液相系统压力过高问题解析
基本的实验条件:弱阳离子交换柱,缓冲液作为流动相(用了一天一夜) (对于离子交换,流动相通常为水相,而水相在使用过程当中,特别是当盐浓度不高,pH 又在中性附近,环境温度又像现在这样较高,流动相就很容易长菌,尽管 SOP可能规定能用 24h,哪怕肉眼看不见变浑浊,但是实际上所使用的透明流动相中早就布满了细菌。而相对于 5μm 的色谱柱来说,2μm 的筛板很容易堵塞,表现出来的就是柱压在缓慢上升) ;样品为生物制品。 仪器报红后: 1. 首先把仪器内的积水清理干净,然后查看每一针样品的柱压,发现柱压每一针压力都在上升;(在遇到诸如压力问题,出鬼峰或者与原方法测试结果不一致等问题的第一时间,并不是无规则的处理,不能一下手就主观判断仪器脏了,或者样品不合格了,首先要做的就是调查。而对于液相色谱来说,压力线是比较直观的评价是否出问题的一个重要参数) 2.重新接......阅读全文
HPLC异常峰峰、保留时间漂移、柱压过高等系列问题解析
高效液相色谱法按分离机制的不同分为液固吸附色谱法、液液分配色谱法(正相与反相)、离子交换色谱法、离子对色谱法及分子排阻色谱法,这些方法在使用的过程中往往会遇到诸如鬼峰、基线漂移、拖尾、分叉峰、保留时间漂移、柱压过高等系列问题,如何解决这些问题呢? 1.用HPLC进行分析时保留时间有时发生漂移,
温度过高对高效液相色谱柱的影响
温度过高对高效液相色谱柱的影响一般而言液相色谱仪的柱温设定是限制范围的,如果温度只是略高出样品规定的温度,比如在60度以下,那么对色谱柱并无影响,但可能对分析结果造成影响,因为部分检测器,比如示差折光检测器对温度是非常敏感的。 但如加热到100度以上,自然会对部分色谱柱填料产生影响,可能导致色谱柱
如何解决高效液相色谱柱柱压过高?
色谱柱类型可分为:通用分析柱、快速分析柱、凝胶色谱分析柱、蛋白质分析柱、氨基酸分析柱、保护柱、半制备/制备柱等。高效液相色谱仪开机或者更换色谱柱时,柱压过高是常出现的问题.高效液相色谱柱柱压过高的原因有两种:一.色谱柱本身的原因。主要表现在:长期使用受样品污染造成区域堵塞,而引起柱压过高.或者柱子在
液相色谱压力和流量不稳?
原因可能是气泡,需要排除;或者是单向阀内有异物,可卸下单向阀,浸入丙酮内超声清洗。有时可能是砂滤棒内有气泡,或被盐的微细晶粒或滋生的微生物部分堵塞,这时,可卸下砂滤棒浸入流动相内超声除气泡,或将砂滤棒浸入稀酸(如4mol/L硝酸)内迅速除去微生物,或将盐溶解,再立即清洗。压力为啥过高或过低?可能是是
高效液相色谱压力多少正常
正常压力不固定的,有高有低。同样是C18色谱柱,填料本身也有不同,比如pH适用范围不同,压力也不一样。例如250mm的长柱子,同等填料,150mm的短柱子压力就会小很多。而且填料也不一样。而且国内填装的柱子一般压力都高,国外的压力一般小一些,甚至不同厂家也不一样。色谱的流动相和固定相都是液体,样品分
液相出现倒峰原因解析
高效液相空白色谱柱出峰的原因? 高效液相色谱,色谱柱是Kromasil C18(15cm*5Um),流动相为10%乙腈和90%三氟乙酸水,走空白色谱柱时在整个保留时间的中间位置出现较大的色谱峰,走了好几针空白,每针的响应都不同,有的很高,有的又很低,但杂峰一直存在,不像是色谱柱里有杂质,用流动
液相色谱柱参数详细解析
本文主要介绍液相色谱柱参数,分为物理性质参数和化学性质参数。 一、液相色谱柱物理性质参数 1、柱长,内径 如250*4.6mm。一般柱长在2—250mm,柱越长,分离度越高,但柱压更高,分离所需时间更长;但分离度与理论塔板数的平方根成正比,所以一昧增加柱长并不是最有效的分离
液相色谱中反相系统换正相系统
例:反相换正相有些柱子只能用做反相就得换一根正相柱有些正反通用的柱子就不用了,改变流动相就可以了。在更换流动相过程中要冲柱
