拉曼光谱快检技术：食品质量检测的“火眼金睛”（二）
拉曼光谱分析技术在食品成分快速检测中的应用食品的主要成分为蛋白质、脂质、碳水化合物、水和微量元素等。常规分析蛋白质的方法如高效液相色谱法、X射线衍射法、质谱法和分光光度法等，都存在操作繁琐，处理样品复杂，样品被破坏的缺点。拉曼光谱分析技术能克服这些缺点，是测定固体和液体样品结构信息的有效方法之一。在对食品主要成分的结构与功能特性的变化测定上，拉曼光谱技术比传统化学方法具有更强的优势。通过拉曼谱图不仅可以定性分析被测物质所含成分的化学结构和化学键的变化，还可以定量检测食品某些成分的含量。对蛋白质的分析检测蛋白质作为大部分食品屮的主要原料成分，是衡量食品品质、营养价值的重要指标之一。蛋白质为人体提供所必需的能量和氨基酸。不同食品中的蛋内质功能取决于多样化的蛋白质结构，而有关结构与功能的研究很早就受到关注。根据结构与功能的关系，人们研究改善蛋白质特性的改性方法，以达到合理利用蛋白质功能特性优化加工条件的目的。目前拉曼光谱技术已被应用于......阅读全文
二硫键是什么？是肽键吗？怎么脱水的
二硫键（S－S） 是连接不同肽链或同一肽链的不同部分的化学键。二硫键不是肽键。脱水方式：两个二硫键—SH中的H与一个O结合形成一分子水，二硫键变为-S-S-。二硫键由含硫氨基酸形成，半胱氨酸被氧化成胱氨酸时即形成二硫键，二硫键是比较稳定的共价键，在蛋白质分子中，起着稳定肽链空间结构的作用。二硫键数目
巯基被氧化的原理
巯基是许多蛋白质和酶活性部位的必需基团，极易被氧化，形成分子内或分子间的二硫键，导致酶活性丧失。巯基又称氢硫基或硫醇基，是由一个硫原子和一个氢原子相连组成的负一价官能团，化学式为—SH。巯基端连接不同的基团，有机物所属的类别不同，如硫醇（R—SH）、硫酚（Ar—SH）。巯基与二硫键的相互转化体内含有
上样缓冲液配方中DTT的用法
DTT是一种很强的还原剂，其还原性很大程度上是由于其氧化状态六元环（含二硫键）的构象稳定性。它的氧化还原电势在pH为7时为-0.33伏。DTT的用途之一是作为巯基化DNA的还原剂和去保护剂。巯基化DNA末端硫原子在溶液中趋向于形成二聚体，特别是在存在氧气的情况下。这种二聚化大大降低了一些偶联反应实验
二硫苏糖醇的用途介绍
DTT的用途之一是作为巯基化DNA的还原剂和去保护剂。巯基化DNA末端硫原子在溶液中趋向于形成二聚体，特别是在存在氧气的情况下。这种二聚化大大降低了一些偶联反应实验（如DNA在生物感应器中的固定）的效率；而在DNA溶液中加入DTT，反应一段时间后除去，就可以降低DNA的二聚化。DTT也常常被用于蛋白
蛋白质测序
一、概念当前，所谓蛋白质测序，主要指的是蛋白质的一级结构的测定。蛋白质的一级结构(Primary structure)包括组成蛋白质的多肽链数目。很多场合多肽和蛋白质可以等同使用。多肽链的氨基酸顺序，它是蛋白质生物功能的基础。 蛋白质氨基酸顺序的测定是蛋白质化学研究的基础。自从1953年F.San
蛋白质测序
一、概念当前，所谓蛋白质测序，主要指的是蛋白质的一级结构的测定。蛋白质的一级结构(Primary structure)包括组成蛋白质的多肽链数目。很多场合多肽和蛋白质可以等同使用。多肽链的氨基酸顺序，它是蛋白质生物功能的基础。 蛋白质氨基酸顺序的测定是蛋白质化学研究的基础。自从1953年F.San
蛋白质测序
一、概念当前，所谓蛋白质测序，主要指的是蛋白质的一级结构的测定。蛋白质的一级结构(Primary structure)包括组成蛋白质的多肽链数目。很多场合多肽和蛋白质可以等同使用。多肽链的氨基酸顺序，它是蛋白质生物功能的基础。 蛋白质氨基酸顺序的测定是蛋白质化学研究的基础。自从1953年F.San
辅酶A二硫键还原酶的基本信息
中文名称辅酶A-二硫键还原酶英文名称CoA-disulfide reductase定 义编号：EC 1.8.1.14。以NADH为氢的供体，催化一分子氧化型辅酶A还原成二分子还原型辅酶A及其逆反应的酶。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），酶（二级学科）
关于含有一个二硫键的多肽的介绍
