ABI实时定量PCR仪获批准与美新流感检验试剂配套联用
美国应用生物系统公司(纽约证券交易所代码:ABI)即日宣布,其新一代7500 Fast Dx Real-Time PCR仪已经获得美国食品与药品监督管理局(FDA)的正式批准函件(510(k)),可与美国疾病预防与控制中心的新CDC人类流感病毒实时定量RT- PCR检测和鉴定组(rRT-PCR Flu Panel)配套联用。尽管两种产品是获得独立的FDA 510(k)许可,它们需要配套联用以作为一套系统来检测流感病毒。 与7500 Fast Dx Real-Time PCR仪配套联用的全新CDC诊断分析是专门为辅助流感病毒的检测和分型的标准化而设计,并为美国有资格进行流感亚型检测的实验室提供准确、专一和可靠的流感检测结果。新的检测由CDC与ABI公司合作研发,能在4小时内准确检测和鉴定出通常流行的人流感病毒以及禽流感A(H5N1)病毒,每次能检测多个样品。这个检测使临床研究者能够分辨流感的常见季节性流行亚型以及禽流感A亚型,以......阅读全文
普通PCR、实时荧光定量PCR、数字PCR技术的功能区别
一、普通PCR技术 KARY MULLIS (1944.12.28-2019.8.7) Kary Mullis于1983年发明了聚合酶链式反应法(polymerase chain reaction ,PCR),据说是载着女友开车的时候,忽然灵光一闪,想到了PCR原理(论开车的好处)
普通-PCR、实时荧光定量-PCR-和数字-PCR-对比分析
提起 PCR,在生物及其相关行业内可谓如雷贯耳,无人不知无人不晓,其影响之深,应用之广可见一斑。 1985 年,美国 PE-Cetus 公司的 Mullis 等人发明了聚合酶链反应(PCR),实现了在试管中模拟细胞内的 DNA 复制。然而,采用 E-coli DNA 聚合酶进行 PCR,由于
荧光定量PCR耗材的使用和选择注意几点
高通量的96孔PCR板和8联管是在聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)中,主要作为参与扩增反应的引物、Taq DNA聚合酶、dNTP、模板核酸、Mg、缓冲液等的承载物。医疗级聚丙烯(PP)材质因其的纯净度和稳定性,能更好适应PCR反应过程中反复高低温设定,
基因测序仪的原理
abi prism 310型基因分析仪采用毛细管电泳技术取代传统的聚丙烯酰胺平板电泳,应用该公司ZL的四色荧光染料标记的ddntp(标记终止物法),因此通过单引物pcr测序反应,DNA测序仪生成的pcr产物则是相差1个碱基的3''''末端为4种不同荧光染料的单链dna
基因测序仪的原理
abi prism 310型基因分析仪采用毛细管电泳技术取代传统的聚丙烯酰胺平板电泳,应用该公司ZL的四色荧光染料标记的ddntp(标记终止物法),因此通过单引物pcr测序反应,DNA测序仪生成的pcr产物则是相差1个碱基的3''''末端为4种不同荧光染料的单链dna
转基因植物NPTⅡ基因PCR检测试剂盒流程步骤
1. 整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作,各区实验服、仪器 、耗材应独立使用,不能混用;实验用吸头采用带滤芯吸头;样本处理区应配有生物安全柜,样本处理在生物安全柜中进行操作;三个区应该配有紫外线杀菌装置。 2. 为避免RNA降解,样本处理过
难辨梭状芽胞杆菌(Cd)核酸检测试剂盒实验流程
1. 整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作,各区实验服、仪器 、耗材应独立使用,不能混用;实验用吸头采用带滤芯吸头;样本处理区应配有生物安全柜,样本处理在生物安全柜中进行操作;三个区应该配有紫外线杀菌装置。 2. 为避免RNA降解,样本处理过
