上海科技大学:一种膜蛋白相互作用的新研究技术
上海科技大学生命学院的研究人员发表了题为“A proximity-tagging system to identify membrane protein–protein interactions”的文章,通过改造原核生物中的蛋白质降解系统, 开发了一种新型的研究膜蛋白之间相互作用的分子工具(PUP-IT,pupylation-based interaction tagging)。这一研究成果公布在8月14日的Nature Methods杂志上,文章的通讯作者为上海科技大学庄敏教授和王皞鹏教授,第一作者为刘强和郑骏。蛋白质之间的相互作用在细胞间的信息交流、细胞内的信号转导等一系列......阅读全文
肌细胞内胆红素的代谢特点
肌细胞内胆红素结合障碍,胆色素的代谢特点(1)血清未结合胆红素增高(Grigler-Najiar二氏综合征Ⅰ型,UDP-葡萄糖醛酸基转移酶完全缺乏,血清未结合胆红素可高达25-45mg%),血清胆红素定性试验呈间接阳性反应。(2)尿内无胆红素。(3)由于结合胆红素生成减少,因此,尿(粪)胆素原从粪和
细胞内最突出的信号是什么?
胞浆钙离子震荡是细胞内最突出的信号。钙离子充当细胞内调节的第二信使。钙离子波等共同称作第二信使信。
细胞和细胞内含物的观察1
细胞质内含有多种细胞器。有些细胞器如线粒体、高尔基体、内质网、溶酶体等普遍存在于各种细胞中,而另有些细胞器如叶绿体,只存在于植物细胞中。细胞质内的这些结构,除叶绿体外,一般在光学显微镜下不易看见,必须经过一定的固定染色方法处理后,才能看到大多数细胞器,或直接用相差显微镜观察。线粒体线粒体是一种动态的
肝细胞内胆红素结合障碍的原因
肝细胞内胆红素结合障碍可见于下列原因:1.肝细胞受损害(如病毒性肝炎或药物中毒),使肝内葡萄糖醛酸生成减少或UDP-葡萄糖醛酸基转移酶受抑制。2.新生儿肝内UDP-葡萄糖醛酸基转移酶的生成不足(要在出生后10个月左右才渐趋完善)。而且母乳汁内的孕二醇,对UDP-葡萄糖醛酸基转移酶有抑制作用。3.克里
细胞和细胞内含物的观察2
(3)洋葱鳞片表皮细胞线粒体的活体染色:取一载玻片,在其中央加一滴0.5%詹纳斯绿染液。用镊子从洋葱鳞片的内表面撕下一小块表皮,放在载玻片上的染料中,并使其展开,染5—10分钟,用吸管吸取蒸馏水,滴于染色的载玻片上,使染液冲淡,最后使标本周围液体近于无色。此时,用镊子取一盖玻片,先将它的一边轻轻接触
细胞内受体的信号转导机理
脂溶性化学信号(如类固醇激素、甲状腺素、前列腺素、维生素A及其衍生物和维生素D及其衍生物等)的受体位于细胞浆或细胞核内。激素进入细胞后,有些可与其胞核内的受体相结合形成激素-受体复合物,有些则先与其在胞浆内的受体结合,然后以激素-受体复合物的形式进入核内。 这些受体均属于转录因子,并具有锌指结
关于细胞内物质外吐方式介绍
1.固有分泌(constitutive pathway of secretion) 是新合成的分子在高尔基复合体装入转运小泡,随即很快被带到质膜,并持续不断地被细胞分泌出去,它普遍存在于所有细胞内。"SNARE假说"认为在固有分泌中,V-SNARE与t-SNARE相互识别并结合形成7S复合物,这
羊水细胞内酶的分析方法有什么?
采用微时测定法测定羊水细胞中某种酶的活性,诊断胎儿是否有此种酶的异常。 方法是将羊水细胞放在铺有聚酯膜的塑料培养皿中培养8-14天,待细胞生长到1000-10000个时,迅速将长有细胞的培养皿冰冻干燥,然后在显微镜下将其切成含10-20个细胞的小片,在石蜡的保护下,将其与少量底物保温,当细胞和
人体细胞内分子活动过程
大鼠ELISA试剂盒白细胞是人体和动物血液及组织中的无色细胞,白细胞一般具有活跃的移动能力,它们可以从血管内移动到血管外。由于无法直接观察,所以通过这部动画片研究者和学生可以生动的看到白细胞的形态和运动。特别是动画展示了白细胞在吞噬异物时产生抗体的情形,这将有助于研究白细胞在机体损伤治愈、抗御病原的
iScience:细胞内囊泡运输新型调控机制
细胞内囊泡运输对于维持细胞以及机体的多种生理功能必不可少,2013年诺贝尔生理学或医学奖被授予发现囊泡转运机制的三位科学家。在真核细胞内,大约三分之一的蛋白质在内质网(ER)中折叠和修饰,然后被运送到高尔基体(Golgi)。 蛋白质从内质网到高尔基体的运输(ER-to-Golgi)过程是对蛋
羊水细胞内酶的分析方法有什么?