这是一类数量很少的抗菌肽，第1个被发现的这类多肽是bactenecin，来源于牛中性粒细胞。其12个氨基酸中含有4个精氨酸，在其第2位和第11位氨基酸残基间形成二硫键。bactenecin对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌都有活性。这类多肽中还包括一些来源于蛙类皮肤的多肽抗生素，一般在C端有一个由7个氨
硫氧还蛋白二硫键还原酶的基本信息
中文名称硫氧还蛋白-二硫键还原酶英文名称thioredoxin-disulfide reductase定 义编号：EC 1.8.1.9。催化使硫氧还蛋白-S2还原成硫氧还蛋白-(SH)2，同时使NADPH氧化成NADP＋的一种含黄素腺嘌呤二核苷酸的黄素蛋白。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科）
DTT能不能将蛋白二硫键全部还原
还原剂可以使蛋白质的二硫键打开，比如2-巯基乙醇（beta-ME）、二硫苏糖醇（DTT）二硫键是2个-SH基被氧化而形成的-S-S-形式的硫原子间的键。打开二硫键就是破坏这种氧化作用，加入适量的还原剂就可以达到目的。但随着还原剂被空气中的氧气氧化，二硫键也会重新形成。
辅酶A二硫键还原酶的基本信息
中文名称辅酶A-二硫键还原酶英文名称CoA-disulfide reductase定 义编号：EC 1.8.1.14。以NADH为氢的供体，催化一分子氧化型辅酶A还原成二分子还原型辅酶A及其逆反应的酶。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），酶（二级学科）
二硫键是共价键还是非共价键
是两个硫原子之间形成的共价键，一般指多肽链中的两个半胱氨酸残基侧链的硫原子之间形成的共价键。二硫键（disulfide bond）是连接不同肽链或同一肽链中，两个不同半胱氨酸残基的巯基的化学键。二硫键是比较稳定的共价键，在蛋白质分子中，起着稳定肽链空间结构的作用。二硫键数目越多，蛋白质分子对抗外界因
二硫键红外光谱吸收峰在哪个位置
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测定食品中蛋白质含量对健康的重要性
蛋白质是一类最重要的生物大分子，存在于一切生物体内，是细胞的主要成分，是生命的基础物质，是一种纯天然的营养物质，也是一种天然的表面活性剂。蛋白质的结构受二硫键的影响很大，而蛋白质的结构影响蛋白质的表面活性性能，为了研究蛋白质的结构和性能的关系，特别是蛋白质表面活性性能与结构的关系，所以测定蛋白质
方案2－蛋白质还原和S羧甲基化：大规模方法
实验方法原理蛋白质链间或链内完整的二硫键，会给酶解或化学裂解带来麻烦。如：1.二硫键连接的肽段洗脱物，在基于RP-HPLC的肽段作图中会产生单个的峰，从而使这些肽段图很难解释；2.最理想的方法是在序列测定之前，分离由S—S键连接的肽段，否则会使序列数据的解释变得复杂；3.没有断裂二硫键的蛋白质不便于
对角线电泳的应用介绍
其主要作用是膜蛋白的分离鉴定，确定二硫键和蛋白质复合物的研究对角线电泳最经典的用途当属二硫键的确定：样品蛋白质经硫氧还蛋白处理后，利用荧光巯基探针标记巯基，目标蛋白会带上荧光探针。再进行对角线电泳时，如果发现目标蛋白存在分子内二硫键，则经处理后所得的点位于对角线的上方；如果目标蛋白存在分子间二硫键，
对角线电泳的应用介绍
其主要作用是膜蛋白的分离鉴定，确定二硫键和蛋白质复合物的研究对角线电泳最经典的用途当属二硫键的确定：样品蛋白质经硫氧还蛋白处理后，利用荧光巯基探针标记巯基，目标蛋白会带上荧光探针。再进行对角线电泳时，如果发现目标蛋白存在分子内二硫键，则经处理后所得的点位于对角线的上方；如果目标蛋白存在分子间二硫键，
上海药物所揭示氧化感应因子AbfR的作用机制
蛋白质翻译后修饰是生物体实现功能多样性调控的重要途径。活性氧（ROS, reactive oxygen species）参与的信号转导通路主要通过蛋白质活性半胱氨酸的氧化还原化学来实现抗性基因表达的转录调控。中国科学院上海药物研究所杨财广课题组日前揭示了表皮葡萄球菌转录因子AbfR感应ROS氧化
BiopharmaLynx软件在蛋白质肽图分析中的应用（二）
