磷酸化蛋白做WB小妙招

1、一定要在Lysis Buffer中加入蛋白酶抑制剂,还要加入一定量的磷酸酶抑制剂;2、加一抗后最好4度过夜,保证抗体有充分的结合时间,因为磷酸化的蛋白只占总蛋白量的极少部分;3、选择优质的磷酸化抗体,所以要选好的厂商,Novus为全球高端抗体品牌,其磷酸化抗体效果不错;4、抗体的稀释倍数要优化,可以根据厂商建议进行优化;5、用含5% BSA的TBST稀释抗体,不要用常见的5% -Fat Milk的TBST;6、磷酸化蛋白WB时背景也往往较深,所以压片时间要适当,不能太长或过短,太长则背景太深盖住想要的那条条带,时间过短则可能没有条带或者条带太浅;7、磷酸化蛋白WB时,用TBST洗时也要注意一下,摇床的转速不要太快,洗的时间不要太长,孵育一抗和二抗之后分别洗5min 3次即可,宁愿背景深一些,总比做不出来强得多.另外,洗的时候,最好不要把几张膜叠在一起洗。 ......阅读全文

磷酸化蛋白做WB小妙招

1、一定要在Lysis Buffer中加入蛋白酶抑制剂,还要加入一定量的磷酸酶抑制剂;2、加一抗后最好4度过夜,保证抗体有充分的结合时间,因为磷酸化的蛋白只占总蛋白量的极少部分;3、选择优质的磷酸化抗体,所以要选好的厂商,Novus为全球高端抗体品牌,其磷酸化抗体效果不错;4、抗体的稀释倍数要优化,

磷酸化蛋白检测小妙招

蛋白质磷酸化是一种非常重要且广泛存在于原核生物和真核生物中的翻译后修饰调控方式,参与细胞的增殖、发育、分化、凋亡,细胞骨架调控、神经活动、肌肉收缩、新陈代谢及肿瘤发生等,对许多生物的细胞功能起着生物“开/关”作用。蛋白质磷酸化指由蛋白质激酶催化的把ATP的磷酸基转移到底物蛋白质氨基酸残基(丝氨酸、苏

Vilber-实用技巧磷酸化蛋白检测小妙招

蛋白质磷酸化是一种非常重要且广泛存在于原核生物和真核生物中的翻译后修饰调控方式,参与细胞的增殖、发育、分化、凋亡,细胞骨架调控、神经活动、肌肉收缩、新陈代谢及肿瘤发生等,对许多生物的细胞功能起着生物“开/关”作用。蛋白质磷酸化指由蛋白质激酶催化的把ATP的磷酸基转移到底物蛋白质氨基酸残基(丝氨酸、苏

Vilber-实用技巧磷酸化蛋白检测小妙招

  蛋白质磷酸化是一种非常重要且广泛存在于原核生物和真核生物中的翻译后修饰调控方式,参与细胞的增殖、发育、分化、凋亡,细胞骨架调控、神经活动、肌肉收缩、新陈代谢及肿瘤发生等,对许多生物的细胞功能起着生物“开/关”作用。   蛋白质磷酸化指由蛋白质激酶催化的把ATP的磷酸基转移到底物蛋白质氨基酸残基

酶标仪选购小妙招

  酶标仪是一种用途广泛的生物检验医疗设备,利用酶联免疫分析法,根据酶标记原理,根据呈色物的有、无和呈色深浅进行定性或定量分析。这是一种非常有生命力的免疫学技术。可用于单克隆抗体筛分、凝血分、抗生素灵敏度检验,以及其它需要进行比色的分析工作中。该仪器适用于临床检验、微生物学、流行病学、免疫学、内分泌

质谱仪维护小妙招

质谱仪对周围环境要求:①周围无强烈震荡源及电磁感应装置;②电源要求为接地交流电;③室温要求:15-28℃;④相对湿度要求:20%~80%;可见,使用过程中要特别注意室内温度和湿度的控制。一般没有外置飞行管的飞行时间质谱对环境的要求更严格,外部环境会直接影响质量轴的准确性。质谱仪采用两级抽气结构,前级

WB实验小问答

  WB又称免疫印记法.是将生物大分子物质通过不同途径转移到固相载体的过程。其灵敏,可达ng级,用Ecl显色法理论上可达pg 级。方便,特异性高。今天给大家分析的是western blot实验中那些常见的问题,这份干货内容,请收好啦!    western blot 常见问题有那些?    1.为什

解决血清沉淀的小妙招

  明明是一瓶优质的血清偏偏出现沉淀,和血清质量有关吗?会影响细胞培养吗?如何避免沉淀?出现沉淀如何处理? 一系列大大小小的问题袭来!其实“血清沉淀,其实属于常见现象,并不会影响血清的品质,大家不必惊慌!但很多人对这一现象还不是很了解。”为此,我们对“血清沉淀”的几个常见问题进行了总结,    血清

