实验技巧:流式细胞仪细胞周期结果分析

*张是未转染的第12代,第二章是转染后的第22代。*张图:增值率S(合成期)+G2/M(合成后期/分裂期):21.7%第二张图:增值率S(合成期)+G2/M(合成后期/分裂期):19.6%据此分析两者的增值没有明显的差别。虽然第二张图比*张图的S期有所增高,但G2期下降了。细胞周期是基于细胞处于不同分裂时期具有不同的DNA含量而分析细胞处于不同的时期的方法。确切的说结果中G1期的百分比实际上是G1+G0期细胞的百分比。 G2的百分比实际上是G2+M期细胞的百分比。图上zui高的峰代表了G1期(也称2倍体峰),后面的代表G2期、S期(也称4倍体峰)。1、细胞周期的概念细胞由一次分裂结束到下一次分裂结束,都要经历相同的变化阶段(即G1→S→G2→M )周而复始地进行活动,细胞的这种生长、分裂循环即称为细胞周期(cell cyc1e)。一个细胞周期包括有丝分裂期(M)和分裂间期(G1、S、G2)。尽管在各种细胞中各期所占时间都不尽相同......阅读全文

实验技巧:流式细胞仪细胞周期结果分析

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实验技巧:流式细胞仪细胞周期结果分析

张是未转染的第12代,第二章是转染后的第22代。*张图:增值率S(合成期)+G2/M(合成后期/分裂期):21.7%第二张图:增值率S(合成期)+G2/M(合成后期/分裂期):19.6%据此分析两者的增值没有明显的差别。虽然第二张图比*张图的S期有所增高,但G2期下降了。细胞周期是基于细胞处于不同分

流式细胞仪细胞周期结果分析

第一张是未转染的第12代,第二章是转染后的第22代。第一张图:增值率S(合成期)+G2/M(合成后期/分裂期 ):21.7%第二张图:增值率S(合成期)+G2/M(合成后期/分裂期):19.6%据此分析两者的增值没有明显的差别。虽然第二张图比第一张图的S期有所增高,但G2期下降了。细胞周期 是基于细

流式细胞仪细胞周期结果判断QA

请帮忙分析一下第一张是未转染的第12代,第二章是转染后的第22代。能说明转染后的细胞增值能力强了吗,怎么看出来的。据此分析两者的增值没有明显的差别。虽然第二张图比第一张图的S期有所增高,但G2期下降了。细胞周期是基于细胞处于不同分裂时期具有不同的DNA含量而分析细胞处于不同的时期的方法。确切的说结果

流式细胞周期结果怎么分析

细胞周期至少有两种做法,最常见的如下图分析:这个是BrdU和7-AAD方法检测细胞周期。红色的gate就是G1期,绿色的就是S期,橙色的就是G2/M期。BrdU, PI, 或者EdU方法和这个一样分析如果单用PI等DNA染料染色,需要专业软件来分析计算了。比如这个图,是DNA染料单染,其中粉色部分是

流式细胞仪测细胞周期图怎样分析

(1)细胞培养取对数生长期的细胞,按1X106个/mL以1mL体积接种于6孔板内。培养24h后,加入不同浓度样品。在37 ℃、5 % 的CO2恒温箱中培养24h后终止。(2)细胞固定胰酶消化并离心收集细胞(800rpm/min),弃上清,用预冷PBS洗细胞两次,加入预冷70%乙醇, -20℃固定保存

细胞周期测定实验——流式细胞仪测定法

实验方法原理流式细胞仪的工作原理是将待测细胞放入样品管中,在气体的压力下进入充满鞘液的流动室。在鞘液的约束下细胞排成单列由流动室的喷嘴喷出,形成细胞柱。通过对流动液体中排列成单列的细胞进行逐个检测,得到该细胞的光散射和荧光指标,分析出其体积、内部结构、DNA、RNA、蛋白质、抗原等物理及化学特征。 

哪些细胞周期蛋白可以用于细胞周期分析实验?

以下是一些常用于细胞周期分析实验的细胞周期蛋白:Cyclin D:在细胞周期的 G1 期发挥作用,其表达水平与 G1 期进程相关。Cyclin E:同样在 G1 期起作用,促进细胞从 G1 期向 S 期过渡。Cyclin A:在 S 期和 G2 期表达,对 DNA 合成和细胞进入 M 期有重要作用。

细胞周期分析实验中如何选择合适的细胞周期蛋白?

