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二. 流动相 化学键合相色谱所用流动相的极性必须与固定相显著不同，根据流动相和固定相的相对极性不同分为： 1. 正相键合相色谱法：流动相极性小于固定相极性。 常用非极性溶剂如烷烃类溶剂，样品组分的保留值可用加入适当的有机溶剂（调节剂）的办法调节洗脱强度。常用有机溶剂为极性溶剂如氯仿、二氯甲烷、已腈、醇类等。 适用于分离中等极性化合物，如脂溶性维生素、甾族、芳香醇、芳香胺、脂、有机氯农药等。 2. 反相键合相色谱法：流动相极性大于固定相极性。 流动相多以水或无机盐缓冲液为主体，再加入一种能与水相混溶的有机溶剂（如甲醇、乙睛、四氢呋喃等）为调节，根据分离需要，改变洗脱剂的组成及含量，以调节极性和洗脱能力。在反相键合相色谱中，极性大的组分先流出，极性小的组分后流出。 固定相一般为C18、 C8。 反相键合相色谱法应用最广泛，因为它以水为底溶剂，在水中可以加入各种添加剂，改变流动相的离子强度、pH 值和......阅读全文
化学键合固定相色谱仪类型有多种。1、按分离目的可分：实验室化学键合固定相色谱仪和工业化学键合固定相色谱仪。2、按分离原理可分：化学键合固定相分配色谱仪和离子化学键合固定相色谱仪。3、按流动相物理状态可分：化学键合固定相气相色谱仪和化学键合固定相液相色谱仪。4、按固定相和流动相的极性大小可分：正相化学
化学键合相色谱仪是采用化学键合相作固定相的液相色谱仪，有正相化学键合相色谱仪和反相化学键合相色谱仪。两种类型化学键合相色谱仪比较如下：一、固定相极性：1、正相化学键合相色谱仪：大。2、反相化学键合相色谱仪：小。二、流动相极性：1、正相化学键合相色谱仪：小至中等。2、反相化学键合相色谱仪：中至大。三、
化学键合相色谱仪是采用化学键合相作固定相的液相色谱仪，有正相化学键合相色谱仪和反相化学键合相色谱仪。两种类型化学键合相色谱仪比较如下：一、固定相极性： 1、正相化学键合相色谱仪：大。 2、反相化学键合相色谱仪：小。二、流动相极性： 1、正相化学键合相色谱仪：小至中
一. 原理 “化学键合相色谱法”——采用化学键合相作固定相的液相色谱法。 化学键合相是利用化学反应通过共价键将有机分子键合在载体（硅胶）表面，形成均一、牢固的单分子薄层而构成的固定相。其分离机理为吸附和分配两种机理兼有。对多数键合相来说，以分配机理为主。 通常，化学键合相
化学键合相色谱仪是在液液分配色谱仪基础上发展起来的。液液分配色谱仪虽有较好的分离效果，但由于固定液是以机械的方法吸附在载体表面上，固定液流失严重，使柱效和分离选择性下降，柱使用寿命短。流失的固定液会给基线带来大的噪声而降低检测器的灵敏度，同时也会污染分离后的组分。为了解决这个问题，将各种不同的有机基
化学键合相色谱仪是在液液分配色谱仪基础上发展起来的。液液分配色谱仪虽有较好的分离效果，但由于固定液是以机械的方法吸附在载体表面上，固定液流失严重，使柱效和分离选择性下降，柱使用寿命短。流失的固定液会给基线带来大的噪声而降低检测器的灵敏度，同时也会污染分离后的组分。为了解决这个问题，将各种不同的有机基
一. 原理“化学键合相色谱法”——采用化学键合相作固定相的液相色谱法。化学键合相是利用化学反应通过共价键将有机分子键合在载体（硅胶）表面，形成均一、牢固的单分子薄层而构成的固定相。其分离机理为吸附和分配两种机理兼有。对多数键合相来说，以分配机理为主。通常，化学键合相的载体是硅胶，硅胶表面有硅醇基，
液液分配（LLE）有许多局限性，例如需要大量不互溶溶剂；样品处理步骤复杂；样品回收率和精密度不理想；处理过程中乳液的形成，和溶剂蒸发时产生的样品损失等等。固相萃取（SPE）主要用于样品分析前的净化或浓缩富集。与传统的液-液萃取相比，由于其采用了高效、高选择性的固定相，能显著减少溶剂用量，简化样品预处
