细胞周期测定实验——流式细胞仪测定法

实验方法原理流式细胞仪的工作原理是将待测细胞放入样品管中,在气体的压力下进入充满鞘液的流动室。在鞘液的约束下细胞排成单列由流动室的喷嘴喷出,形成细胞柱。通过对流动液体中排列成单列的细胞进行逐个检测,得到该细胞的光散射和荧光指标,分析出其体积、内部结构、DNA、RNA、蛋白质、抗原等物理及化学特征。 细胞内的DNA含量随细胞周期进程发生周期性变化,如G0/G1期的DNA含量为2C,而G2期的DNA含量是4C。利用PI标记的方法,通过流式细胞仪对细胞内DNA的相对含量进行测定,可分析细胞周期各时相的百分比。实验材料HeLa细胞试剂、试剂盒乙醇RNase-APIPBS仪器、耗材流式细胞仪细胞培养设备离心机水浴冰箱注射器离心管封口膜微量移液器实验步骤一、取对数生长期细胞,倒去培养液,胰酶适度消化细胞,用培养液吹打,800 rpm,离心 15 min去上清。 二、PBS洗2次,加0.5 mL PBS吹匀,务必吹散。&n......阅读全文

细胞周期测定实验——流式细胞仪测定法

实验方法原理流式细胞仪的工作原理是将待测细胞放入样品管中,在气体的压力下进入充满鞘液的流动室。在鞘液的约束下细胞排成单列由流动室的喷嘴喷出,形成细胞柱。通过对流动液体中排列成单列的细胞进行逐个检测,得到该细胞的光散射和荧光指标,分析出其体积、内部结构、DNA、RNA、蛋白质、抗原等物理及化学特征。 

细胞周期测定实验

细胞计数法 BrdU渗入法 流式细胞仪测定法             实验方法原理 体外培养细胞 生长、分裂繁殖的能力,可用分裂指数来表示。它与生长曲线有一定的

细胞周期测定实验

细胞计数法 BrdU渗入法 流式细胞仪测定法             实验方法原理 体外培养细胞 生长、分裂繁殖的能力,可用分裂指数来表示。它与生长曲线有一定的

酶测定法实验

在本单元中,用一种较简单的方法测定它对核心 RNA 聚合酶自非特异性模板 poly(dAT) 起始转录的刺激作用。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。试剂、试剂盒核心 RNA 聚合酶纯σ32 标准品纯化的 σ32 样品核心 RNA 聚合酶-σ32 复合物样品[α-32P]UTP终止液

酶测定法实验

试剂、试剂盒 核心 RNA 聚合酶纯σ32 标准品纯化的 σ32 样品核心 RNA 聚合酶-σ32 复合物样品[α-32P]UTP终止液DEAE-纤维素(DE81) 纸片P04 清洗缓冲液乙醇反应液仪器、耗材 水浴锅实验步骤 材料与设备核心 RNA 聚合酶 (2.3 mg/ml)纯σ32 标准品 (

酶测定法实验

酶测定法实验             试剂、试剂盒 核心 RNA 聚合酶 纯σ32 标准品 纯化的 σ32 样品

细胞周期测定实验(一)

标签: 细胞周期 体外培养 周期测定细胞周期测定可以:(1)作为生物相容性评价指标;(2)用于研究细胞凋亡;(3)作为选择细胞的依据。实验方法细胞计数法BrdU渗入法流式细胞仪测定法实验方法原理流式细胞仪的工作原理是将待测细胞放入样品管中,在气体的压力下进入充满鞘液的流动室。在鞘液的约束下细胞排成单

细胞周期测定实验(二)

一、常见问题1.  Q:要做胃粘膜组织的DNA含量及倍体检查,但取材后要等几个星期才会做流式细胞术检查,请问:胃组织要怎样保存好呢?用低温保存,还是用乙醇固定?或者固定后再低温下保存? A:我做过乳腺细胞的DNA含量测定,取得组织以后,先处理成单细胞悬液,然后再加70%冰乙醇固定,要保证冰乙醇的最终

实验技巧:流式细胞仪细胞周期结果分析

张是未转染的第12代,第二章是转染后的第22代。*张图:增值率S(合成期)+G2/M(合成后期/分裂期):21.7%第二张图:增值率S(合成期)+G2/M(合成后期/分裂期):19.6%据此分析两者的增值没有明显的差别。虽然第二张图比*张图的S期有所增高,但G2期下降了。细胞周期是基于细胞处于不同分