在细胞周期分析实验中选择合适的细胞周期蛋白,需要考虑以下几个因素:研究目的:明确您想要探究的细胞周期特定阶段或细胞周期调控的具体方面。例如,如果关注 G1 期到 S 期的转换,Cyclin D 和 Cyclin E 可能更合适;若重点是 G2 期到 M 期的进展,Cyclin B 则是较好的选择。细

通过流式细胞仪研究斑马鱼胚胎中细胞周期分析

[精华提要]结合绿色荧光蛋白表达的细胞周期分析广泛的用于研究绿色荧光蛋白标记的细胞的细胞周期分布。这个方案是一种用绿色荧光蛋白标记的斑马鱼胚胎来分析细胞周期的方法。材料与试剂1.        PBS(Invitrogen公司14040)2.        胎牛血清3.        乙醇4.   

流式细胞仪高级技巧(Purdue)

Introduction   A. CossarizzaWorkshop SponsorsMethods in analysis of apoptosis and cell necrosis.  Z. Darzynkiewicz Common methods for measuring apopto

流式细胞仪高级技巧(Purdue)

 Introduction   A. CossarizzaWorkshop SponsorsMethods in analysis of apoptosis and cell necrosis.   Z. DarzynkiewiczCommon methods for measuring apopt

杂交实验的实验结果分析

1.在倒置显微镜下观察异源融合。在培养3天以内,可根据双新原生质体的形态特征来鉴别异核体。因为来自叶肉组织的原生质体具有明显绿色叶绿粒,而来自培养细胞的原生质体无色,但具浓密原生质丝,并可看到显示的核区。2.统计异源融合的频率

细胞周期分析实验中同型对照抗体和特异性抗体的用量是如何影响实验结果

在细胞周期分析实验中,同型对照抗体和特异性抗体的用量会通过以下方式影响实验结果:用量不足:同型对照抗体:可能无法充分反映非特异性结合的背景水平,导致对实验中非特异性信号的低估,从而错误地认为特异性抗体产生的信号都是特异性结合的结果。特异性抗体:可能导致与目标抗原结合不充分,使得检测到的特异性信号强度

如何利用流式细胞仪检测细胞周期

     首先我们这边先来看下这样的问题:新消化获得的细胞直接染色立马上机检测,这一步是不是必须的?RnaseA的作用包不包括去处胞内的双链RNA?是的话,RnaseA能直接穿膜吗?不是的话,胞内的双链RNA不管了?阴参的设定是不是健康成人外周血的淋巴细胞就可以了?       根据这样的染色方法而

如何利用流式细胞仪检测细胞周期

   首先我们这边先来看下这样的问题:新消化获得的细胞直接染色立马上机检测,这一步是不是必须的?RnaseA的作用包不包括去处胞内的双链RNA?是的话,RnaseA能直接穿膜吗?不是的话,胞内的双链RNA不管了?阴参的设定是不是健康成人外周血的淋巴细胞就可以了?       根据这样的染色方法而定,

如何利用流式细胞仪检测细胞周期

首先我们这边先来看下这样的问题:新消化获得的细胞直接染色立马上机检测,这一步是不是必须的?RnaseA的作用包不包括去处胞内的双链RNA?是的话,RnaseA能直接穿膜吗?不是的话,胞内的双链RNA不管了?阴参的设定是不是健康成人外周血的淋巴细胞就可以了?       根据这样的染色方法而定,原理都

细胞周期蛋白在细胞周期分析实验中的作用是什么?

细胞周期蛋白在细胞周期分析实验中具有以下重要作用:作为细胞周期阶段的标志物:不同的细胞周期蛋白在细胞周期的特定阶段表达,其表达水平的变化可以指示细胞所处的周期阶段。例如,Cyclin D 在 G1 早期开始表达,Cyclin E 在 G1 晚期升高,Cyclin A 在 S 期和 G2 期表达增加,

流式细胞仪检测细胞凋亡结果该怎样分析

已经做完流式,看到结果却不知该怎样分析了。我用的是AnnexinV-FITC 凋亡试剂盒 ,AnnexinV/PI双染检测细胞凋亡。请教各位,凋亡散点图中第1,2,4象限到底分别代表什么细胞?手里的资料说法都不相同。试剂盒说明书:1代表细胞收集过程中机械性损伤的细胞,2 代表继发性坏死细胞,4代表凋

细胞周期分析技术的实验步骤是什么?

