盒消解酶 100T仪器、耗材毛细吸管头强力胶水光学玻璃纤维YPD平板YPD培养管实验步骤第 1 天显微针的制备四分体解剖针可以通过手工拉制细玻璃丝或使用「技术和方案 23, 制备四分体解剖针」中描述的光学纤维玻璃丝来制备。将会演示针的准备过程并且提供给你一些必需品，以便你可
减数分裂作图实验
实验材料 酵母菌株试剂、试剂盒 消解酶 100T仪器、耗材 毛细吸管头强力胶水光学玻璃纤维YPD平板YPD培养管实验步骤 第 1 天显微针的制备四分体解剖针可以通过手工拉制细玻璃丝或使用「技术和方案 23, 制备四分体解剖针」中描述的光学纤维玻璃丝来制备。将会演示针的准备过程并且提供给你一些必需品，
酵母菌二倍体细胞的孢子形成实验
二倍体酵母菌细胞处于氮源和碳源均饥饿的状态时，可诱导减数分裂和孢子形成。此时，它们的染色体复制，进行二次分裂产生单倍体核。实验材料酵母菌试剂、试剂盒YPD仪器、耗材培养皿培养箱实验步骤一、在平板上形成孢子1. 挑或选择性平板上的酵母菌单菌落接种在孢子形成平板上。 如果无需选择的活，细胞在转移到孢子
酵母表达外源蛋白（foreign－protein）（4）
15、菌体密度：菌体是在BMMY中培养的，可以不用BMMY做对照，在600nm处测OD值，培养基和PBS光吸收都很低，PBS更方便。麦芽浸提液培养酵母（不换液，补料），生长阶段结束后，密度可达到10-12，诱导培养结束后，密度可达到18左右。如果用1体积的BMGY，在生长阶段结束后，换液时，加入1/
酵母细胞质粒分离实验
实验材料 酵母试剂、试剂盒 YPD仪器、耗材 接种针培养瓶摇床实验步骤 1. 挑取几个含质粒的酵母宿主菌菌落，接种于10 ml 非选择性培养基，于30℃培养过夜。 2. 在非选择性平板上于30℃培养2天以得到单菌落，大多数情况下，可以得到约200~300个单菌落（约每平板100个菌落）。 3.
将DNA导入酵母细胞实验_乙酸锂转化
实验材料待转化的酵母菌株试剂、试剂盒YPD培养基YPAD培养基：添加30 mg L腺嘌呤半硫酸的YPD培养基高纯无菌水l0×TE缓冲液pH 7.5无菌10×乙酸锂储液：1 mol L乙酸锂pH 7.5 (用稀乙酸调pH)过滤除菌DNA ：高分子质量单链载体DNA和待转化DNA50% (m V) PE
将DNA导入酵母细胞实验
实验方法原理 实验材料 待转化的酵母菌株试剂、试剂盒 YPD培养基YPAD培养基：添加30 mg L腺嘌呤半硫酸的YPD培养基高纯无菌水l0×TE缓冲液pH 7.5无菌10×乙酸锂储液：1 mol L乙酸锂pH 7.5 (用稀乙酸调pH)过滤除菌DNA ：高分子质量单链载体DNA和待转化DN
酵母细胞中质粒的加工实验
实验方法原理 在非选择性生长条件下，大多数大肠杆菌/酵母菌穿梭载体的丢失频率大约1%。 在本方案中含质粒的酵母菌株接种于非选择性平板上以分离质粒并可得到单菌落。然后通过影印到选择性平板上可以鉴别丢失了质粒的菌株实验材料 含质粒的酵母菌株试剂、试剂盒 YPD或其他非选择性液体培养基及平板CM缺失成分
将DNA导入酵母细胞实验
乙酸锂转化 电穿孔转化 单链高分子质量载体DNA的制备 实验方法原理 实验材料
基因置换实验——构建融合蛋白
实验材料菌株BY4741质粒PDB118试剂、试剂盒磷酸盐缓冲液仪器、耗材YPD 平板YPD 液体培养基血球计数板SC-his平板实验步骤YPD 平板 第 1 天将菌株 7-3 在 YPD 平板上划单克隆，30°C 下培养两天。第 3 天挑取单克隆，在 5 mlYPD 液体培养基中培养，30°C 过
酵母菌的培养实验2
实验材料酵母菌试剂、试剂盒YPD仪器、耗材培养皿涂布棒培养箱实验步骤1. 酵母菌用接环划线或涂布在平板上生长。2. 如果将野生型单倍体酵母菌稀释液涂布在YPD平板表面，并于30℃培养，那么在24小时后即可见单个菌落，但是如果要挑菌落或影印平板的话，需要培养48 h 以上。3. 用省却成分培养基
酵母实验操作方案（2)
附录一 培养基 LB： Tryptone 10g 1% Yeast Extract 5g 0.5% NaCl 5g 0.5% 【Agar】 15g 1.5%（固体培养基另加） dH2O稀释至1L，高压灭菌 YPD： Yeast Extract 10g 1%
酵母细胞质粒分离实验
在非选择性生长条件下，大多数大肠杆菌/酵母菌穿梭载体的丟失频率大约1%，采用本方案不易分离除去的一个质粒是内源性2 μm 质粒，2 μm DNA自发丢失的频率约为每代10-4。实验材料酵母试剂、试剂盒YPD仪器、耗材接种针培养瓶摇床实验步骤1. 挑取几个含质粒的酵母宿主菌菌落，接种于10 ml 非
酵母转化实验_原生质体转化
实验材料酵母试剂、试剂盒YPD山梨醇CaCl2-MEPEG选择性再生琼脂仪器、耗材水浴锅离心机分光光度计培养箱实验步骤1. 在实验前2天，将转化用酵母菌株的单菌落接种到5 ml YPD培养基中，于30℃培养过夜（如果酵母菌株是温度敏感的应在低温下培养）。2. 转化前一天晚上，从5 ml 过夜培养
YAC克隆的分析实验
基本方案 制备YAC DNA进行Southern印迹分析 实验材料 酵母菌
酿酒(芽殖)酵母和非洲粟酒裂殖酵母细胞的培养
实验概要本实验主要进行了了酿酒(芽殖)酵母和非洲粟酒裂殖酵母的培养，目的是掌握酵母细胞的培养方法及学会使用相差和微分干涉显微镜。实验原理酿酒(芽殖)酵母的培养在许多方面可以与大肠杆菌相比较。这种酵母可以用标准的微生物学技术在液体和固体培养基中进行培养。大多数酵母菌株在复合液体培养基中的倍增时间为90
酵母细胞的培养与观察操作指南
一、实验目的1.掌握酵母细胞的培养 方法2.学会使用相差和微分干涉显微镜二、异源互补技术概述酿酒(芽殖)酵母的培养在许多方面可以与大肠杆菌相比较。这种酵母可以用标准的微生物学技术在液体和固体培养基中进行培养。大多数酵母菌 株在复合液体培养基中的倍增时间为90～120min，到静止期时细胞滴度为3
菌株的构建和四分体孢子的分析实验
实验方法原理 实验材料 酵母菌细胞试剂、试剂盒 孢子形成平板或孢子形成培养基适当的营养成分YPD培养基仪器、耗材 平板实验步骤 1）挑YPD或选择性平板上的酵母菌单菌落接种在孢子形成平板上。如果无需选择的话，细胞在转移到孢子形成平板之前，可以在YPD平板上先培养几天。单个菌落在YPD平板上生长3〜4