高效液相色谱的主要类型及分离原理根据不同的分离机理，高效液相色谱可分为以下主要类型：1.液-液分配色谱(液-液分配色谱)和化学键合相色谱(化学键合相色谱)流动相和固定相都是液体流动相和固定相不应相互溶解（极性不同，应避免固定液体的损耗），流动相和固定相之间应有明显的界面。当样品进入色谱柱时，溶质分布
分配色谱仪是利用被分离组分在固定相和流动相中的溶解度差别进行分离的。一、固定相：分配色谱仪的固定相由载体和固定液组成。1、载体：为表面积大的惰性物质，起负载一定量固定液的作用。常用载体有吸水硅胶、纤维素和多孔硅藻土等。2、固定液：应是样品的良好溶剂，不溶或难溶于流动相。3、化学键合相固定相：分配色谱
分配色谱仪是利用被分离组分在固定相和流动相中的溶解度差别进行分离的。一、固定相：分配色谱仪的固定相由载体和固定液组成。1、载体：为表面积大的惰性物质，起负载一定量固定液的作用。常用载体有吸水硅胶、纤维素和多孔硅藻土等。2、固定液：应是样品的良好溶剂，不溶或难溶于流动相。3、化学键合相固定相：分配色谱
根据流动相所起的作用，化学键合相色谱仪流动相可分为底剂和洗脱剂。底剂决定基本的色谱分离情况，洗脱剂是为了调节样品组分的滞留并对某几个组分具有选择性的分离作用。一、正相键合相色谱：流动相极性小于固定相极性。常用非极性溶剂，样品组分的保留值可加入适当的有机溶剂（调节剂）调节。常用溶剂：氯仿、二氯甲烷、已
液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱(固定相) 内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中做相对运动时，经过反复多次的吸附- 解吸的分配过程，各组分在
根据分离机制的不同，液相色谱法可分为下述几种主要类型：1 。液 — 液分配色谱法Liquid-liquid Partition Chromatography及化学键合相色谱Chemically Bonded Phase Chromatography流动相和固定相都是液体。流动相与固定相之
分配色谱（partition chromatography）原理： 主要基于样品分子在流动相和固定相间的溶解度不同（分配作用）而实现分离的液相色谱分离模式。键合固定相： 分配色谱原本是基于样品分子在包覆于惰性载体（基质）上的固定相液体和流动相液体之间的分配平衡的色谱方法，因此也称液-液分
根据流动相所起的作用，化学键合相色谱仪流动相可分为底剂和洗脱剂。底剂决定基本的色谱分离情况，洗脱剂是为了调节样品组分的滞留并对某几个组分具有选择性的分离作用。一、正相键合相色谱：流动相极性小于固定相极性。常用非极性溶剂，样品组分的保留值可加入适当的有机溶剂（调节剂）调节。常用溶剂：氯仿、二氯甲烷、已
将固定液的官能团键合在载体表面构成化学键合相，以化学键合相为固定相的液相色谱仪称为化学键合相色谱仪，简称键合相色谱仪。流动相极性比固定相极性强的键合相色谱仪称为反相键合相色谱仪。一、固定相：在载体表面键合含弱极性或中等极性的官能团，如十八烷基硅烷、辛烷基、甲基和苯基等。二、流动相：以水为主体，加适量
将固定液的官能团键合在载体表面构成化学键合相，以化学键合相为固定相的液相色谱仪称为化学键合相色谱仪，简称键合相色谱仪。流动相极性比固定相极性强的键合相色谱仪称为反相键合相色谱仪。一、固定相：在载体表面键合含弱极性或中等极性的官能团，如十八烷基硅烷、辛烷基、甲基和苯基等。二、流动相：以水为主体，加适量
液相色谱仪键合固定相是采用化学反应将固定液键合在硅胶载体表面上所形成的填料，具有使用过程中不流失、化学性能稳定和热稳定性好等特点。一、制备硅胶基质键合固定相的注意点： 1、键合反应前，将硅胶表面的硅氧烷全部水解为硅烷醇。 2、除去硅胶表面的吸附水，使表面完全呈自由硅醇基。二
