LCGC博客:探索用于HILIC分离的固定相

几年前我在一次会议上发言,正在描述我们使用混合模式色谱以及它帮助我们解决的难题。当我描述使用混合模式色谱柱时需要考虑(并优化)的变量的数量和类型时,听众中会有嚎叫,这些抱怨主要集中在复杂性以及这些方法如何稳定,而我们已经有足够的变量来考虑,我们不需要更多的选择性等等。 亲水相互作用液相色谱(HILIC)不仅涉及亲水分配,还涉及氢键,离子交换(分析物或固定相),更多离子交换(盐添加剂或固定相),离子(电荷)排斥和离子排斥(置换)机制。而且,根据所使用的固定相,分区可能不是主要的保留机制。 我的观点? HILIC不是直截了当的,可能存在一些需要考虑的方法。然而,当我最近在讲授我们关于使用各种不同的固定相的HILIC分离方面的工作时,没有人抱怨混合模式色谱法的复杂性。最新消息:HILIC至少在一些时候就是混合模式色谱分析! 我曾撰写了关于使用HILIC的一些实用技巧,我想扩展一些这些想法,尤其是在了解固定相的性质及其与分析物......阅读全文

固定相的选择

如果不确定要使用哪种固定相,可从DB-1或DB-5开始。气密性好的(ms)色谱柱通常惰性较强并且温度上限较高。使用极性与溶质极性类似的固定相。这一方法通常很有效,但使用这一方法并非始终能找到最佳固定相。如果被分离混合物具有不同的偶极或氢键力,请改为使用具有不同偶极或氢键作用力(不一定要更大)的固定相

什么是固定相?

在色谱法中,静止不动的一相(固体或液体)称为固定相(stationary phase) ;运动的一相(一般是气体或液体)称为流动相(mobile phase)。

流动相-固定相

流动相 ——色谱分离过程中携带组分向前移动的物质。固定相 ——色谱分离过程中不移动的具有吸附活性的固体或是涂渍在载体表面的液体。

反向色谱有哪些应用方面

现在,反相色谱的应用占到了所有液相应用的80%以上。为什么反相色谱会获得如此普遍的使用呢?一来是,反相色谱的使用更加简单和安全。流动相不再需要烃类等这些更危险的有机溶剂。二来是,液相和气相是互相补充的技术。有极性的,沸点高的化合物不适合用气相色谱仪GC分析,却很适合用反相液相色谱分析。极性的强弱是相

hilic色谱柱的分离机理主要包括什么

hilic色谱柱的分离机理主要包括以下三个方面:(1)分配机理(2)离子交换(3)偶极-偶极相互作用。 hilic色谱柱采用了极性改性的固定相,能够在其表面形成一层富水层,从而增强了对一些强极性化合物的保留能力,有效地克服了反相色谱柱对该类化合物保留能力差的缺点。与传统的反相色谱柱不同,hilic色

乳品中双氰胺检测的沃特世完整解决方案

  近日,新西兰牛奶及奶制品被检测出含有低含量的有毒物质双氰胺,新西兰政府已经下令禁售含有双氰氨的奶类产品。国内的奶制品生产企业和政府监管部门也已开始着手建立相应的分析方法。   双氰胺的检测方法主要难点在于:   前处理:三聚氰胺的方法完全不适用,双氰胺极性很大,一般的小柱无法保留;   L

实验室分析方法亲水作用色谱法概念介绍

亲水作用色谱法(HILIC hydrophilic interaction chromatog raphy)采用亲水性的固定相,疏水性较强的流动相的色谱方法。可以认为是采用一般正相色谱固定相与反相色谱流动相的色谱分离方法。

液相色谱填料技术丰富的选择性体现在哪些方面

液相色谱技术的广泛应用也得力于近年来各种色谱填料技术的发展为色谱分离提供了越来越多样的选择性。近年来人们制备了大量的含有不同键合基团的色谱填料以增强色谱柱的选择性,从而满足实际样品分离的需要,例如亲水作用色谱(HILIC)填料、立体保护键合色谱填料、极性嵌入反相色谱填料、有机-无机杂化色谱 填料、亲

液相色谱填料技术丰富的选择性体现在哪些方面

液相色谱技术的广泛应用也得力于近年来各种色谱填料技术的发展为色谱分离提供了越来越多样的选择性。近年来人们制备了大量的含有不同键合基团的色谱填料以增强色谱柱的选择性,从而满足实际样品分离的需要,例如亲水作用色谱(HILIC)填料、立体保护键合色谱填料、极性嵌入反相色谱填料、有机-无机杂化色谱 填料

