共转化法及其在植物基因工程中的应用
摘要: 共转化法是实现多基因在同一受体植株中转化的非常有效的方法。它在植物多基因代谢途径和获得去选择标记转基因植株研究中具有巨大的应用前景, 现今已经形成以基因枪和农杆菌介导两大方法为主体的共转化系统。全面介绍了这两种方法在共转化研究中的应用进展, 同时分析了转化过程中存在的问题和影响转化效率的因素。点击这里进入下载页面：进入下载页面......阅读全文
农杆菌介导的大麦转化方法实验
实验材料：植物凝胶 pBract 质粒
农杆菌侵染拟南芥花序的转化方法
制备转化用的农杆菌菌液准备：1．灭菌 试管 400毫升细长烧杯2瓶，离心瓶4-6个（250ml）。2．试剂：YEP 1200ml（每瓶300ml 共4瓶）+Kan 1;1000，Rif1:500。 1/2MS+2%蔗糖（灭菌115度20分钟），Silwet在-20℃贮存。3．步骤：共转化农杆菌：
关于农杆菌的基本内容介绍
农杆菌是指生活在植物根表面依靠由根组织渗透出来的营养物质生存的一类普遍存在于土壤中的革兰氏阴性细菌。农杆菌主要有两种：根癌农杆菌和发根农杆菌。根癌农杆菌能在自然条件下趋化性地感染140多种双子叶植物或裸子植物的受伤部位，并诱导产生冠瘿瘤。引发冠瘿瘤的原因是，Ti质粒上的T-DNA上有8个左右的基
植物基因转化常用方法
一. 植物遗传转化的方法 植物遗传转化技术可分为两大类：一类是直接基因转移技术，包括基因枪法、原生质体法、脂质体法、花粉管通道法、电激转化法、PEG介导转化方法等，其中基因枪转化法是代表。另一类是生物介导的转化方法，主要有农杆菌介导和病毒介导两种转化方法，其中农杆菌介导的转化方法操作简便、成本低、转
影响咽部肺炎克雷白杆菌菌落寄殖的因素
①宿主细胞的变化：宿主上皮细胞上各种受体各自接受相应的细菌，应用环孢素A可抑制受体对肺炎克雷白杆菌的吸附能力。 ②细菌的变化：这包括细菌本身是否具有荚膜，表面吸附物的类型及对外接触释放的特性等，肺炎克雷白杆菌的表面吸附物尚不明了。 ③局部微环境的变化：以环境中pH值影响最大，当pH6.5～7
农杆菌感受态细胞制备实验
农杆菌感受态细胞制备可用于：（1）建立农杆菌转化体系；（2）农杆菌表达系统构建；（3）农杆菌其他分子生物学研究。实验方法原理在基因工程操作中，感受态细胞的制备和质粒的转化是一项基本技术。感受态是细菌细胞具有的能够接受外源DNA的一种特殊生理状态。农杆菌的感受态可用CaCl2处理而诱导产生。将正在生长
农杆菌感受态的制备和转化
双元载体的农杆菌转化1.1农杆菌感受态细胞的制备1.1.1. 取-70℃保存的EHA105于含50μg/ml链霉素平板划线，28℃培养。1.1.2. 挑取单菌落接种于5ml YM液体培养基中，220rpm 28℃振荡培养12-16 hr。1.1.3. 取2ml菌液转接于100ml YM液体培养基中，
农杆菌感受态的制备和转化
实验方法原理 主要原理是通过电击法或CaCl2、RbCl(KCl)等化学试剂处理，使农杆菌细胞膜的通透性发生暂时性的改变，成为能允许外源DNA分子进入的感受态细胞。 实验材料
农杆菌感受态的制备和转化
农杆菌感受态细胞主要用于将目的基因导入植物细胞。实验方法原理主要原理是通过电击法或CaCl2、RbCl(KCl)等化学试剂处理，使农杆菌细胞膜的通透性发生暂时性的改变，成为能允许外源DNA分子进入的感受态细胞。实验材料农杆菌重组质粒试剂、试剂盒链霉素YM液体培养基CaCl2溶液甘油仪器、耗材离心管E
农杆菌感受态细胞制备实验
氯化钙法 电转农杆菌感受态 实验方法原理 在基因工程操作中，感受态细胞的制备和质粒的转化是一项基本技术。感受态是细菌细胞具有的能够接受外源DNA的一
农杆菌感受态的制备和转化
