海南捕鸟蛛毒素Ⅴ分离纯化及其抑制河豚毒敏感型钠通道活性研究

摘要: 经阳离子交换和反相HPLC 柱层析从海南捕鸟蛛( Seleconosmia hainana) 粗毒中分离到1 种新的神经毒素, 命名为海南捕鸟蛛毒素- Ⅴ (Hainantoxin2 Ⅴ, HNTX2 Ⅴ) , MALDI2TOF 质谱鉴定分子量为3 96915 Da 。在全细胞记录膜片钳模式下, HNTX2 Ⅴ对成年大鼠背根神经节(DRG) 细胞河豚毒敏感型(TTX2S) 钠电流有抑制作用, 但对河豚毒不敏感型(TTX2R) 钠电流无明显影响。HNTX2 Ⅴ对TTX2S 钠电流的抑制作用具有浓度依从性, 其有效半抑制浓度( IC50) 为4618 nmol/L 。HNTX2 Ⅴ不影响TTX2S 钠电流的激活相和失活相, 对钠通道的激活阈值和最大激活电压也无明显改变, 表明HNTX2 Ⅴ影响钠通道的作用机制明显有别于δ2ACTXs 等蜘蛛毒素。推测HNTX2 Ⅴ很可能类似于河豚毒、Saxitoxin 和μ2conotox......阅读全文

大鼠海马神经细胞钠通道电流的记录实验

实验方法原理钠通道在多种细胞尤其是在神经、肌肉等可兴奋细胞中广泛存在。钠电流(ⅠNa)是快反应细胞上最重要的除极离子流,与细胞的兴奋性密切相关。钠通道在膜电位-70~-65 mV开始激活,产生一迅速激活并迅速失活的内向电流,最大电流峰值在膜电位-40 ~-30 mV,反转电位为+30 mV左右。在参

大鼠海马神经细胞钠通道电流的记录实验

实验方法原理 钠通道在多种细胞尤其是在神经、肌肉等可兴奋细胞中广泛存在。钠电流(ⅠNa)是快反应细胞上最重要的除极离子流,与细胞的兴奋性密切相关。钠通道在膜电位-70~-65 mV开始激活,产生一迅速激活并迅速失活的内向电流,最大电流峰值在膜电位-40 ~-30 mV,反转电位为+30 mV

电流记录仪简介

  电流记录仪是针对各种工业现场的实际需求设计生产的,集显示、处理、记录、积算、报警和配电等多种功能于一身的新型记录仪。  电量记录仪采用高亮度、宽视角的5.6英寸TFT液晶显示屏,显示清晰明了;采用超大容量的NAND FLASH作为历史数据的存储介质,真正实现无纸记录仪强大的记录功能;按键和旋钮联

组织薄片膜片钳全细胞记录实验

实验方法原理通过全细胞膜片钳技术来检测组织薄片(脊髓片或脑片)上神经元的突触后电位、突触后电流及该突触后电位或电流的可塑性改变等现象。组织薄片膜片钳技术与分散细胞膜片钳技术相比,具有的优点是组织薄片中的细胞更接近在体的原始环境,很好地保持了神经元之间的突触联系。实验材料神经细胞试剂、试剂盒孵育细胞外

组织薄片膜片钳全细胞记录实验

实验方法原理 通过全细胞膜片钳技术来检测组织薄片(脊髓片或脑片)上神经元的突触后电位、突触后电流及该突触后电位或电流的可塑性改变等现象。组织薄片膜片钳技术与分散细胞膜片钳技术相比,具有的优点是组织薄片中的细胞更接近在体的原始环境,很好地保持了神经元之间的突触联系。实验材料 神经细胞试剂、试剂盒 孵育

组织薄片膜片钳全细胞记录实验

基本方案             实验方法原理 通过全细胞膜片钳技术来检测组织薄片(脊髓片或脑片)上神经元的突触后电位、突触后电流及该突触后电位或电流的可塑性改变等现象。组织薄片膜片

电流记录仪的分类

  随着国内仪表技术的越来越成熟,记录仪的分类也越来越多。记录仪根据打印种类来分:分为温度无纸记录仪和温度有纸记录仪,无纸记录仪可通过U盘或CF卡来转存记录仪中的数据,再到电脑上,通过打印机来打印记录的曲线和数据;有纸记录仪可直接在现场打印,但是这个耗纸比较厉害,一般这些纸张都需要从厂家购买,一年的

