世界首例转基因手工克隆绵羊成功诞生
2012年3月26日,由深圳华大基因研究院、深圳华大方舟与中科院遗传发育所、石河子大学生命科学学院联合开展的“农业部绵羊转基因新品种培育重大专项”取得了突破性的进展,当日12时16分,第一头转基因克隆羊成功诞生,这也是目前世界上首例采用“手工克隆”技术获得的转基因克隆绵羊。 据相关人员介绍,克隆技术看似简单,其实每一步风险都很大,每一步操作起来难度也很大。目前全世界克隆成功率比较低,仅为5%—10%左右。此项转基因克隆绵羊项目从2009年开始一直面临着种种考验,地处新疆条件艰苦,实验设备简陋、时间短工作量大、人员配备不足等等,但华大方舟科研技术人员并没有被这些困难吓倒,经过不懈努力,进行了两年多的技术攻关,终于取得不菲的成绩。 2009年9月取供体细胞,将ω-3脂肪酸去饱和酶基因转入细胞,建立转基因细胞系;2010年5月开展手工克隆实验;2011年10月稳定获得囊胚,手工克隆技术体系建立;2012年3月26日1......阅读全文
制备克隆实验
试剂、试剂盒 ATP-巯基乙醇IPTGX-gal平末端限制酶连接缓冲液T4DNA 连接酶平末端插入物克隆载体培养基仪器、耗材 FALCON 2059 多聚丙烯试管37°C 恒温箱 水浴箱实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂ATP(10 mmol/L)β-巯基乙醇(可选择)IPTG(100 mm
PCR产物克隆
克隆方法:1. 平端连接 通常情况下,PCR产物可直接与平端载体DNA进行连接,但其连接效率效低。因为TaqDNA聚合酶具有非模板依赖性末端转移酶活性,能在两6条DNA链的3''''末端加上一个多余的碱基,使合成的PCR产物成为3'''
制备克隆实验
试剂、试剂盒 ATP -巯基乙醇 IPTG X-gal 平末端限制酶 连接缓冲液 T4DNA 连接酶 平末
克隆的种类
1.由同一个祖先细胞分裂繁殖而形成的纯细胞系(每个基因彼此相同)。2.先将含有遗传物质的供体细胞的核移植到去除了细胞核的受体卵细胞中,利用微电流刺激等使两者融合为一体。(与提供细胞者基因相同)
靶向克隆法
靶向克隆法是一种新的基因克隆方法,该克隆方法的特点是:在基因克隆过程中不使用已有的DNA Ligase,而是使用新开发的靶向克隆酶。靶向克隆酶能够使末端序列相同的双链DNA(14bp-18bp)同源重组,从而达到克隆基因的目的。LP Recco酶,中文名:靶向克隆酶,无需传统基因克隆所需要的限制性内
miRNA克隆实验
在细胞中表达的 RNA 除了我们所熟悉的 mRNA 以外,还有大量不编码蛋白质的非编码 RNA(noncoding RNA,ncRNA),非编码 RNA 在细胞中起着非常重要的作用,如 rRNA 和 tRNA 维持着基因的表达,还有一部分则起着调控基因表达的作用。本实验来源「RNA 实验指导手册」主
miRNA--克隆实验
实验方法原理 在细胞中表达的 RNA 除了我们所熟悉的 mRNA 以外,还有大量不编码蛋白质的非编码 RNA(noncoding RNA,ncRNA),非编码 RNA 在细胞中起着非常重要的作用,如 rRNA 和 tRNA 维持着基因的表达,还有一部分则起着调控基因表达的作用。实验材料 寡核
制备克隆实验