冬季疫情反复,流感高发如何区别流感、普感和新冠
流感常常会有高热,热程相对比较长,一般是3—5天,大概在一周左右才能好转。流感还常常伴有全身症状,包括全身肌肉疼痛、乏力、头痛的情况,重症流感可能有严重并发症,尤其是低龄儿童。普通感冒通常会有鼻塞、流鼻涕、打喷嚏的症状,可能会有发烧。但一般是低中度发烧,持续时间1—2天,基本3~5天就可以自愈。感冒
流感病毒及流感疫苗研究进展一览
本期为大家带来流感病毒的最新研究进展,帮助大家了解科学家们正在如何通过进一步了解流感病毒来开发新的流感疗法和流感疫苗。 【1】Nat Microbiol:首次发现流感病毒和呼吸道细菌能互相协作促进宿主感染 DOI:10.1038/s41564-019-0447-0 近日,一项刊登在国际杂志
专家:猪流感病毒在传播方式上危害大于禽流感
CCTV《新闻会客厅》4月28日播出《中国:积极防控猪流感》,以下为节目实录: 4月13日,墨西哥发现首个病例,至今确认及疑似猪流感死亡152人,感染或疑似感染4000人。 4月17日,美国发现首个病例,至今确认感染50人。 4月26日,新西兰、法国、西班牙、以色列、英国先后报
今年的流感疫苗或许不能彻底防止流感病毒传播
关于H3N2你要知道的:如果你得过,那么你应该知道它的恐怖,如果你没有得过,也要记住它十分恐怖。 是的,我们谈论的就是今年的流感流行毒株。 来自UCLA医学中心的医生们呼吁大众提高对当季流感疫情的重视,做好预防与治疗的准备。 根据美国疾控中心的报告,流感疫情正在整个国家内传播:目前加州范围
国家流感中心主任称甲型流感仍可能局部暴发
卫生部8月13日消息,自2009年5月11日国内报告首例甲型H1N1流感确诊病例以来,我国内地累计报告甲型流感确诊病例12.8万余例,死亡病例805例。 国家流感中心主任舒跃龙指出,由于2009年甲型H1N1流感大流行期间,全球范围内不同城市和地区所经历的疫情严重程度不同,人群对甲型H1N
医学专家称现有流感疫苗对猪流感“部分有效”
环球时报特约记者林雯欣报道 据《科学》报道,美国疾病预防和控制中心强烈怀疑现有的流感疫苗是否能提供任何保护,使人们免得猪流感.在昨天的一场记者招待会上,现任疾控中心主管里查德.贝丝说到:“我们认为现有的疫苗并不是有效的。” 但是一些流感疫苗的研制者及公共卫生专家说上面的判断不太恰当。作为一
内氏放线菌PCR检测试剂盒使用说明书
产品名称:内氏放线菌PCR检测试剂盒产品规格:50T原理是由一对引物介导,能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增,经过n个热循环扩增,扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0<E<1,扩增效率=倍,使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。产品仅用于科研实验特异性强PCR反
疾控中心流感监测网络实验室建成
2009年9月24日,重庆市卫生局及重庆市疾控中心专家组一行对我中心国家流感网络监测实验室进行督查和验收。专家组一行对我中心的流感检测工作进行了详细的检查和指导,并批准我中心正式开展流感病毒核酸检测(real-time RT-PCR和RT-PCR)工作。该工作是继我中心成功进行病毒分离
关于甲型H5N1流感病毒的测定方法介绍
世界动物卫生组织(OIE)规定,禽流感病毒的检测采用鸡胚病毒分离培养及致病力测定。中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局和国家标准化管理委员会联合发布了6项有关禽流感病毒检测的国家标准,其中针对H5N1亚型的有《H5亚型禽流感病毒荧光RT-PCR检测方法》、《H5亚型禽流感病毒NASBA检测方法
PCR八联管的产品特点以及制作过程!
