上海药物所揭示雷公藤甲素抑制广泛基因转录的分子机制
雷公藤是一个有着悠久、广泛应用历史的中药。雷公藤甲素(Triptolide, TPL)是雷公藤的主要活性成分之一。近年来大量体内和体外的研究证明,Triptolide对多种癌症如白血病、乳腺癌、胰腺癌及肺癌等均有良好的抗肿瘤活性。最近的研究发现,TPL除了特异地影响某些蛋白和信号通路以外,还会抑制广泛的基因转录,但其作用机理有待进一步明确。 中科院上海药物研究所俞强课题组对Triptolide抑制广泛基因转录的分子机制进行了深入研究。研究发现,Triptolide通过促进RNA聚合酶II中最大及最主要的功能亚基Rpb1磷酸化,以及随后的Rpb1的泛素化降解,从而抑制基因的转录。Rpb1上游激酶PTEF-b在Triptolide诱导的Rpb1的磷酸化的过程中发挥着正调控作用。研究还发现,Triptolide可以诱导DNA损伤。这些研究提示,Triptolide通过造成细胞的DNA损伤,从而激活P-TEFb,使......阅读全文
光合磷酸化有哪些形式?
光合磷酸化(photophosphorylation)是植物叶绿体的类囊体膜或光合细菌的载色体在光下催化腺二磷(ADP)与磷酸(Pi)形成腺三磷(ATP)的反应。有两种类型:循环式光合磷酸化和非循环式光合磷酸化。前者是在光反应的循环式电子传递过程中同时发生磷酸化,产生ATP。后者是在光反应的非循环式
去磷酸化的对象和方法
一、组织和抗体来源该研究中的AD及年龄、性别匹配对照者的脑组织来源于死后6小时内的尸体解剖(各取6例混合后制备匀浆),AD确诊基于尸检组织切片的病理学检查,人脑组织均贮于-75℃直至使用。牛脑PP-2A和PP-2B的分离纯化分别参照Cohen等[5]和Sharma等[6]的方法。多克隆抗体92e和1
磷酸化作用的基本介绍
磷酸化是将磷酸基团加在中间代谢产物上或加在蛋白质(protein)上的过程。其中除去磷酸基团的酶称为磷酸酶。 蛋白质磷酸化可发生在许多种类的氨基酸(蛋白质的主要单位)上,其中以丝氨酸为多,接着是苏氨酸。 除了蛋白质以外,部分核苷酸,如三磷酸腺苷(ATP)或三磷酸鸟苷(GTP)的形成,也是经由二
磷酸化蛋白做WB小妙招
1、一定要在Lysis Buffer中加入蛋白酶抑制剂,还要加入一定量的磷酸酶抑制剂;2、加一抗后最好4度过夜,保证抗体有充分的结合时间,因为磷酸化的蛋白只占总蛋白量的极少部分;3、选择优质的磷酸化抗体,所以要选好的厂商,Novus为全球高端抗体品牌,其磷酸化抗体效果不错;4、抗体的稀释倍数要优化,
光合磷酸化的主要机制
1966年,Andre Jagendorf实验证明,即使在暗处叶绿体也可以形成ATP,只要在类囊膜两侧形成人为的pH梯度。即将叶绿体在pH4缓冲液中泡12小时,然后迅速与含ADP、Pi的pH 8缓冲液混合,叶绿体基质的pH迅速升至8,但是类囊体中的pH仍是4,这时发现随着类囊膜两侧pH梯度的消失,同
氧化磷酸化的作用
氧化磷酸化作用是指有机物包括糖、脂、氨基酸等在分解过程中的氧化步骤所释放的能量,驱动ATP合成的过程。在真核细胞中,氧化磷酸化作用在线粒体中发生,参与氧化及磷酸化的体系以复合体的形式分布在线粒体的内膜上,构成呼吸链,也称电子传递链。其功能是进行电子传递、H+传递及氧的利用,产生H2O和ATP。
什么是氧化磷酸化?