温度过高对高效液相色谱柱有什么影响
问题不明确,温度过高,是指多高,一般而言液相色谱仪的柱温设定是限制范围的,如果温度只是略高出样品规定的温度,比如在60度以下,那么对色谱柱并无影响,但可能对分析结果造成影响,因为部分检测器,比如示差折光检测器对温度是非常敏感的。但如加热到100度以上,自然会对部分色谱柱填料产生影响,可能导致色谱柱的
温度过高对高效液相色谱柱有什么影响
问题不明确,温度过高,是指多高,一般而言液相色谱仪的柱温设定是限制范围的,如果温度只是略高出样品规定的温度,比如在60度以下,那么对色谱柱并无影响,但可能对分析结果造成影响,因为部分检测器,比如示差折光检测器对温度是非常敏感的。但如加热到100度以上,自然会对部分色谱柱填料产生影响,可能导致色谱柱的
液质联用系统及液相色谱系统
液质联用系统及液相色谱系统是一种用于中医学与中药学领域的分析仪器,于2011年4月8日启用。 技术指标 液相:四元梯度泵 二极管阵列紫外检测器 质谱:三重四级杆。 主要功能 用于常量,微量,痕量的药物及其代谢物的精确质量测定,结构确证,及多肽,蛋白质,核苷酸,多糖等生物大分子聚合物的序列
冷水机蒸发压力过低和冷凝压力过高怎么处理?
冷水机蒸发压力过低原因: (1)冷水量不足。 (2)冷负荷少。 (3)节流孔板故障(仅使蒸发压力低)。 (4)蒸发器的传热管因水垢等污染而使传热恶化(仅使蒸发压力过低)。 (5)冷媒量不足(仅使蒸发压力过低)。 处理办法: (1)检查冷水回
高效液相色谱中,压力波动大
高效液相色谱中,压力波动大是什么原因?色谱柱塌陷或泵头处露液
液相压力不稳定的原因
一、管路里有气泡,建议由流动相多走些时间。或打开排空阀,用配件里的针筒多抽几下。二、输入单向阀失效所致,这也是经常遇见的。首先如何判断输入单向阀失效。判断步骤为:A.如果是双泵梯度分析系统,故泵压力不稳必然是其中一台泵压力不稳所致,须逐个分析。1.在不开UV检测器,工作站的前提下,将其中一台泵接上蒸
液相压力不稳定的原因
一、管路里有气泡,建议由流动相多走些时间。或打开排空阀,用配件里的针筒多抽几下。二、输入单向阀失效所致,这也是经常遇见的。首先如何判断输入单向阀失效。判断步骤为:A.如果是双泵梯度分析系统,故泵压力不稳必然是其中一台泵压力不稳所致,须逐个分析。1.在不开UV检测器,工作站的前提下,将其中一台泵接上蒸
液相压力不稳定的原因
一、管路里有气泡,建议由流动相多走些时间。或打开排空阀,用配件里的针筒多抽几下。二、输入单向阀失效所致,这也是经常遇见的。首先如何判断输入单向阀失效。判断步骤为:A.如果是双泵梯度分析系统,故泵压力不稳必然是其中一台泵压力不稳所致,须逐个分析。1.在不开UV检测器,工作站的前提下,将其中一台泵接上蒸
液相压力不稳定的原因
一、管路里有气泡,建议由流动相多走些时间。或打开排空阀,用配件里的针筒多抽几下。二、输入单向阀失效所致,这也是经常遇见的。首先如何判断输入单向阀失效。判断步骤为:A.如果是双泵梯度分析系统,故泵压力不稳必然是其中一台泵压力不稳所致,须逐个分析。1.在不开UV检测器,工作站的前提下,将其中一台泵接上蒸
液相压力不稳定的原因
一、管路里有气泡,建议由流动相多走些时间。或打开排空阀,用配件里的针筒多抽几下。二、输入单向阀失效所致,这也是经常遇见的。首先如何判断输入单向阀失效。判断步骤为:A.如果是双泵梯度分析系统,故泵压力不稳必然是其中一台泵压力不稳所致,须逐个分析。1.在不开UV检测器,工作站的前提下,将其中一台泵接上蒸
液相色谱压力偏高之故障排查
压力是液相色谱系统中非常重要的技术指标,我们在使用液相色谱的过程中,经常会遇到系统压力偏高,甚至出现超过系统最大耐压而报错的现象。出现这种现象通常的问题就是“堵”了,堵的位置可能是在线过滤器、保护住或色谱柱、进样器或检测器的流通池。如果堵了,需要先确定是保护柱或色谱柱堵了还是系统堵了,可以按照流