四、修饰的肽段在不同样品间含量对比BiopharmaLynx软件可以比较不同样品间某种肽段（包括突变肽段和特定修饰肽段）的含量差异，发现样品间的细微差别，并用直观的方式显示出来。五、BiopharmaLynx的样品间肽图对比BiopharmaLynx软件这可以自动地将各个批次样品的肽图与参照样品的肽
DTT作用
DTT作用如下：1、DTT的作用之一是作为巯基化DNA的还原剂和去保护剂。巯基化DNA末端硫原子在溶液中趋向于形成二聚体，特别是在存在氧气的情况下。这种二聚化大大降低了一些偶联反应实验（如DNA在生物感应器中的固定）的效率；而在DNA溶液中加入DTT，反应一段时间后除去，就可以降低DNA的二聚化。2
董梦秋、贺思敏Nature－Methods发表重要成果
蛋白交联是一种特殊的翻译后修饰，在所有生命中起到了基础性的作用，包括建立细胞外基质、调控蛋白在细胞内外的功能或半衰期等。内源蛋白质交联有很多种形式，从相当普遍的二硫键或异肽键，到胶原和弹力蛋白中的特殊连接。 二硫键是许多分泌蛋白必不可少的部分，比如激素、生长因子和细胞表面受体。但分析二硫键一直
植物蛋白质氧化折叠研究中进展
二硫键的形成对于真核生物的分泌蛋白和质膜蛋白在内质网中的折叠十分重要。在动物和酵母中，内质网氧化还原蛋白oxidoreductin-1 (Ero1) 是二硫键的主要供体，将二硫键通过蛋白质二硫键异构酶（PDI）传递给底物蛋白。前期，中国科学院遗传与发育生物学研究所农业资源研究中心研究员吕东平研究
小麦粉面团质量形成分子机制被揭示
近日，中国农业科学院农产品加工研究所联合国内外科研团队，系统揭示了小麦基因型、灌溉条件、储存方式及制粉工艺影响面团流变特性及产品质量的微观和介观机制。该研究首次明确蛋白质分子间二硫键与氢键的比率是关键调控指标，为优质专用小麦品种选育和面制品精准加工提供了新的理论依据。相关研究成果已发表在国际食品领域
包涵体（inclusion－body）表达的蛋白的复性2（一）
还原剂：由于蛋白间二硫键的存在，在增溶时一般使用还原剂。还原剂的使用浓度一般是50-100mM2-BME或DTT，也有文献使用5mM浓度。在较粗放的条件下，可以使用5ml/l的浓度。还原剂的使用浓度与蛋白二硫键的数目无关，而有些没有二硫键的蛋白加不加还原剂无影响，如牛生长激素包涵体的增溶。对于目标蛋
细菌过表达产物（无二硫键者）新纯化实验
实验步骤 操作程序第 1 天今天的目的是试验 T7 RNA 聚合酶表达的诱导条件，确定其在上清/沉淀中的分布情况，并为第二天的分离纯化步骤作出初步评估。1) 取一份 50-ml 经低密度培养过夜的大肠杆菌细胞培养物，开始工作。2) 于 A600n
细菌过表达产物（无二硫键者）新纯化实验
实验步骤 操作程序第 1 天今天的目的是试验 T7 RNA 聚合酶表达的诱导条件，确定其在上清/沉淀中的分布情况，并为第二天的分离纯化步骤作出初步评估。1) 取一份 50-ml 经低密度培养过夜的大肠杆菌细胞培养物，开始工作。2) 于 A600nm 为 0.3~0.7 时，用 0.8 mmol/L
方案4－用Ellman－试剂测定自由巯基和二硫键实验
实验材料蛋白质样品试剂、试剂盒变性剂二硫苏糖醇Ellman 试剂碘乙酸氮气反应缓冲液4-乙烯基吡啶仪器、耗材透析系统尺寸排阻层析装置分光光度计和小试管实验步骤方法 1: 自由巯基1.加人 3 ml 反应缓冲液到样品管和对照小试管中。2.在 412nm 测定吸收值（吸收值应该调节至0，Abuffer)
细菌过表达产物（无二硫键者）新纯化实验
实验步骤操作程序第 1 天今天的目的是试验 T7 RNA 聚合酶表达的诱导条件，确定其在上清/沉淀中的分布情况，并为第二天的分离纯化步骤作出初步评估。1) 取一份 50-ml 经低密度培养过夜的大肠杆菌细胞培养物，开始工作。2) 于 A600nm 为 0.3~0.7 时，用 0.8 mmol/L I
蛋白质测序的测定步骤
1 多肽链的拆分。由多条多肽链组成的蛋白质分子，必须先进行拆分。几条多肽链借助非共价键连接在一起，称为寡聚蛋白质，如，血红蛋白为四聚体，烯醇化酶为二聚体；可用8mol/L尿素或6mol/L盐酸胍处理，即可分开多肽链(亚基).2 测定蛋白质分子中多肽链的数目。通过测定末端氨基酸残基的摩尔数与蛋白质分子