单通道电流记录技术简介

又称膜片钳位技术,用特制的玻璃微吸管吸附于细胞表面,使之形成10~100GΩ的密封(giga-seal),被孤立的小膜片面积为μm2量级,内中仅有少数离子通道。然后对该膜片实行电压钳位,可测量单个离子通道开放产生的pA(10-12安培)量级的电流,这种通道开放是一种随机过程。通过观测单个通道开放和关

神经组织块膜片钳全细胞记录实验

实验方法原理通过全细胞膜片技术来检测神经元兴奋性及其放电活动,是电生理实验的基本方法。神经组织块膜片钳技术相对于培养细胞膜片钳技术而言,细胞更接近原始的生理环境,细胞具有更好的生理状态,封接后可维持更长的时间。实验材料细胞试剂、试剂盒人工脑脊液(ACSF)消化酶浓缩液ACSF通混合气尼龙网准备电极内

神经组织块膜片钳全细胞记录实验

实验方法原理 通过全细胞膜片技术来检测神经元兴奋性及其放电活动,是电生理实验的基本方法。神经组织块膜片钳技术相对于培养细胞膜片钳技术而言,细胞更接近原始的生理环境,细胞具有更好的生理状态,封接后可维持更长的时间。实验材料 细胞试剂、试剂盒 人工脑脊液(ACSF)消化酶浓缩液ACSF通混合气尼龙网准备

神经组织块膜片钳全细胞记录实验

基本方案             实验方法原理 通过全细胞膜片技术来检测神经元兴奋性及其放电活动,是电生理实验的基本方法。神经组织块膜片钳技术相对于培养细胞膜片钳技术而言,细胞更接近

电流记录仪的主要特点

  画面信息丰富,可同时显示数据、曲线、棒图等;  最多12路万能输入,可接收热电偶、热电阻、电流和电压等多种输入信号;  最多4路模拟量变送输出通道,有(0~10)mA、(4~20)mA和(0~20)mA等3种输出信号供选择;  最多12路报警输出,常闭常开触点可选;  最多3路24V配电输出; 

单通道电流记录技术的研究发展

1980年Sigworth等在记录电极内施加5-50 cmH2O的负压吸引,得到10-100GΩ的高阻封接(Giga-seal),大大降低了记录时的噪声实现了单根电极既钳制膜片电位又记录单通道电流的突破。1981年Hamill和Neher等对该技术进行了改进,引进了膜片游离技术和全细胞记录技术,从而

单通道电流记录技术的应用特点

膜片钳又称单通道电流记录技术,用特制的玻璃微吸管吸附于细胞表面,使之形成10~100的密封(giga-seal),又称巨阻封接,被孤立的小膜片面积为μm量级,内中仅有少数离子通道。然后对该膜片实行电压钳位,可测量单个离子通道开放产生的pA(10的负12次方安培)量级的电流,这种通道开放是一种随机过程

关于神经毒素的简介

  常可引起神经毒素(如蛇毒)和突触前神经毒素。也有作用于神经轴突(如石房蛤毒素),中枢神经系统的(如某些蕈毒素)。  主要是指作用于离子通道的毒素。  钠通道受体毒素是一类重要的神经毒素之一,因其作用于钠通道的不同位点而产生不同的毒理作用。主要包括:  (1)钠通道阻滞剂,包括河豚毒素(tetro

单通道电流记录技术的主要用途

金属离子作用于细胞膜行为的研究细胞膜离子通道的性质鉴定及其动力学研究细胞分泌的研究信号转导的研究分子生物学研究

关于神经毒素的历史简介

  神经毒素是从民用有机磷农药杀虫剂发展而来,1935年德国学者成功地研制出速效有机磷农药杀虫剂──塔崩。由于意外事故,研究者中毒而出现一系列胆功能衰竭,这才意识到塔崩对人体有巨大的毒性;此时正值第二次世界大战,塔崩很快被用于军事战争并发挥了巨大的作用。原本为农药杀虫剂在战争中使用后便成为军用毒剂。

神经毒素的结构与分类

  神经性毒剂属 [2] 有机磷化合物或有机磷酸酯。美军将含有P-CN键和P-F键,即毒剂X取代基为卤素或拟卤素的前三者称为G系列毒剂,代号分别为GA、GB和GD;将含有P-SCH2CH2N(R)2键的化合物称为V类毒剂,如VX、VE、VG、VS及VR等,美军装备的V类毒剂是VX。

关于神经毒素的基本介绍

  神经毒素是指对神经组织有破坏性的有毒物质。如AF64A、6一羟多巴胺和海人酸等。AF64A能选择性地破坏胆碱能神经元。6一羟多巴胺能选择性地破坏多巴胺、去甲肾上腺素和肾上腺素神经元,易被儿茶酚胺神经元摄取,一般注入脑内约5天~7天,就可使神经元变性,但不能破坏5一羟色胺神经元。海人酸对神经组织的