5）、池体积：除制备色谱外，大多数HPLC检测器的池体积都小于10µ；l。在使用细管径柱时，池体积应减少到1~2µ；l甚至更低，不然检测系统带来的峰扩张问题就会很严重。而且这时池体、检测器与色谱柱的连接、接头等都要精心设计，否则会严重影响柱效和灵敏度
4．与检测器有关的故障及其排除1）流动池内有气泡 如果有气泡连续不断地通过流动池，将使噪音增大，如果气泡较大，则会在基线上出现许多线状“峰”，这是由于系统内有气泡，需要对流动相进行充分的除气，检查整个色谱系统是否漏气，再加大流量驱除系统内的气泡。如果气泡停留在流动池内，也
液相色谱仪可以完成二元高压梯度洗脱，也可以拓展为制备系统，采用高压混合器连接两个高压恒流泵，利用RS232通讯，即可实现梯度分析，便于用户自由选择与搭配，混合器材主要由不锈钢、生物惰性PEEK等构成，用途广泛，可广泛应用于研究开发、医药检验、食品检测、化工分析、环境监测等众多
化学键合相色谱仪流动相由为底剂和洗脱剂组成。底剂决定基本的色谱分离情况，洗脱剂是为了调节样品组分的滞留并对某几个组分进行选择性分离。一、流动相的要求：1、溶剂具有稳定的化学性质。2、溶剂的选择与检测器相容。3、溶剂的粘度小。4、溶剂的沸点不能太低。5、溶剂的纯度高且价格便宜。二、常用溶剂：1、正相键
2．键合相的种类化学键合相按键合官能团的极性分为极性和非极性键合相两种。常用的极性键合相主要有氰基(-CN)、氨基(-NH2)和二醇基(DIOL)键合相。极性键合相常用作正相色谱，混合物在极性键合相上的分离主要是基于极性键合基团与溶质分子间的氢键作用，极性强的组分保留值较大。极性键合相有时也可作反相
在色谱分析中，如何选择最佳的色谱条件以实现最理想分离，是色谱工作者的重要工作，也是用计算机实现HPLC分析方法建立和优化的任务之一。本章着重讨论填料基质、化学键合固定相和流动相的性质及其选择。一、基质（担体）HPLC填料可以是陶瓷性质的无机物基质，也可以是有机聚合物基质。无机物基质主要是硅胶和氧化铝
一、液相色谱流动相的性质要求一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。选好填料（固定相）后，强溶剂使溶质在填料表面的吸附减少，相应的容量因子k降低；而较弱的溶剂使溶质在填料表面吸附增加，相应的容量因子k升高。因此，k值是流动相组成的函数。塔板数N一般与流
二、化学键合固定相 将有机官能团通过化学反应共价键合到硅胶表面的游离羟基上而形成的固定相称为化学键合相。这类固定相的突出特点是耐溶剂冲洗，并且可以通过改变键合相有机官能团的类型来改变分离的选择性。 1．键合相的性质 目前，化学键合相广泛采用微粒多孔硅胶为基体，用烷烃二甲基氯硅烷或
根据流动相所起的作用，高效液相色谱仪流动相可分为底剂和洗脱剂。底剂决定基本的色谱分离情况，洗脱剂是为了调节样品组分的滞留并对某几个组分具有选择性的分离作用。流动相又称洗脱剂、淋洗液、展层剂或溶剂。一、流动相选择的一般要求：1、流动相的纯度。2、流动相与固定相不互溶，不发生化学反应。3、对样品要有适宜
液固吸附色谱1.1分离原理 液固色谱是基于各组分吸附能力的差异进行混合物分离的，其固定相是固体吸附剂。1.2固定相 ；吸附色谱固定相可以分为极性和非极性两大类。1.3流动相 ；流动相要求：1.3.1选用的溶剂应当与固定相互不相溶，并能保持色谱柱的稳定性1.3.2选用的溶剂应有高纯度，以防所含微量杂质
高效液相色谱仪可以完成二元高压梯度洗脱，也可以拓展为制备系统，采用高压混合器连接两个高压恒流泵，利用RS232通讯，即可实现梯度分析； 便于用户自由选择与搭配，混合器材主要由不锈钢、生物惰性PEEK等构成，用途广泛； 可广泛应用于研究开发、医药检验、食品检测、化工分析、环境监测等