有效的使用高温电炉小妙招

1、要想更有效的使用安晟高温电炉,就不能超过它的额定温度去工作。2、开始使用时,不要升温过快,前期要缓慢升温,后期可以加快升温速率。3、不可把违禁物品、易燃易爆和有腐蚀性的物品用高温电炉加热。4、要做好必要的清理工作,如清理炉膛残渣、炉体表面粉尘等。5、高温电炉适合长时间持续工作,切不可用一下停一下

提高实验准确度小妙招

  我们在实验过程中对实验结果会有很多要求,例如,精密度、准确度、限值、加标回收率等等,而准确度无疑是最重要的,它决定中整个实验的成败,是一切要求的前提,那么,在实验过程中,我们要如何提高实验的准确度呢?  小编整理了提高实验准确度的几个小tips,希望能对你有所帮助。  提高分析结果准确度的方法,

有效的使用高温电炉小妙招

1、要想更有效的使用安晟高温电炉,就不能超过它的额定温度去工作。2、开始使用时,不要升温过快,前期要缓慢升温,后期可以加快升温速率。3、不可把违禁物品、易燃易爆和有腐蚀性的物品用高温电炉加热。4、要做好必要的清理工作,如清理炉膛残渣、炉体表面粉尘等。5、高温电炉适合长时间持续工作,切不可用一下停一下

移液器的使用方法小妙招

移液器的使用方法:1调节量程在 调节量程时,如果要从大体积调为小体积,则按照正常的调节方法,逆时针旋转旋钮即可;但如果要从小体积调为大体积时,则可先顺时针旋转刻度旋钮至超过量程 的刻度,再回调至设定体积,这样可以保证量取的最高精确度。在该过程中,千万不要将按钮旋出量程,否则会卡住内部机械装置

试剂盒仪器保养小妙招

ELISA试剂盒是通过酶联免疫吸附反应进行实验,来检测特定物质的试剂盒。试剂盒中会有不同浓度的标准样品,在酶标条中通过固相的抗原或抗体,酶标记的抗原或抗体,酶作用的底物反应。可形成标准曲线从而进行试验样品的测定。检测不同的物质有对应不同的试剂盒。ELISA试剂盒实验仪器保养⑴ 仪器的接地:接地的问题

清洗旋转蒸发仪的小妙招

目前,旋转蒸发仪普遍适用于各项试验,用旋转蒸发仪做完实验后,像冷凝管、收集瓶和蒸发瓶会容易留下一些污垢,这些灰尘、污垢,不仅影响仪器的性能缩短使用寿命,更严重的是会直接影响实验效果。仪器在使用或贮藏中多多少少都会沾上灰尘,所以旋转蒸发仪器维护要以防尘防污为主,定期除尘清洗是做好仪器保养与维护的重要环

清洗旋转蒸发仪的小妙招

   目前,旋转蒸发仪普遍适用于各项试验,用旋转蒸发仪做完实验后,像冷凝管、收集瓶和蒸发瓶会容易留下一些污垢,这些灰尘、污垢,不仅影响仪器的性能缩短使用寿命,更严重的是会直接影响实验效果。仪器在使用或贮藏中多多少少都会沾上灰尘,所以旋转蒸发仪器维护要以防尘防污为主,定期除尘清洗是做好仪器保养与维护的

用核蛋白做western,选什么蛋白做内参照

当实验样品中只是核蛋白,而不是细胞总蛋白提取液时,可以用组蛋白H(Histone H),或者核纤层蛋白(nuclear lamina protein)等为核内参抗体。除了这些,其它常见的核蛋白内参还有K70, K80, Lamin A和B

农药残留检测仪操作小妙招

 农药残留(Pesticideresidues),是农药使用后一个时期内没有被分解而残留于生物体、收获物、土壤、水体、大气中的微量农药原体、有毒代谢物、降解物和杂质的总称。   施用于作物上的农药,其中一部分附着于作物上,一部分散落在土壤、大气和水等环境中,环境残存的农药中的一部分又会被植物吸收。残

实验室常见小故障处理“妙招”

  实验室中常常会遇到一些意想不到的“小麻烦”,如瓶塞粘固打不开,仪器上的污垢难以除去,分液时发生乳化现象等等。如能采取适当方法或技巧加以处理,这些麻烦就会迎刃而解。  1.打开粘固的玻璃磨口  当玻璃仪器的磨口部位因粘固而打不开时,可采取以下几种方法进行处理。  (1)敲击  用木器轻轻敲击磨口部

恒温恒湿箱的省电小妙招

  现代生活中,“低碳”成为了一种生活习惯和流行,这样不仅能够让我们的生活更加美好,也能节约生产成本。下面我们就介绍一些恒温恒湿试验箱常用的节电小窍门,希望能帮助到大家。   1、摆放位置:恒温恒湿试验箱要放在阴凉通风处,避免阳光直射,远离热源,并且摆放时恒温恒湿试验箱顶部左右两侧及背部都要留有适当