试剂、试剂盒ATP-巯基乙醇IPTGX-gal平末端限制酶连接缓冲液T4DNA 连接酶平末端插入物克隆载体培养基仪器、耗材FALCON 2059 多聚丙烯试管37°C 恒温箱水浴箱实验步骤一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂ATP(10 mmol/L)β-巯基乙醇(可选择)IPTG(100 mmol/L
分子克隆介绍
各位小伙伴,大家还记得当初进实验室的时候接触到的一个实验技能是什么呢?没错,是 PCR 扩增。小编曾经也是,看着自己亲自配比 PCR 克隆扩增的每个组分,亲眼看着琼脂糖凝胶在紫外透光台上发出的幽绿色的荧光,也是深深被迷住。但总不可能成天就对着这个邪魅的荧光发呆,对吧?看久了,她会爱上你的眼
miRNA克隆实验
实验方法原理 在细胞中表达的 RNA 除了我们所熟悉的 mRNA 以外,还有大量不编码蛋白质的非编码 RNA(noncoding RNA,ncRNA),非编码 RNA 在细胞中起着非常重要的作用,如 rRNA 和 tRNA 维持着基因
PCR产物克隆
克隆方法:1. 平端连接 通常情况下,PCR产物可直接与平端载体DNA进行连接,但其连接效率效低。因为TaqDNA聚合酶具有非模板依赖性末端转移酶活性,能在两6条DNA链的3''末端加上一个多余的碱基,使合成的PCR产物成为3''突出一个碱基的DNA分子。这种DN
核糖克隆实验
这个方案只是用 RNA 酶处理 PCR 产物的一种方法。有很多可选择和有效的途径来纯化 PCR 产物以除去引物,接着用酶处理 PCR 产物,然后再除去酶。值得注意的是用 PCR仪设置温浴程序是很方便的。可以在加热步骤完成后选择加上“冷却”步骤,即在冷模块中放置 5 min 甚至过夜。本实验来源于 P
冷静看待转基因-让转基因与非转基因公平竞争
以冷静的态度去看转基因 11月17日,“中国杂交水稻之父袁隆平”在河南农业大学作报告。在报告会结束之后,在接受现场同学提问转基因食品时,袁隆平毫不回避地表示:“转基因食品问题,我的是看法是这样的,转基因不能一概而论,基因多种多样,有些基因特别是抗病虫的基因,大家担心人吃了会不会有问题
世界首例转基因水牛在广西诞生
12月19日凌晨4时15分,世界首例转基因克隆水牛在广西大学科研基地金光乳业水牛场诞生。此例转基因克隆水牛为雄性双犊,一头体重为20.5公斤,正常存活;另外一头体重14公斤,不幸死亡。在紫外灯照射下,转基因克隆水牛头部和四肢明显表达绿色荧光蛋白标记基因。 转基因克隆是广西大学
细胞克隆和DNA克隆之间是什么关系
细胞克隆包括了dna的克隆,这么说吧,你要克隆一个细胞,你就要百克隆度这个细胞的所有,而dna是一个细胞最重要的东东。但是这并不是说细胞克隆的时候你要自己去克隆dna。细胞内克隆时相当于你在容体外复制细胞,自然dna也会被克隆。而dna克隆,你可以用pcr去完成。
单克隆抗体技术的克隆化的内容
从原始孔中得到的阳性杂交瘤细胞,可能来源于二个或多个杂交瘤细胞,因此它们所分泌的抗体是不同质的。为了得到完全同质的单克隆抗体,必须对杂交瘤细胞进 行克隆化。另一方面,杂交瘤细胞培养的初期是不稳定的,有的细胞丢失部分染色体,可能丧失产生抗体的能力。为了除去这部分已不再分泌抗体的细胞,得到分泌 抗体
什么是多克隆抗体,多克隆抗体的优势?
天然的抗原分子中常含有多种不同的抗原表位,以该抗原刺激机体的免疫系统可同时激活多种B细胞克隆,产生的抗体中会含有多种针对不同抗原表位的抗体,因此称之为多克隆抗体。多克隆抗体主要从动物免疫血清、恢复期患者血清或免疫接种人群的血清中获得。多克隆抗体的优势是:作用全面,具有中和抗原、免疫调理、补体依赖的细
《转基因之争》书评:转基因食物安全吗?