PCR八联管的产品特点以及制作过程! 在生物技术活动中,PCR八联管的作用非常强大,其用途非常广泛,八联管可以在各种生物实验室中看到。下面,本生生物就简单详述下PCR八联管的产品特点以及制作过程! 1、产品特点: 1)100,000个粉尘级清洁车间,无DNA和RNA,无热源,医
间接原位PCR(原位杂交PCR)
与直接原位PCR所不同的是,靶基因在扩增时不进行标记基团的掺入,而是标记一段与扩增片段互补的探针,在扩增结束后,应用此探针进行原位杂交。因此,此处主要介绍原位杂交,其余方法同原位PCR。实验材料组织或细胞样品试剂、试剂盒SSC硫酸葡聚糖甲酰胺脱脂奶粉Denhardt’s 液SDS变性的鲑鱼精DNAR
间接原位PCR(原位杂交PCR)
间接原位PCR(原位杂交PCR) 实验材料 组织或细胞样品 试剂、试剂盒
反向PCR-(inversePCR)实验步骤
nverse-PCR是克隆插入片段侧翼序列非常有效的方法。通常采用的Tail-PCR假阳性太多,而Inverse-PCR一般只要有特异条带,基本上就是目的片段。基本步骤如下:1、反向PCR(Inverse PCR)原理:反向PCR是克隆T-DNA插入位点侧翼DNA序列非常有效的方法。a. 选择合适的
定量PCR实验技术-QPCR
Quantitative PCRJoseph SambrookPeter Maccallum Cancer Institute and The University of Melbourne, AustraliaDavid W. RussellUniversity of Texas Southwes
影响PCR及荧光PCR-的因素
引物的设计和选择符合荧光PCR的探针并进行设计对于实时荧光PCR尤其重要。可以说,不合理的设计意味着绝对的失败。但是,好的设计并不等于好的实验结果,影响PCR和荧光PCR的因素非常多,下面择其重要进行介绍。 3.1 引物退火温度 引物的一个重要参数是熔解温度(Tm)。这是当50%的
PCR技术(十):PCR产物克隆方法
平端连接 通常情况下,PCR产物可直接与平端载体DNA进行连接,但其连接效 率效低。因为TaqDNA聚合酶具有非模板依赖性末端转移酶活性,能 在两6条DNA链的3'末端加上一个多余的碱基,使合成的PCR产物成为 3'突出一个碱基的DNA分子。这种DNA分子的连接效率很低。由于PCR
逆转录PCR(RTPCR)
实验四 逆转录PCR (RT-PCR )【实验目的】1.了解用逆转录PCR 法获取目的基因的原理。2.学习和掌握逆转录PCR 的技术和方法。【实验原理】聚合酶链式反应(PCR)过程利用模板变性,引物退火和引物延伸的多个循环来扩增DNA序列。因为上一轮的扩增产物又作为下一轮扩增的模板,是一个指数增长的
菌落PCR(Colony-PCR)具体方法
菌落PCR(Colony PCR)可不必提取基因组DNA,不必酶切鉴定,而是直接以菌体热解后暴露的DNA为模板进行PCR扩增,省时少力。建议使用载体上的通用引物。通常利用此方法进行重组体的筛选或者DNA测序分析。最后的PCR产物大小是载体通用引物之间的插入片断大小。具体方法:1、PCR混合物的制
什么是免疫PCR(immunoPCR)?
1.定义:免疫-PCR(immuno-PCR)它利用抗原-抗体反应的特异性和PCR扩增反应的极高灵敏性来检测抗原,尤其适用于极微量抗原的检测。是新近建立的一种灵敏、特异的抗原检测系统。主要步骤有三个:①抗原-抗体反应,②与嵌合连接分子结合,③PCR扩增嵌合连接分子中的DNA(一般为质粒DNA)。 2
什么是免疫PCR(immunoPCR)?
1.定义:免疫-PCR(immuno-PCR)它利用抗原-抗体反应的特异性和PCR扩增反应的极高灵敏性来检测抗原,尤其适用于极微量抗原的检测。是新近建立的一种灵敏、特异的抗原检测系统。主要步骤有三个:①抗原-抗体反应,②与嵌合连接分子结合,③PCR扩增嵌合连接分子中的DNA(一般为质粒DNA)。 2
反向PCR-(inversePCR)实验步骤
inverse-PCR是克隆插入片段侧翼序列非常有效的方法。通常采用的Tail-PCR假阳性太多,而Inverse-PCR一般只要有特异条带,基本上就是目的片段。基本步骤如下:1、反向PCR(Inverse PCR)原理:反向PCR是克隆T-DNA插入位点侧翼DNA序列非常有效的方法。a. 选择合适
PCR技术(六):PCR技术应用进展
PCR技术自1985年建立以来,发展之迅速、应用之广泛,表明其具有强大的生命力.近些年来,基于PCR的基本原理,许多学者充分发挥创造性思维,对PCR技术进行研究和改进,使PCR技术得到了进上步地完善,并在此基础上派生出了许多新的用途. 原位PCR技术 原位PCR就是在组织细胞里进行PCR反应,它结
PCR技术(七):mRNA差异PCR技术
生物界的丰富多彩很大程度上取决于严格调控下的基因的选择性表达。高等生物的细胞内约含有105个不同的基因,而主 基因在某个特定的细胞中,只有占15%的一小部分表达。而且在不同的细胞中,选择性表达的基础也是不同的。正是这些基因的选择不同决定了整个生命的过程:如细胞的生长分化,激素和细胞困子对细胞的作用、