实验技巧:流式细胞仪细胞周期结果分析

*张是未转染的第12代,第二章是转染后的第22代。*张图:增值率S(合成期)+G2/M(合成后期/分裂期):21.7%第二张图:增值率S(合成期)+G2/M(合成后期/分裂期):19.6%据此分析两者的增值没有明显的差别。虽然第二张图比*张图的S期有所增高,但G2期下降了。细胞周期是基于细胞处于不同

活体细胞线粒体肿胀流式细胞仪测定法

主要用途       我 公司血液硫化氢含量比色法定量检测试剂是一种旨在通过碱性苦味酸与肌酐反应,产生蓝色产物所呈现的吸光峰值的变化,即采用比色法来测定样品中硫化氢含量的而经典的技术方法。该技术经过精心改良亚甲基蓝方法、成功实验证明的。其适用于各种人体、动物血液(包括血清或血浆)样品等硫化氢水平检测

细胞周期测定实验——BrdU渗入法

实验方法原理细胞周期指细胞一个世代所经历的时间。从一次细胞分裂结束到下一次分裂结束为一个周期。细胞周期反应了细胞增殖速度。 单个细胞的周期测定可采用缩时摄影的方法,但它不能代表细胞群体的周期,故现多采用其他方法测群体周期。 BrdU(5-溴脱氧尿嘧啶核苷)加入培养基后,可做为细胞DNA复制的原料,经

细胞周期测定实验_细胞计数法

细胞周期测定可应用于:(1)作为生物相容性评价指标;(2)研究细胞凋亡;(3)作为选择细胞的依据。实验方法原理体外培养细胞 生长、分裂繁殖的能力,可用分裂指数来表示。它与生长曲线有一定的联系,如随着分裂指数的不断提高,细胞也就进入了指数生长期。 分裂指数指细胞 群体中分裂细胞 所占的百分比,它是测定

脲酶的测定实验——光度计测定法

实验方法原理实验材料脲酶试剂、试剂盒磷酸钾脲ADPNADHα-酮戊二酸谷氨酸脱氢酶脲酶仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 实验混合物0.02 ml 脲酶 25℃、340 nm 处吸收值降低,ε340=6.3×103 l/(mol·cm)。展开 注意事项其他试剂:

蛋白酶的测定实验——Anson-测定法

实验方法原理血红蛋白不是很贵,被用来做这个实验。由于处于天然结构的蛋白质通常可以抵制蛋白酶的攻击,因此首先用尿素使血红蛋白失活。分离非水解蛋白质后,利用 Folin-Ciocaheau 试剂的上清液测量消化产物。这种试剂优先识别色氨酸和酪氨酸,但是也可以识别半胱氨酸和组氨酸。'实验温度取决于

Fe(II)EDTA保护测定法实验

方案5.9 Fe(II)-EDTA保护测定法             实验方法原理 Fe(II)-EDTA 能够催化 RNA 或 DNA 的断裂,是 RNase 保护分析的一个补

Fe(II)EDTA保护测定法实验

实验方法原理 Fe(II)-EDTA 能够催化 RNA 或 DNA 的断裂,是 RNase 保护分析的一个补充方法,其优点是很少或没有碱基序列的特异性,其沿着整个长度的 RNA 或 DNA 链的剪切几乎是一致的,它可被用于解释一些 RNA 的较高级的折叠方式。试剂、试剂盒 RNA洗脱缓冲液退火缓冲液

Fe(II)EDTA保护测定法实验

Fe(II)-EDTA 能够催化 RNA 或 DNA 的断裂,是 RNase 保护分析的一个补充方法,其优点是很少或没有碱基序列的特异性,其沿着整个长度的 RNA 或 DNA 链的剪切几乎是一致的,它可被用于解释一些 RNA 的较高级的折叠方式。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编:郑晓飞。实验方

蛋白酶的测定实验——酪蛋白测定法

实验方法原理实验中的氨基酸由蛋白酶从酪蛋白中水解下来。在分离出 TCA 沉淀中未分解的蛋白质后,用分光光度测定的方法对其上清液分析,氨基酸来自于酪蛋白。依据酪蛋白校准曲线,已对其量化。这个鉴定不是很敏感。实验材料酶样品试剂、试剂盒Tris-HClNaOH乙酸三氯乙酸L-酪氨酸酪蛋白底物仪器、耗材分光

发光免疫测定法的实验目的

中文名称发光免疫测定英文名称luminescent immunoassay;LIA定  义以发光物质标记抗原或抗体,免疫反应后引发发光反应,根据发光强度对抗体或抗原进行的测定。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

维生素B2-(核黄素)-荧光测定法实验_荧光测定法1

实验方法原理核黄素能形成一种具有黄绿色荧光的黄色溶液。它在稀溶液中,440~500 nm波长下测定的荧光强度与核黄素的浓度成正比。根据其在还原后的荧光差数,可测定核黄素的含量。实验材料核黄素试剂、试剂盒高锰酸钾溶液 荧光红钠 硫代硫酸钠 冰醋酸仪器、耗材荧光分光光度计 玻璃器实验步骤溶液配制:1.