跌落试验机的保养小妙招

 1、接线:将随机附带之电源线接入三相电源并接地,将控制箱与试验机亦用随机所带之连接线按插头适配情况接好,并试运行上升/下降命令。(若试运行时出现按上升键却向下运行或按下降键却运行上升之情况,只需在电源处调换相数即可。   2、跌落高度调整:打开主机电源,设定试验所需高度(方法如下),按上升键使之达

移液器的使用方法小妙招讲解

移液器又称移液枪,是一种用于定量转移液体的器具,被广泛用于生物、化学等领域。移液器的使用方法:1调节量程在 调节量程时,如果要从大体积调为小体积,则按照正常的调节方法,逆时针旋转旋钮即可;但如果要从小体积调为大体积时,则可先顺时针旋转刻度旋钮至*过量程 的刻度,再回调至设定体积,这样可以保证量取的较

盐雾试验箱喷嘴保护小妙招

   盐雾腐蚀试验需要盐雾试验箱产生盐雾,其关键是试验溶液在一定压力的压缩空气下通过喷嘴喷雾而成。喷嘴的好坏直接影响着试验的成败,在制造喷嘴时对于喷嘴的孔径、弯曲角度等就有严格控制,以保证能产生符合标准的盐雾。在实际应用中,喷嘴经常堵塞、破裂而影响试验正常进行,为此小编为您介绍些小妙招用以更好的保护

土壤研磨与筛分器的使用小妙招

TR-04土壤研磨与筛分器,研磨罐材质可选硬质钢、不锈钢、碳化钨、玛瑙、烧结刚玉、氧化锆、硬质陶瓷。用于土壤重金属分析,需配备4个玛瑙研磨罐,密封玛瑙研磨罐压力通过刻度尺进行设置,在绕转盘轴公转的同时又绕自身轴反向作自转运动,罐中样品在高速运动中相互碰撞,摩擦,达到粉碎、研磨、混和与分散样品的目的.

延长光照培养箱寿命的小妙招

 光照培养箱的十点注意事项1.光照培养箱要放置在阴凉、干燥、通风良好、远离热源和日晒的地方。放置平稳,以防震动发生噪音,外壳应可靠接地。2.设备在搬运、维修、保养时,应避免碰撞,摇晃震动,大倾斜度小于45度。3.制冷工作时,不宜使箱内温度与环境温度之差大于25度。4.为保证设备冷凝器有效地散热,冷凝

色谱输液泵的几个保养小妙招

  色谱输液泵是液相色谱仪的关键部件,其作用是将流动相以稳定的流速或压力输送到色谱系统。对于带在线脱气装置的色谱仪,流动相先经过脱气装置再输送到色谱柱。输液泵的稳定性直接关系到分析结果的重复性和准确性。   色谱输液泵的几个保养小妙招:   1、使用甲醇作流动相,请注意自身保护和环境保护,废

色谱输液泵的几个保养小妙招

  色谱输液泵是液相色谱仪的关键部件,其作用是将流动相以稳定的流速或压力输送到色谱系统。对于带在线脱气装置的色谱仪,流动相先经过脱气装置再输送到色谱柱。输液泵的稳定性直接关系到分析结果的重复性和准确性。   色谱输液泵的几个保养小妙招:   1、使用甲醇作流动相,请注意自身保护和环境保护,废

测汞仪常见故障解决小妙招

  不管是什么机器、仪器之类的产品,有时候会在无意间出现一些小故障,阻碍到我们的正常工作,而问题是不能避免的,但是可以从以下的小妙招中学到一点小技能,会更方便一点工作中的操作问题。   l、开机后无显示:没有装保险丝。   2、汞灯指示灯不亮,可重新开机。   3、灵敏度偏低:①流量不对或汞标样失效

超声波细胞粉碎机维护小妙招

  超声波细胞粉碎机是一种利用超声在液体中产生空化效应,对物质进行超声处理的多功能、多用途的仪器,能用于动植物组织、细胞、细菌、芽胞菌种的破碎,同时可用来乳化、分离、分散、匀化、提取、脱气、清洗及加速化学反应等等。随着生物产业的发展,应用超声波细胞粉碎机所做的实验要求也随之提高,如对样品温度的测定、

分光光度计的检验小妙招

  1.波长准确度的检验:  分光光度计在使用过程中,由于机械振动、温度变化、灯丝变形、灯座松动或更换灯泡等原因,经常会出现刻度盘上的读数与实际通过溶液的波长不符合的现象,  因而导致仪器灵明度降低,影响测定结果的精度,需要进行检验。  检验波长准确度最简单的方法是用干涉滤光片或镨钕滤光片测量仪器的

分光光度计的检验小妙招

  1.波长准确度的检验:  分光光度计在使用过程中,由于机械振动、温度变化、灯丝变形、灯座松动或更换灯泡等原因,经常会出现刻度盘上的读数与实际通过溶液的波长不符合的现象,因而导致仪器灵明度降低,影响测定结果的精度,需要进行检验。  检验波长准确度最简单的方法是用干涉滤光片或镨钕滤光片测量仪器的吸收