双元载体的农杆菌转化1.1农杆菌感受态细胞的制备1.1.1. 取-70℃保存的EHA105于含50μg/ml链霉素平板划线，28℃培养。1.1.2. 挑取单菌落接种于5ml YM液体培养基中，220rpm 28℃振荡培养12-16 hr。1.1.3. 取2ml菌液转接于100ml YM液体培养基中，
农杆菌侵染植物相关的注意事项
根癌农杆菌侵染植物是一个非常复杂的过程。根癌农杆菌具有趋化性，即植物的受伤组织会产生一些糖类和酚类物质吸引根癌农杆菌向受伤组织集中。研究证明，主要酚类诱导物为乙酰丁香酮和羧基乙酰丁香酮，这些物质主要在双子叶植物细胞壁中合成，通常不存在于单子叶植物中，这也是单子叶植物不易被根癌农杆菌侵染的原因。还
转基因植物及其安全性研究进展（一）
摘要：介绍了目前常用的植物转基因方法，并简要就转基因植物的生态安全性、35S启动子安全性、栽体骨架序列安全性、抗生素抗性标记基因安全性和食品安全性五个方面进行了综述。 21世纪，生命科学成为了自然科学中的主导科学。生物技术的核心是基因工程技术，新的技术带来了巨大的科学发展及经济效益，同时也带来了新
关于瞬时表达的优点介绍
①简单快速。转化基因可在转化的一周内进行分析，避免了组织培养等繁杂过程； ②表达水平高。当单链的T-DNA进入植物细胞后，许多未整合到植物基因组中的游离外源基因同样可以表达。 ③安全有效。不受植物生长发育过程的影响，不产生可遗传的后代，结果可靠直观，不存在基因漂移的风险。常用基因枪转化和农杆
基因的转移与重组体的筛选和鉴定2
二、重组DNA分子转入真核细胞1. 根癌农杆菌Ti质粒介导法农杆菌介导的Ti质粒载体转化法是目前研究最多、机制最清楚、技术方法最成熟的基因转化途径。迄今为止约8096的转基因植株都是利用农杆菌介导转化系统获得的。农杆菌是一类土壤习居菌，革兰氏染色呈阴性，能感染双子叶植物和裸子植物，而对绝大多数单子叶
转基因技术基因枪法简介
利用火药爆炸或高压气体加速（这一加速设备被称为基因枪），将包裹了带目的基因的DNA溶液的高速微弹直接送入完整的植物组织和细胞中，然后通过细胞和组织培养技术，再生出植株，选出其中转基因阳性植株即为转基因植株。与农杆菌转化相比，基因枪法转化的一个主要优点是不受受体植物范围的限制。而且其载体质粒的构建
粒子轰击细胞法的分类
这一方法是依靠一种基因枪来帮助导入外源基因。基因枪根据动力系统可分为火药引爆、高压放电和压缩气体驱动三类。其基本原理是通过动力系统将带有基因的金属颗粒（金粒或钨粒），将DNA吸附在表面，以一定的速度射进植物细胞，由于小颗粒穿透力强，故不需除去细胞壁和细胞膜而进入基因组，从而实现稳定转化的目的。它具有
基因枪的分类
这一方法是依靠一种基因枪来帮助导入外源基因。基因枪根据动力系统可分为火药引爆、高压放电和压缩气体驱动三类。其基本原理是通过动力系统将带有基因的金属颗粒（金粒或钨粒），将DNA吸附在表面，以一定的速度射进植物细胞，由于小颗粒穿透力强，故不需除去细胞壁和细胞膜而进入基因组，从而实现稳定转化的目的。它具有
基因枪法的基本原理
这一方法是依靠一种基因枪来帮助导入外源基因。基因枪根据动力系统可分为火药引爆、高压放电和压缩气体驱动三类。其基本原理是通过动力系统将带有基因的金属颗粒（金粒或钨粒），将DNA吸附在表面，以一定的速度射进植物细胞，由于小颗粒穿透力强，故不需除去细胞壁和细胞膜而进入基因组，从而实现稳定转化的目的。它具有
农残仪分析蔬菜餐前处理对农残的影响
蔬菜是我们生活中不可缺少的食物，消费者对蔬菜的需求量导致非常重视蔬菜的农药残留情况，蔬菜的餐前处理对农药的残留量又会有什么样的影响，我们可以利用农残仪对其进行分析，通过分析的结果，我们应该可以了解到蔬菜经水洗后，农药残留会有什么变化，是否清洗时间越长，农药残留量越低。清水浸泡时间对农药残留的影响。由