采用微时测定法测定羊水细胞中某种酶的活性,诊断胎儿是否有此种酶的异常。 方法是将羊水细胞放在铺有聚酯膜的塑料培养皿中培养8-14天,待细胞生长到1000-10000个时,迅速将长有细胞的培养皿冰冻干燥,然后在显微镜下将其切成含10-20个细胞的小片,在石蜡的保护下,将其与少量底物保温,当细胞和
G蛋白在细胞内信号传导途径
在细胞内信号传导途径中起着重要作用的GTP结合蛋白,由α,β,γ三个不同亚基组成。激素与激素受体结合并诱导GTP与G蛋白结合的GDP进行交换,活化的G蛋白可激活位于信号传导途径中下游的腺苷酸环化酶。G蛋白将细胞外的第一信使肾上腺素等激素和细胞内的腺苷酸环化酶催化的腺苷酸环化生成的第二信使cAMP联系
病毒在细胞内增殖方式的介绍
(1)病毒识别和侵入细胞①动物病毒的侵入a.细胞以主动“胞饮”的方式使病毒进入细胞,如腺病毒;b.某些有囊膜的病毒,通过其囊膜与细胞质膜融合的方式进入细胞。②噬菌体的侵入噬菌体仅将其核酸注入细胞,衣壳则留在细菌的细胞壁外。③植物病毒的侵入植物病毒难以穿越坚韧的细胞壁,常常借助于昆虫进食过程侵染植物细
细胞内cccDNA的抽提与纯化
最常用的抽提细胞内cccDNA的方法是蛋白质-去污剂沉淀法,其原理是基于rcDNA和cccDNA与蛋白质结合能力的差异。rcDNA能与蛋白质共价结合,与绝大多数细胞染色体DNA一起形成沉淀,而cccDNA不能与蛋白质结合故游离于上清中,用酚氯仿抽提上清即可得到cccDNA。根据笔者的经验,该方法的主
细胞内钙稳态调节的相关介绍
细胞内钙稳态调节 正常情况下,细胞内钙浓度为10-8-10-7mol/L,细胞外钙浓度为10-3-10-2mol/L。约44%细胞内钙存在于胞内钙库(线粒体和内质网),细胞内游离钙仅为细胞内钙的0.005%。上述电化学梯度的维持,取决于生物膜对钙的不自由通透性和转运系统的调节。 (1)Ca2+
信号分子在细胞内外的作用环境
细胞外在一定条件下,细胞外的化学信号能引发细胞的定向移动。这些信号有些时候是底质表面上一些难溶物质,有些时候则是可溶物质。信号分子有很多,可以是肽,代谢产物,细胞壁或是细胞膜的残片,信息分子的作用是与靶细胞的受体结合,改变受体的性质和作用,完成一系列的反应,去激活或抑制肌动蛋白结合蛋白的活性,最终改
流式细胞仪检测细胞内因子
实验步骤基本方案 细胞内因子的荧光标记材 料辅 助 方 案 I PM A 和 ionomyciii 激 活 T 细胞材 料辅 助 方 案 2 抗 原 活 化 T 细胞材 料辅 助 方 案 3 固定和 冻存 PBMC材 料辅 助 方 案 4 PBMC 的细胞表面标记材 料辅 助 方 案 5 用荧光标
防止细胞内错误的蛋白降解新技术
细胞中的蛋白酶体通过识别泛素标签来降解丧失功能的蛋白,以维持细胞稳态。错误的泛素标记会导致功能完整的蛋白被降解,从而诱发相关疾病,例如部分癌症和神经退行性疾病的发生归咎于这种原因。美国加州大学伯克利分校的研究团队开发出清除蛋白错误泛素化标记的新技术,相关成果在《Nature Chemical
细胞内疾病“守门员”作用方式厘清
ABC转运蛋白是一种广泛存在的整合膜蛋白,与人类疾病和药物密切相关,因而在临床上备受关注。据物理学家组织网近日报道,加拿大多伦多大学研究人员首次绘制出了这种蛋白的细胞“路线图”,揭示了它们与细胞中其他重要蛋白之间的相互作用。这一成果有助于人们进一步理解与疾病相关的蛋白质之间的互动机制,有望为癌症
我国专家揪出引发肠黏膜细胞内乱“首恶”
同济大学附属上海市第十人民医院消化疾病临床医学中心刘占举教授领衔的科研团队,探索炎症性肠病的致病机理,揪出了引发细胞内乱的“首恶”――白细胞介素-23,研究论文日前发表在最近一期的国际著名学术期刊《白细胞生物学杂志》上。专家认为,该研究为今后通过靶向阻断白细胞介素-23及相关蛋白来治疗炎症性肠病
微生物细胞内的酶的分类