维生素B2-(核黄素)-荧光测定法实验_荧光测定法2

实验方法原理核黄素在pH 4~9 的条件下,用450 nm波长的光激发,可发出波长为520 nm的荧光。在核黄素的含量为0.1~10 μg范围内,荧光的强度,与核黄素浓度成正比,硫代硫酸钠可消除核黄素的荧光性。实验材料核黄素试剂、试剂盒荧光红钠 硫代硫酸钠 盐酸仪器、耗材荧光分光光度计 容量瓶实验步

流式细胞仪细胞周期结果分析

第一张是未转染的第12代,第二章是转染后的第22代。第一张图:增值率S(合成期)+G2/M(合成后期/分裂期 ):21.7%第二张图:增值率S(合成期)+G2/M(合成后期/分裂期):19.6%据此分析两者的增值没有明显的差别。虽然第二张图比第一张图的S期有所增高,但G2期下降了。细胞周期 是基于细

麻醉大鼠动脉血压的测定实验(直接测定法)

实验材料 大鼠试剂、试剂盒 氨基甲酸乙酯戊巴比妥钠普鲁卡因注射液肝素仪器、耗材 大鼠实验台聚乙烯医用塑料导管压力换能器多通道生理信号采集记录仪器实验步骤 (1)颈总动脉测量动脉血压:取体重为200~250g左右的大白鼠,用20%氨基甲酸乙酯注射液0.5ml/100g或者1.5%戊巴比妥钠注射液0.2

麻醉大鼠动脉血压的测定实验(直接测定法)

实验材料大鼠试剂、试剂盒氨基甲酸乙酯戊巴比妥钠普鲁卡因注射液肝素仪器、耗材大鼠实验台聚乙烯医用塑料导管压力换能器多通道生理信号采集记录仪器实验步骤(1)颈总动脉测量动脉血压:取体重为200~250g左右的大白鼠,用20%氨基甲酸乙酯注射液0.5ml/100g或者1.5%戊巴比妥钠注射液0.2ml/1

蛋白酶的测定实验——偶氮酪蛋白测定法

实验方法原理酪蛋白的敏感性鉴定可以通过这个实验得到很大程度的改善。含氮的基团与酪蛋白的共价键被蛋白水解时切断,用 TCA 上清液测定它们的颜色变化。实验材料蛋白酶溶液试剂、试剂盒磷酸钾偶氮酪蛋白(磺胺偶氮酪蛋白)三氯乙酸仪器、耗材分光光度计实验步骤0.5 ml 偶氮酪蛋白溶液0.2 ml 蛋白酶溶液

蛋白酶的测定实验——茚三酮测定法

实验方法原理茚三酮反应是一种灵敏度高的蛋白实验。游离的氨基酸可以被高敏感性检测出来。这个方法可以被用来继续蛋白质的酶降解。上述的酪蛋白降解在这个实验系统中用作蛋白酶反应。未水解的蛋白质被三氯乙酸沉淀下来,而茚三酮反应发生在上清液。实验材料蛋白酶溶液试剂、试剂盒Tris-HClNaOH乙酸三氯乙酸酪蛋

熔点测定法

依照待测物质的性质不同,测定法分为下列3种。各品种项下未注明时,均系指第一法。折叠第一法测定易粉碎的固体药品取供试品适量,研成细粉,除另有规定外,应按照各药品项下干燥失重的条件进行干燥。若该药品为不检查干燥失重、熔点范围低限在135℃以上、受热不分解的供试品,可采用105℃干燥;熔点在135℃以下或

余氯测定法

沉淀滴定法(氯离子的测定)1、所用试剂氯化钠标准溶液:(1毫升=1毫克Cl¯):取基准试剂或优级纯氯化3—4克至于瓷坩埚中,于高温炉升温至500℃灼烧10分钟,然后在干燥器内内冷却至室温;准确称取1.649克氯化钠,现用少量蒸馏水溶解,再用蒸馏水稀释至1000毫升。硝酸银标准溶液(1毫升=1毫克Cl

馏程测定法

馏程系指一种液体照下述方法蒸馏,校正到标准压力[101.3kPa(760mmHg)]下,自开始馏出第5滴算起,至供试品仅剩3~4ml或一定比例的容积馏出时的温度范围。某些液体药品具有一定的馏程,测定馏程可以区别或检查药品的纯杂程度。用国产19标准磨口蒸馏装置一套。A为蒸馏瓶;B为冷凝管,馏程在130