转基因技术农杆菌介导转化方法的介绍
农杆菌是普遍存在于土壤中的一种革兰氏阴性细菌，它能在自然条件下趋化性地感染大多数双子叶植物的受伤部位，并诱导产生冠瘿瘤或发状根。根癌农杆菌和发根农杆菌中细胞中分别含有Ti质粒和Ri质粒，其上有一段T-DNA，农杆菌通过侵染植物伤口进入细胞后，可将T-DNA插入到植物基因组中。 因此，农杆菌是一
根癌农杆菌诱发冠瘿瘤现象观察
一、原理冠瘿瘤是根癌农杆菌感染双子叶植物后形成的一种形似帽状的瘤组织，该组织能在正常细胞不能生长的无激素培养基上无限制地生长。冠瘿瘤的形成，是由于根癌农杆菌Ti质粒上的T－DNA（可转移DNA，其中含致病和冠瘿碱合成酶等基因）整合到宿主植物细胞染色体DNA上的结果。在植物基因工程研究中，以野生型Ti
简述转基因植物的农杆菌介导法
农杆菌的Ti质粒可以作为载体。Ti质粒上有两个区域，一个是T-DNA区，这是能够转移并整合进植物受体的区段；另一个是Vir区，它编码实现质粒转移所需的蛋白质。将待转化的外源基因先克隆在大肠杆菌质粒上，然后将此质粒转入不会引起冠瘿瘤的农杆菌（这种菌的Ti质粒已除去了T-DNA），使外源基因通过同源
植物基因转化常用方法
一 植物遗传转化的方法 植物遗传转化技术可分为两大类：一类是直接基因转移技术，包括基因枪法、原生质体法、脂质体法、花粉管通道法、电激转化法、PEG介导转化方法等，其中基因枪转化法是代表。另一类是生物介导的转化方法，主要有农杆菌介导和病毒介导两种转化方法，其中农杆菌介导的转化方法操作简便、成本低、转
科学家利用基因工程技术改进大肠杆菌
导读： 随着人们生活水平的提高，患大肠癌的人也是越来越多，吃完夜宵就睡觉、久坐不运动等都会导致大肠癌。大肠癌早期易于治疗，但是患病症状不明显，不易发现；病症发展到后期，数据显示，患者的存活率很低。 随着人们生活水平的提高，患大肠癌的人也是越来越多，吃完夜宵就睡觉、久坐不运动等都会导致大肠癌。大
概述转基因技术的方法
遗传转化的方法按其是否需要通过组织培养、再生植株通常可分成两大类，第一类需要通过组织培养再生植株，常用的方法有农杆菌介导转化法、基因枪法；另一类方法不需要通过组织培养，比较成熟的主要有花粉管通道法，花粉管通道法是中国科学家提出的。
发根农杆菌能促使植物生根等重要作用
促使植物生根 Ri质粒能诱导转化植物产生大量毛根，促进植物生根，已引起了人们的高度重视，被人们广泛使用。1985年它被应用于苹果与扁桃的插条以改善生根状况，从而有益于对干旱的抵抗。Hatta等发现发根农杆菌能诱导枣树的插条生根，Caboni等用野生发根农杆菌1855感染胡桃的微小切口，诱导出发
农杆菌感受态细胞的制备和转化
实验概要本实验介绍了根癌农杆菌GV3101感受态细胞的制备及冻融法转化。主要试剂利福平，LB培养基，NaCl，CaCl2，YEP培养基，卡那霉素主要设备摇床，高速离心机，低温冰箱，水浴锅实验材料根癌农杆菌GV3101单菌落实验步骤1. 根癌农杆菌GV3101感受态细胞的制备 1) 挑取单菌落GV
世界粮食奖和沃尔夫农业奖得主力挺转基因
正在北京举行的2016年世界生命科学大会上，除了10位诺贝尔奖得主作主题演讲外，几位世界粮食奖得主和沃尔夫农业奖得主，也受邀就生物科技对全球农业发展特别是粮食安全的作用等问题作主旨发言。 其中，2001年沃尔夫农业奖得主罗杰 N·比奇、2013年世界粮食奖得主罗伯特 T&mi
涂层测厚仪影响因素
a基体金属磁性质 磁性法测厚受基体金属磁性变化的影响（在实际应用中，低碳钢磁性的变化可以认为是轻微的），为了避免热处理和冷加工因素的影响，应使用与试件基体金属具有相同性质的标准片对仪器进行校准；亦可用待涂覆试件进行校准。 b基体金属电性质 基体金属的电导率对测量有影响，而基体金属