HILIC色谱柱工作时的几则贴心提示

  一般情况下HILIC色谱柱应贮存在4℃-室温下,如果放置于0℃以下的环境里,柱内就会结冰,这也将导致柱效的降低。几天之内的短期放置,应先用溶剂冲洗好色谱柱(如凝胶柱则用蒸馏水来冲洗),再把色谱柱的两头用密封螺丝密封好即可。如果色谱柱长期不用,应使用色谱柱使用说明书中所指明的溶剂来充满色谱柱,再把

HILIC色谱柱工作时的几则贴心提示

一般情况下HILIC色谱柱应贮存在4℃-室温下,如果放置于0℃以下的环境里,柱内就会结冰,这也将导致柱效的降低。几天之内的短期放置,应先用溶剂冲洗好色谱柱(如凝胶柱则用蒸馏水来冲洗),再把色谱柱的两头用密封螺丝密封好即可。如果色谱柱长期不用,应使用色谱柱使用说明书中所指明的溶剂来充满色谱柱,再把色谱

HILIC色谱柱的清洗溶剂选择看过来!

 一般而言,HILIC色谱柱用淋洗液保存即可。若需要长时间保存,需要向柱内泵入3%硼酸溶液,然后取下柱子,用无孔接头将柱子两端堵死,放在通风干燥处保存。短时间不用,建议每周开机一次。  当色谱柱被玷污后,柱效会有所下降,保留时间缩小,分离度下降。清洗时,将色谱柱与抑制器分离,让废液直接排出流速不宜过

沃特世新品-XBridge-HILIC-液相色谱柱

用于解决强极性化合物的色谱分离难题 6月18日,马萨诸塞州米尔福德–沃特世公司宣布 (WAT:NYSE)XBridge™ 分析色谱柱系列,将增加一个新成员-XBridge HILIC色谱柱。此产品能够有效地提高极性化合物的保留,而如果用传统反相色谱柱,则极性化合物保留很弱。现在全球的用户都可以从沃

色谱固定相(固定液)

色谱固定相(固定液)色谱柱是色谱的心脏,样品的分离是在色谱柱上完成的。在色谱柱中不能移动而能起分离作用的物质称为固定相。固定相分两大类,一类是具有吸附性的多孔固体物质,也称为吸附剂;另一类是能起分离作用的液体物质称为固定液。固定液要涂渍在载体上常用的固体吸附固定相有吸附剂、高分子多孔小球和化学键合固

色谱固定相(固定液)

色谱固定相(固定液)色谱柱是色谱的心脏,样品的分离是在色谱柱上完成的。在色谱柱中不能移动而能起分离作用的物质称为固定相。固定相分两大类,一类是具有吸附性的多孔固体物质,也称为吸附剂;另一类是能起分离作用的液体物质称为固定液。固定液要涂渍在载体上常用的固体吸附固定相有吸附剂、高分子多孔小球和化学键合固

固定相基质及其性质

硅胶硅胶是HPLC填料中最普通的基质。硅胶除了具有良好的机械强度、容易控制的孔结构和比表面积、较好的化学稳定性和热稳定性以及专一的表面化学反应等优点外,还有一个突出的优点就是其表面含有丰富的硅羟基。氧化铝具有与硅胶相同的良好物理性质,也能耐较大的PH范围。它也是刚性的,不会在溶剂中收缩或膨胀,但与硅

色谱固定相(固定液)

色谱柱是色谱的心脏,样品的分离是在色谱柱上完成的。在色谱柱中不能移动而能起分离作用的物质称为固定相。固定相分两大类,一类是具有吸附性的多孔固体物质,也称为吸附剂;另一类是能起分离作用的液体物质称为固定液。固定液要涂渍在载体上。常用的固体吸附固定相有吸附剂、高分子多孔小球和化学键合固定相。吸附剂中有硅

液相色谱固定相

1.1 正相色谱 八十年代初,人们使用的正相色谱固定相硅胶和吡啶硫氰酸镍盐的络合物晶体能与芳香族化合物形成包合物用于分离芳香族含氮异构体和胆甾醇晶体。已有人[1]将焦炭吸附剂作为填料和键合硅胶作过比较并研究其热力学机理。具有离子化或非离子化功能团的大孔聚合物也开始应用于液相色谱,这些聚合物在

色谱固定相怎么选择

固定相的选择对样品的分离起着重要作用,有时甚至是决定性的作用。不同类型的色谱采用不同的固定相,如气-固色谱的固定相为各种具有吸附活性的固体吸附剂;气-液色谱的固定相是载体表面涂渍的固定液,液相色谱中的固定相为各种键合型的硅胶小球,离子交换色谱中的固定相为各种离子交换剂,排阻色谱中的固定相为各种不同类