液相压力不稳定的原因
一、管路里有气泡,建议由流动相多走些时间。或打开排空阀,用配件里的针筒多抽几下。二、输入单向阀失效所致,这也是经常遇见的。首先如何判断输入单向阀失效。判断步骤为:A.如果是双泵梯度分析系统,故泵压力不稳必然是其中一台泵压力不稳所致,须逐个分析。1.在不开UV检测器,工作站的前提下,将其中一台泵接上蒸
液相色谱不接柱子压力多大
一般情况下应该无压力,或者0.1~0.3Mpa左右(mpa和PSI、bar等转换请自行查询),视流动相的粘度而不同。如果不接柱子还有压力,应该考虑色谱系统中有位置堵了。
液相色谱问题及解决
问:HPLC灵敏度不够的主要原因及解决办法答:1. 样品量不足,解决办法为增加样品量; 2. 样品未从柱子中流出。可根据样品的化学性质改变流动相或柱子; 3. 样品与检测器不匹配。根据样品化学性质调整波长或改换检测器; 4. 检测器衰减太多。调整衰减即可; 5. 检测器时间常数太大。解决办法
液相色谱负峰问题
如果用紫外检测器,负峰表明出峰的地方吸收值低于流动相,所以考虑两个方面:一是流动相吸收值大,很可能被污染了,二是质量不好的溶剂,尤其是甲醇,产生这种问题。如果做正相,要充分考虑流动相溶剂的截止波长。
液相色谱问题及解决
问:HPLC灵敏度不够的主要原因及解决办法答:1. 样品量不足,解决办法为增加样品量; 2. 样品未从柱子中流出。可根据样品的化学性质改变流动相或柱子; 3. 样品与检测器不匹配。根据样品化学性质调整波长或改换检测器; 4. 检测器衰减太多。调整衰减即可; 5. 检测器时间常数太大。解决办法
液相色谱柱使用问题
在液相色谱分析过程中,我们经常遇到的问题主要有二种,一种与液相色谱仪器本身因素有关,如液相色谱的阀门、混合器、检测器的光源以及其它的一些硬件设备。出现这类问题后,如果能找出问题根源,解决起来一般很简单,而且这类问题可以通过对仪器的精心维护来避免;而另一类问题则是分析方法本身造成的问题,如出现色谱峰形
流动相出现问题,液相色谱图出现的问题
液相色谱中的许多问题都能在谱图上反映出来,其中有一些问题可以通过改变设备参数得到解决;而其他的问题必须通过修改操作程序来解决。对于色谱柱和流动相的正确选择是得到好的色谱图的关键。而面对常常发现的HPLC 谱图异常的问题,如何做到真正解决问题,则需坚持这几个原则:一具体问题具体对待原则; 二先外设
液相色谱固定相分类解析
液相色谱固定相一般分为5种类型,这五种不同的固定相又将液相色谱分为各具特色的液相色谱。 1、正相色谱 八十年代初,人们使用的正相色谱固定相硅胶和吡啶硫氰酸镍盐的络合物晶体能与芳香族化合物形成包合物用于分离芳香族含氮异构体和胆甾醇晶体。已有人将焦炭吸附剂作为填料和键合硅胶作
液相色谱固定相分类解析
液相色谱固定相一般分为5种类型,这五种不同的固定相又将液相色谱分为各具特色的液相色谱。 1、正相色谱 八十年代初,人们使用的正相色谱固定相硅胶和吡啶硫氰酸镍盐的络合物晶体能与芳香族化合物形成包合物用于分离芳香族含氮异构体和胆甾醇晶体。已有人将焦炭吸附剂作为填料和键合硅胶作过比较并研究其
解析液相色谱高分辨串联质谱仪
液相色谱高分辨串联质谱仪(TripleTOFTM 5600 LC/MS/MS)是AB Sciex公司新近推出的分析仪器,它是世界上首台集准确质量数、高分辨率、高速扫描速度和高定量灵敏度等优点于一体的质谱系统平台。 主要用途: 功能: 1.高分辨质谱(MS); 2.EI
简析压力试验机之操作问题解析篇
压力试验机广泛运用于建筑行业,是建筑工程材料检验的主要设备,所以对于它的操作也有一定的注意事项。 压力试验机操作规程如下: 1、在压力试验机使用前必须进行检查,贮油罐内的油是否加满,油管接头是否松动,以防漏油。 2、根据试件要求,更换需要的弹簧,在小吨位时,使用小弹簧,以使读数