氧化磷酸化是一个生物化学过程,发生在真核细胞的线粒体内膜或原核生物的细胞质中,是物质在体内氧化时释放的能量通过呼吸链供给ADP与无机磷酸合成ATP的偶联反应。 2019年5月,Cancer Cell最新刊登了一篇文章,研究人员发现在禁食状态下使用二甲双胍可以显著抑制肿瘤生长,并提出PP2A-G
光合磷酸化作用(photophosphorylation)
光合作用中与电子传递相偶联的ADP与无机磷酸(Pi)酯化形成ATP的作用。由于形成ATP所需的能量是来自光能,故称光合磷酸化以区别于与呼吸链相偶联的磷酸化作用(氧化磷酸化)。有2种类型:(1)循环式光合磷酸化,是与循环的电子流相偶联,在此过程中仅形成ATP。(2)非循环式光合磷酸化,是与非循环
渗透细胞蛋白磷酸化实验
实验方法原理 检测出目标蛋白是磷蛋白后,可将这个蛋白质的磷酸化过程在无细胞系统或天然细胞系统中进行研究。大多数蛋白激酶除了在细胞内还可在胞外进行许多底物的磷酸化。天然细胞的渗透化处理为得到满意结果提供了一个有效的实验方法,通过使用一些不同的试剂可以使细胞处于短暂的渗透状态。这个过程使反应发生在细胞内
质粒DNA的去磷酸化实验
去除 5' 端的磷酸基可防止质粒 DNA 的自身连接和环化。在体外连接反应中,DNA 连接酶可在邻近的两个分子间形成磷酸二酯键。但只有当一个分子的 5' 端带有磷酸基另一分子的 3' 端带有羟基时,这一反应才能完成。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理
磷酸化的主要类型和方式
磷酸化(phosphorylation)是指在生物氧化中伴随着ATP生成的作用。有代谢物连接的磷酸化和呼吸链连接的磷酸化两种类型。即ATP生成方式有两种。一种是代谢物脱氢后,分子内部能量重新分布,使无机磷酸酯化先形成一个高能中间代谢物,促使ADP变成ATP。这称为底物水平磷酸化。如3-磷酸甘油醛氧化
磷酸化P/O比值的概念
P/O比值是指代谢物氧化时每消耗1摩尔氧原子所消耗的无机磷原子的摩尔数,即合成ATP的摩尔数。实验表明,NADH在呼吸链被氧化为水时的P/O值约等于2.5,即生成2.5分子ATP;FADH2氧化的P/O值约等于1.5,即生成1.5分子ATP。氧-还电势沿呼吸链的变化是每一步自由能变化的量度。根据ΔG
DNA结合蛋白的磷酸化研究
磷酸化化学计量的确定及磷蛋白形成动力学的测定l 磷酸化作用化学计量的确定1.在冰上建立下列反应混合液:Tris-HCl(50mmol/L;pH8.0)/MgCl2(10mmol/L) 250μlATP(10mmol/L)
质粒DNA的去磷酸化实验
实验方法原理 去除 5' 端的磷酸基可防止质粒 DNA 的自身连接和环化。在体外连接反应中,DNA 连接酶可在邻近的两个分子间形成磷酸二酯键。但只有当一个分子的 5' 端带有磷酸基另一分子的 3' 端带有羟基时,这一反
光合磷酸化的类型介绍
光合磷酸化有两个类型:非循环光合磷酸化和循环光合磷酸化。 1.非循环光合磷酸化OEC处水裂解后,把释放到类囊体腔内,把电子传递到PSⅡ电子在光合电子传递链中传递时,伴随着类囊体外侧的转移到腔内,由此形成了跨膜的浓度差,引起了的形成;与此同时把电子传递到PSⅠ去,进一步提高了能位,而使还原为,此外,还
多肽磷酸化修饰及检测方法
磷酸化影响着细胞生命的方方面面。在细胞中,大概有1/3的的蛋白质被认为是通过磷酸化修饰的。蛋白质的磷酸化修饰与多种生物学过程密切相关,如DNA损伤修复、转录调节、信号传导、细胞凋亡的调节等。磷酸化蛋白质及多肽的研究可以帮助人们阐述上述过程的机理,进一步认识生命活动的本质。肽谷生物依据自身原料优势和技
高速逆流色谱分离雷公藤中的雷酚内酯异构体
摘要:利用高速逆流色谱法从雷公藤植物粗提物分离得到一个化合物。两相溶剂体系为正己烷/乙酸乙酯/甲醇/水( 2∶ 3∶ 3∶ 2,V/V/V/V) ,水相作流动相,有机相作固定相。经单晶X-衍射分析确定该化合物为雷酚内酯异构体。晶体参数为: 晶体为正交晶系,空间群为P2( 1) 2( 1) 2( 1)
与青蒿素齐名的雷公藤红素或可治疗肥胖