根据酶的合成方式和存在时间, 微生物细胞内的酶可分为组成酶和诱导酶, 组成酶是细胞内一直存在的酶, 它的合成仅受遗传物质控制即受内因控制。不管是组成酶或是诱导酶都是受基因控制合成的, 如果微生物细胞内没有控制相关酶合成的基因, 这种酶就不会合成。
PNAS:癌细胞内部的权力斗争
一个典型的癌细胞,其整个基因组中散布着成千上万的突变,携带着成百上千的突变基因。然而,却只有极少的驱动基因会导致诸如失控性生长等癌变性状。癌症生物学家很大程度上忽视了其他的突变,认为它们对于癌症进程没有或是只有很小的影响。 然而来自麻省理工学院、哈佛大学等机构的研究人员在一项新研
细胞内药物浓度测定应该怎么做
⒈选择适当的细胞接种浓度。一般情况下,96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大,因此,在进行MTT试验前,要进行预实验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线,确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间,以保证培养终止致细胞过满。这样,才能保证MT
关于细胞内质网的发现过程介绍
内质网由KR.Porter等于1945年发现,他们在观察培养的小鼠成纤维细胞时,发现细胞质内部具有网状结构,建议叫做内质网(endoplasmic reticulum,ER),后来发现内质网不仅仅存在于细胞的“内质”部,通常还有质膜和核膜相连,与高尔基体关系密切,且常伴有许多线粒体。 内质网(
什么是细胞内抗体,作用是什么?
细胞内抗体是指在细胞内合成并作用于细胞内组分的抗体,也称内抗体。若在抗体基因的N端或C端加入引导序列就能使抗体表达定位在亚细胞部位,如胞浆、线粒体、内质网或细胞核部位。细胞内抗体可以提供一种其他方法不能做到的研究分子功能的方法。由于内抗体可抑制病毒复制和抑制生长因子受体或癌蛋白,因此有作为基因治
流式细胞仪检测细胞内因子
实验步骤基本方案 细胞内因子的荧光标记材 料辅 助 方 案 I PM A 和 ionomyciii 激 活 T 细胞材 料辅 助 方 案 2 抗 原 活 化 T 细胞材 料辅 助 方 案 3 固定和 冻存 PBMC材 料辅 助 方 案 4 PBMC 的细胞表面标记材 料辅 助 方 案 5 用荧光标
肝细胞内胆红素结合障碍的原因分析
肝细胞内胆红素结合障碍可见于下列原因: 1.肝细胞受损害(如病毒性肝炎或药物中毒),使肝内葡萄糖醛酸生成减少或UDP-葡萄糖醛酸基转移酶受抑制。 2.新生儿肝内UDP-葡萄糖醛酸基转移酶的生成不足(要在出生后10个月左右才渐趋完善)。而且母乳汁内的孕二醇,对UDP-葡萄糖醛酸基转移酶有抑制作
研究发现细胞内囊泡运输新型调控机制
细胞内囊泡运输对于维持细胞以及机体的多种生理功能必不可少,2013年诺贝尔生理学或医学奖被授予发现囊泡转运机制的三位科学家。在真核细胞内,大约三分之一的蛋白质在内质网(ER)中折叠和修饰,然后被运送到高尔基体(Golgi)。蛋白质从内质网到高尔基体的运输(ER-to-Golgi)过程是对蛋白质进
细胞内氧化还原状态改变的检测
这反应了细胞凋亡研究中相对较新的趋势,研究什么样的氧化还原环境引起下游事件的发生。CLONTECH公司的ApoAlertTM GlutathioneDetection Kit通过荧光染料monochlorobimane(MCB)体外检测凋亡细胞细胞质中谷光苷肽的减少来检测凋亡早期细胞内氧化还原状态的
人体细胞内发现新结构“网状粘连”
据美国每日科学网站22日报道,瑞典和英国科学家发现了人体细胞内的新结构——一种新型蛋白质复合物,细胞借助其附着于周围环境。研究证明,该结构在细胞分裂中起关键作用。 组织中的细胞被名为“细胞外基质”的网状结构所包围。为将自身附着到基质上,细胞表面有受体分子,它们控制细胞内部大蛋白质复合物的组装。