前言:人类历史上有哪次技术革命经历了最广泛持久和最激烈的争论?中国科学院动物研究所研究员沈孝宙编写的《转基因之争》回答了这个问题。 安全性是人们最关心的问题 人类的生存、发展和进化离不开食物。任何一种食物,无论是传统的还是转基因的,健康安全是首要问题。没有安全,其他皆无意义。 但是,人类对食物
转基因测试纸缓解了转基因“泛滥”问题
如今,转基因食品“泛滥”,尤其是对于一些非法转基因种子我国农业部有明确规定不能下地。为方便相关检测人员或消费者更快、更低成本的检测,转基因测试纸获农业部推荐使用。据介绍,这种试纸具备高灵敏度、特异性强、通用性广、反应速度快、可长期储存等特性。 我们都知道,不同作物类型样品成分组成差异大
转基因技术的发展与转基因动植物
1.转基因技术的发展 自从人类学会蓄养动物、耕作植物以来,我们的祖先就从未停止过对物种的遗传改良。过去的几千年里改良物种的主要方式:针对自然环境造成的突变或无意的人为因素所产生的优良基因和重组个体进行选育和利用,从而通过随机和自然的积累优化基因。然而这种极低几率且无人类控制性的被动模式大大
转基因技术的发展与转基因动植物
1.转基因技术的发展 自从人类学会蓄养动物、耕作植物以来,我们的祖先就从未停止过对物种的遗传改良。过去的几千年里改良物种的主要方式:针对自然环境造成的突变或无意的人为因素所产生的优良基因和重组个体进行选育和利用,从而通过随机和自然的积累优化基因。然而这种极低几率且无人类控制性的被动模式大大
关注转基因:转基因研发何以被舆论绑架
30年前开始从事转基因研究时,中国科学院遗传与发育生物学研究所研究员朱祯没有料想到,如今他要用三分之一的工作时间来做转基因科普,也没有料想到当初被认为能改变传统农业面貌的技术,会面临如此汹涌的反对浪潮。 近日,科技日报社与中国科学技术发展战略研究院联合展开的问卷调查显示,由于误解相关知识和信息
转基因食品入侵国人餐桌:转基因大米暗度陈仓
转基因食品范围逐渐扩大:大豆、玉米、木瓜…… 1996年,刚开始成为大豆进口国的中国,全年进口的大豆为110万吨。而中国大豆产业协会称,2010年这一数值已经猛增至5000万吨左右,15年间增长了45倍,而目前进口的绝大多数是转基因大豆……进口转基因大豆,在中国市场上销售的价格很多时候
我国学者培育出可同时表达4种荧光蛋白的克隆猪
记者在中科院广州生物医药与健康研究院获悉,该院近期成功培育出一种特殊的转基因克隆猪,这种克隆猪在特定波长的激发光下可分别发出红、黄、绿、青4种荧光,这是国际上首次获得能够同时表达4种荧光蛋白的转基因克隆猪。 据研究人员介绍,该项成果的运用,将极大地促进含多种优良性状的转基因克隆猪的研究与产业化
中国首批转基因水牛诞生-转基因动物食品尚需评估
2010年12月2日14时广西诞生的世界首例单精子显微授精的转基因水牛龙凤双犊。 中国广西大学动物科学技术学院院长石德顺博士22日向中新社记者介绍,作为世界第三水牛大国,中国在水牛繁殖生物技术领域不断取得重大突破。世界首例单精子显微授精的转基因水牛、世界首例慢病毒介导的转基因水
克隆技术的应用前景
克隆技术已展示出广阔的应用前景,概括起来大致有以下四个方面: (1)培育优良畜种和生产实验动物; (2)生产转基因动物; (3)生产 人胚胎干细胞用于细胞和组织替代疗法; (4)复制濒危的动物物种,保存和传播动物物种资源。 以下就生产 转基因动物和胚胎干细胞作简要说明。 转基因动物研
单克隆抗体和多克隆抗体有何区别
单克隆抗体的优点与局限性:单克隆抗体和多克隆抗体各有其优点和局限性,只有对它们有全面的了解,才能根据不同应用领域的要求,正确的选择和应用。1.单克隆抗体的优点:(1)杂交瘤可以在体外“永久”地存活并传代,只要不发生细胞株的基因突变,就可以不断的生产高特异性、高均一性的抗体。(2)可以用相对不纯的抗原
美成功克隆猴子胚胎-人体克隆可能性增大
美国科学家新近取得的一种技术突破可帮助利用成年猴子克隆胚胎,预示着克隆人类胚胎终于有可能成为现实。这种新技术承诺将革命性地提高科学家把人类卵子转化为克隆胚胎的效率,同时也引发新一轮关于克隆人伦理的讨论。 据悉,被克隆的是一只10岁的雄性恒河猴。(华盖图) 基于新的卵子处理方法 这是科学家首次
世界首头克隆骆驼怀孕:证明克隆动物可繁衍
科学家表示世界上第一头克隆骆驼“因扎兹”(Injaz)成功自然受孕。“因扎兹”今年6岁,是2009年一头屠宰骆驼的卵巢细胞克隆结晶。整个克隆过程借助一位代孕母亲完成。照片中的小骆驼便是“因扎兹”,当时只有6天大。 自“因扎兹”降生后,科学家又成功克隆了很多动物,其中包括一头利用骆驼选美比赛冠军
单克隆抗体与多克隆抗体的功能差异
单克隆抗体和多克隆抗体的最大的区别在于特异性上的差别。因此实验中如果对抗体的特异性有一定的需求,但并不是特别强调的话,可以选择定制多克隆抗体,这样的实验一般包含Western-Blot(WB),IP等。如果您需要抗体用于流式细胞术时,那么最好选择单克隆抗体。另外,在研究很多新的蛋白时,并不确定新蛋白