关于温升电流测控记录仪的技术参数

  RXWS3C温升电流测控记录仪   采用西门子PLC作为控制器,自动实时采集电流数据,并依据设置的参数,自动控制外部升压降压电机,稳定电流数据;并对实际的电流数据进行记录保存于U盘中,也可以与上位机进行数据通讯,上传实时数据。   1、 输入电流:3个通道   每个通道0.3A~6A  

细胞内记录实验

实验方法原理膜电位的记录需要在细胞膜的两侧各放置一个电极形成一个环路,因此将一个电极插入细胞膜内进行相应电特性的记录时,这种记录方法即为细胞内记录法。使用该方法可以准确测量膜电位的绝对值,还能测定兴奋性突触后电位、抑制性突触后电位及动作电位实验材料细胞仪器、耗材微电极放大器玻璃微电极.微推进器实验步

细胞内记录实验

基本方案             实验方法原理 膜电位的记录需要在细胞膜的两侧各放置一个电极形成一个环路,因此将一个电极插入细胞膜内进行相应电特性的记录时,这种记录方法即为细胞内记录

细胞内记录实验

实验方法原理 膜电位的记录需要在细胞膜的两侧各放置一个电极形成一个环路,因此将一个电极插入细胞膜内进行相应电特性的记录时,这种记录方法即为细胞内记录法。使用该方法可以准确测量膜电位的绝对值,还能测定兴奋性突触后电位、抑制性突触后电位及动作电位实验材料 细胞仪器、耗材 微电极放大器玻璃微电极.微推进器

Science:华人学者解析致命的神经毒素

   肉毒杆菌(Clostridium botulinum)是一种生长在缺氧环境下的致命病菌,存在于腐烂、未煮熟的食物和土壤中。这种细菌分泌的肉毒杆菌毒素对人体的危害极大,是毒性最强的毒素之一,也是一种潜在的生化武器。  日前,加州大学Irvine医学院的科学家们解析了肉毒杆菌毒素穿过肠道壁进入血液

膜片钳技术原理

可兴奋膜的电学模型      细胞膜由脂类双分子层和和蛋白质构成。脂质层的电导很低,由于双分子层的结构特点,形成了细胞的膜电容,通道蛋白的开闭状况主要决定了膜电导的数值。在细胞膜的电学模型中,膜电容和膜电导构成了一个并联回路。在细胞膜的电兴奋过程中,脂质层膜电容的反应是被动的,其电流电压曲线是线

全血细胞如何计数?

全血细胞计数(CBC)是医生或其他医疗专业人员要求的测试面板,可提供有关患者血液中细胞的信息。科学家或实验室技术人员执行请求的测试并向请求的医疗专业人员提供CBC的结果。过去,通过在显微镜下观察用患者血液样本制备的载玻片,手动对患者血液中的细胞进行计数。今天,这个过程通常是通过使用自动分析仪来自动化

细胞复苏后全死了

冻存细胞复苏有很多死细胞,如果去除死细胞的话可以养一天倒掉培养液,贴壁的细胞是活的。在细胞复苏操作时,应注意融化冻存细胞速度要快,可不时摇动安瓿或冷冻管,使之尽快通过最易受损的温度段(-5~0℃)。这样复苏的冻存细胞存活率高,生长及形态良好。然而,由于冻存的细胞还受其他因素的影响,有时也会有部分细胞

在体动物的细胞外记录实验

实验方法原理细胞外记录(extracellular recording)是把引导电极放置在神经细胞或神经组织的表面或邻近部位,引导与记录有关的放电活动。由千神经细胞或组织发生兴奋性活动时,活动部位的神经元产生去极化,未活动的部位处于正常极化状态,在容积导体中两部位间的电位不同,电流从一点流向另外一点

在体动物的细胞外记录实验

基本方案             实验方法原理 细胞外记录(extracellular recording)是把引导电极放置在神经细胞或神经组织的表面或邻近部位,引导与记录有关的

在体动物的细胞外记录实验

实验方法原理 细胞外记录(extracellular recording)是把引导电极放置在神经细胞或神经组织的表面或邻近部位,引导与记录有关的放电活动。由千神经细胞或组织发生兴奋性活动时,活动部位的神经元产生去极化,未活动的部位处于正常极化状态,在容积导体中两部位间的电位不同,电流从一点流