记者从厦门大学获悉,该校药学院张晓坤教授课题组的一项最新成果在国际一流学术期刊《细胞》杂志子刊《分子细胞》发表,揭示了从传统药用植物雷公藤中分离提取的雷公藤红素调控代谢的重要作用靶点和机制,发现肥胖的潜在治疗方法。 雷公藤红素与青蒿素齐名,被《细胞》杂志列为最有可能被开发成为现代药物的5种传统
中药立功啦-传统中药雷公藤提取物或可帮助有效减肥
雷公藤的一种提取物在传统中药中已经使用了很长一段时间了,其可以有效降低小鼠食物的摄入,并且促进其体重降低45%,这种减轻体重的化合物名为雷公藤红素 (Celastrol),其可以通过增强抑制食欲的激素—瘦素的活性从而发挥其潜在的效应,相关研究刊登于国际杂志Cell上,该研究或可帮助研究者以雷公藤
与青蒿素齐名的雷公藤红素或可治疗肥胖
记者从厦门大学获悉,该校药学院张晓坤教授课题组的一项最新成果在国际一流学术期刊《细胞》杂志子刊《分子细胞》发表,揭示了从传统药用植物雷公藤中分离提取的雷公藤红素调控代谢的重要作用靶点和机制,发现肥胖的潜在治疗方法。 雷公藤红素与青蒿素齐名,被《细胞》杂志列为最有可能被开发成为现代药物的5种传统
活体叶面积仪在雷公藤叶面积测定中的优势
在植物的生长过程中,植物的光合作用是十分重要的生命活动,所以叶片的健康与否 对于植物的生长有十分重要的影响。植物的叶片更是在植物生物生化、生理生态,作物栽培滚了等方面极大的被应用着。所以,对研究对象的单位叶面积的准确或缺 具有十分重要的意义。叶面积的测算方法很多,比如采用活体叶面积仪、方格纸或称重等
我国科学家发现外泌体对雷公藤甲素的靶向递送
雷公藤始载于《本草纲目拾遗》,临床主要用于治疗红斑狼疮、类风湿关节炎、肾炎等自身免疫性疾病。研究发现,雷公藤甲素是雷公藤的主要活性成分,具有较强的抗炎和免疫抑制等作用,但是其对肝、肾等多脏器具有毒性,限制了其成药性及进一步开发应用。 树突状细胞是雷公藤甲素的主要靶点诱导免疫抑制,其产生的外泌体
偶联磷酸化的基本信息
中文名称偶联磷酸化英文名称coupled phosphorylation定 义以各种磷酸化物质作为代谢中间产物的过程中,一种磷酸化物质的磷酸转移偶联着生成另一化合物的磷酸化过程。如糖酵解中1,3-双磷酸甘油酸降解为甘油酸-3-磷酸时偶联着ATP生成。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),新陈代
环式光合磷酸化的概念
环式光合磷酸化:循环光合磷酸化可在光能驱动下通过电子的循环式传递而完成磷酸化产能反应。叶绿素受日光照射后形成激发态逐出电子经类似呼吸链的传递又回到菌绿素,使其恢复到原状态,期间产生ATP,但不产生还原力,不放出氧气。光合细菌属此类。
非循环光合磷酸化的概念
中文名称非循环光合磷酸化英文名称noncyclic photophosphorylation定 义叶绿体光系统吸收的光能用于产生ATP和NADPH的过程。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生理(二级学科)
假循环光合磷酸化的概念
中文名称假循环光合磷酸化英文名称pseudo-cyclic photophosphorylation定 义叶绿体光照时,如用黄素单核苷酸或维生素K3等还原接受电子,再被氧氧化,则看不到放氧,但仍能使ATP生成。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),新陈代谢(二级学科)
嘌呤核苷磷酸化酶的应用
在体外反应时,若加入另外一种嘌呤碱基或其类似物,可以合成新的嘌呤核苷或类似物,现已广泛用于微生物酶法生产核苷类抗病毒药物,如阿糖腺苷、利巴韦林等。
嘌呤核苷磷酸化酶的作用
该酶可逆地催化嘌呤核苷磷酸解反应,将底物嘌呤核苷分解成对应的嘌呤碱及核糖-1-磷酸。
嘌呤核苷磷酸化酶的分类
按照PNP底物专一性和分子量大小,可以将不同生物来源的PNP分为为高分子量同源六聚体类和低分子量同源三聚体类。多数细菌PNP属六聚体,亚基分子量为25kDa,底物专一性不强,能接受腺苷、鸟苷、肌苷为底物;哺乳动物和部分微生物(Bacillus cereus、Bacillus stearothmoph
磷酸化酶的基本信息
磷酸化酶(phosphorylase),可添加磷酸基团到受体上。以无机酸磷酸作为磷酸基团供体。