血糖测定相关知识

 血糖测定是检查有无糖代谢紊乱的最基本和最重要的指标。   (一)样本:血浆或血清。   血糖测定一般可以测血浆、血清和全血葡萄糖。由于葡萄糖溶于自由水,而红细胞中所含的自由水较少,所以全血葡萄糖浓度比血浆或血清低10%~15%,且受红细胞比容影响。一般来说用血浆或血清测定结果更为可靠。除与标本的性

固体固定相分类

固定相是指直接装填到色谱柱中作为固定相的具有活性的多孔性固体物质。固体固定相大体可分为三类:第一类是吸附剂。如:分子筛、硅胶、活性炭、氧化铝等;第二类是高分子聚合物。如国内的GDX型高分子多孔微球,国外Porapak系列等;第三类是化学键合固定相。在气相色谱中,通常是将固定液涂敷在载体表面上。采用化

HILIC色谱柱跑出来的峰严重拖尾

出峰快结束的时候又出来一个不全的峰,对于这种情况,很有可能是你的柱子不干净,才用梯度洗脱法冲洗柱子。单元泵的话,用几个不同比例的流动相冲洗柱子,至基线稳定。色谱柱走出来的峰型拖尾很严重,这个有好几种原因:流动相的比例,如甲醇:水的比例不一样,出峰时间和拖尾程度不一样的,还有你的柱型是否和检测物质匹配

HILIC色谱柱跑出来的峰严重拖尾

出峰快结束的时候又出来一个不全的峰,对于这种情况,很有可能是你的柱子不干净,才用梯度洗脱法冲洗柱子。单元泵的话,用几个不同比例的流动相冲洗柱子,至基线稳定。色谱柱走出来的峰型拖尾很严重,这个有好几种原因:流动相的比例,如甲醇:水的比例不一样,出峰时间和拖尾程度不一样的,还有你的柱型是否和检测物质匹配

HILIC色谱柱跑出来的峰严重拖尾

出峰快结束的时候又出来一个不全的峰,对于这种情况,很有可能是你的柱子不干净,才用梯度洗脱法冲洗柱子。单元泵的话,用几个不同比例的流动相冲洗柱子,至基线稳定。色谱柱走出来的峰型拖尾很严重,这个有好几种原因:流动相的比例,如甲醇:水的比例不一样,出峰时间和拖尾程度不一样的,还有你的柱型是否和检测物质匹配

实验分析方法反相色谱的固定相全氟烷基键合固定相

近年来,有多家色谱公司制备了全氟代烷基键合硅胶色谱固定相。与传统烷基键合硅胶固定相比较,卤代化合物、芳香异构体和其他极性化合物的保留更强,洗脱顺序也发生了改变。与碳氢键相比,碳氟键的极性更强,在烷基固定相中引入氟会引起溶质-固定相作用的明显变化,使卤代化合物或其他极性化合物的保留更强,分离选择性也会

液相色谱(HPLC)入门(五)

正相高效液相色谱在植物提取物的分离过程中,茨维特成功运用极性固定相[玻璃柱中的粉笔末; 如图A]和弱极性[非极性]流动相。这种经典的色谱模式被称为正相。图 S -1: 正相色谱法图 S -1 代表三个染料混合物的正相色谱分离。极性的固定相最强地保留了极性的黄色染料。相对非极性的蓝色染料在非极

Inertsil-液相色谱柱检测益母草中的盐酸水苏碱

色谱条件与系统适用性试验 以丙基酰胺键合硅胶为填充剂,以乙腈-0.2%冰醋酸溶液(80:20)为流动相,用蒸发光散射检测器检测,理论板数按盐酸水苏碱峰计算不得低于6000。对照品溶液的制备取盐酸水苏碱对照品适量,精密称定,加70%乙醇制成每1ml含0.5mg的溶液,即得。供试品溶液的制备取本品粉末(

固相萃取反相固相萃取

反相固相萃取反相固相萃取所用的吸附剂和目标化合物通常是非极性的或极性较弱的,主要是靠非极性-非极性相互作用,是范德华力或色散力。

色谱固定相分类图表

全屏显示表格固定相组成极性类似品牌应用SE-30OV-1OV-101二甲基硅氧烷非极性DB-1、HP-1、CP-SiL 5CB、SPB-1、007-1…烃类、胺类、酚类、农药、挥发油、硫化物等SE-54SE-525%苯基,1%乙烯基甲基硅氧烷非极性DB-5、HP-5、SPB-5、BP-5…药物、芳烃

化学键合固定相

化学键合固定相 :化学键合固定相是利用化学反应将有机分子键合到载体表面上,形成均一、牢固的单分子薄层而构成各种性能的固定相。