以下是以流式细胞术结合 DNA 染料(如碘化丙啶 PI)进行细胞周期分析为例的一般实验步骤:细胞收集:对于悬浮细胞,直接离心收集细胞。对于贴壁细胞,先用胰酶消化使其成为单细胞悬液,然后离心收集。细胞固定:将收集的细胞用预冷的 70%乙醇缓慢逐滴加入,边加边轻轻混匀,使细胞固定,通常在 -20°C 固

实验室分析操作技巧汇总!

 常见化学药品的贮存  硝酸固碘硝酸银,低温避光棕色瓶。  液溴氨水易挥发,阴凉保存要密封。  白磷存放需冷水,钾钠钙钡煤油中,  碱瓶需用橡皮塞,塑铅存放氟化氢。  易变质药放时短,易燃易爆避火源。  实验室中干燥剂,蜡封保存心坦然。  解释:  1.硝酸固碘硝酸银,低温避光棕色瓶:意思是说硝酸、

细胞周期测定实验

细胞计数法 BrdU渗入法 流式细胞仪测定法             实验方法原理 体外培养细胞 生长、分裂繁殖的能力,可用分裂指数来表示。它与生长曲线有一定的

细胞周期测定实验

细胞计数法 BrdU渗入法 流式细胞仪测定法             实验方法原理 体外培养细胞 生长、分裂繁殖的能力,可用分裂指数来表示。它与生长曲线有一定的

western-blot实验结果怎么分析

灰度扫描目标条带,与内参条带灰度值比较,进行标准化数据。根据比值绘制图表。IP=immunoprecipitation 免疫沉淀(富集样品或避免抗体同原材料中其他物质发生非特异反应)IB=immunoblotting 免疫印迹 (不一定是蛋白免疫印迹=Western blotting)

实验结果及分析怎么写

1、实验名称以及姓名学号:要用最简练的语言反映实验的内容。如验证某程序、定律、算法,可写成“验证什么”、“分析什么”等。2、实验日期和地点:比如2020年4月25日,物理实验室。3、实验目的:目的要明确,在理论上验证定理、公式、算法,并使实验者获得深刻和系统的理解,在实践上,掌握使用实验设备的技能技

细胞周期分析技术对实验设备有哪些要求?

细胞周期分析技术(如常见的流式细胞术)对实验设备通常有以下要求:流式细胞仪:这是关键设备,应具备稳定的激光光源(通常为氩离子激光或氦氖激光),以激发荧光染料。同时,需要有多个荧光检测通道,以检测不同波长的荧光信号。仪器的液流系统要稳定,能够保证细胞逐个通过检测区。离心机:用于细胞收集和洗涤过程中的离

进行细胞周期分析实验时,应该如何设置对照?

在进行细胞周期分析实验时,以下几种对照的设置是很重要的:空白对照:仅含染色缓冲液,不含细胞。用于检测背景荧光,以排除非特异性染色产生的信号。阴性对照:未处理的正常细胞。用于确定正常细胞周期的分布范围,作为比较基准。阳性对照:已知能够影响细胞周期的处理样本,如使用特定药物处理过的细胞,其细胞周期变化特

细胞周期分析技术对实验样本有哪些要求?

细胞周期分析技术对实验样本通常有以下要求:细胞数量:一般需要足够数量的细胞以获得具有统计学意义的结果。对于流式细胞术等方法,通常建议至少 10^5 - 10^6 个细胞。细胞活性:样本中的细胞应具有较高的活性,以确保细胞周期状态的准确性。死细胞或受损细胞可能会影响检测结果。细胞纯度:如果样本中存在大

如何看流式细胞周期结果图

流式细胞术在许多研究生课题中常用到,但对其结果的分析却不是很清楚。在此收集点相关资料并以实验中的一张图片为例,大家共同学习。图中白色箭头及尾部G1,G2,S是我用PS加上去的,方便讨论。流式细胞术分析细胞周期结果示图 首先来认识下图:1、纵坐标Cell Number:即计数到的有效细胞数;2、横坐标

如何看流式细胞周期结果图

流式细胞术在许多研究生课题中常用到,但对其结果的分析却不是很清楚。在此收集点相关资料并以实验中的一张图片为例,大家共同学习。图中白色箭头及尾部G1,G2,S是我用PS加上去的,方便讨论。流式细胞术分析细胞周期结果示图 首先来认识下图:1、纵坐标Cell Number:即计数到的有效细胞数;2、横坐标