2018年诺贝尔化学奖：酶的定向进化技术与噬菌体技术
10月，2018年度诺贝尔化学奖揭晓。今年该奖项的获得者是美国科学家弗朗西丝·阿诺德（Frances H. Arnoid）、乔治·史密斯（George P. Smith）和英国科学家格雷戈里·温特（Sir Gregory P. Winter）。他们的获奖理由是在酶的定向演化以及用于多肽和抗体的噬菌体展示技术方面取得的成果。 Frances H. Arnoid从1993年起，进行了酶的第一次定向进化，这是一种催化化学反应蛋白质。她的方法经常用于开发新催化剂，用这种方法产生的酶，用途包括开发更环保的化学物质、药品以及为运输部门生产更环保的可再生燃料。 酶是由活细胞产生的、对其底物具有高度特异性和高度催化效能的蛋白质或RNA，因此是一类重要的生物催化剂。1993年Arnoid完成了首个酶的定向演化实验，也就是首次实现了她的理论，此后她不断完善这个方法，现在已能用于开发新的催化剂。基于Arnoid的研究成果，业界可以通过更环保的......阅读全文
2018年诺贝尔化学奖：酶的定向进化技术与噬菌体技术
10月，2018年度诺贝尔化学奖揭晓。今年该奖项的获得者是美国科学家弗朗西丝·阿诺德（Frances H. Arnoid）、乔治·史密斯（George P. Smith）和英国科学家格雷戈里·温特（Sir Gregory P. Winter）。他们的获奖理由是在酶的定向演化以及用于多肽和抗体的噬
λ－噬菌体末端酶的基本信息
中文名称λ 噬菌体末端酶英文名称λ phage terminase定 义λ噬菌体编码的末端酶。能识别结合λDNA连环体中的cos序列，结合后特异性地切割DNA形成12个碱基的黏性末端。此酶还有识别蛋白质衣壳前体和ATP酶的功能，水解ATP提供能量。将切割后所形成的酶-DNA二元复合体运送到蛋白质衣
λ－噬菌体末端酶的基本信息
中文名称λ 噬菌体末端酶英文名称λ phage terminase定 义λ噬菌体编码的末端酶。能识别结合λDNA连环体中的cos序列，结合后特异性地切割DNA形成12个碱基的黏性末端。此酶还有识别蛋白质衣壳前体和ATP酶的功能，水解ATP提供能量。将切割后所形成的酶-DNA二元复合体运送到蛋白质衣
诺贝尔奖得主Cell发布端粒酶重要发现
随着染色体绳索的复制，它的两端会遭到磨损。然而由于染色体的末端有着额外的细绳，磨损不会触及重要信息所在的绳索主体部分。这一额外的细绳被称作为“端粒”。随着时间的推移及经历多轮复制，这一端粒细绳会分解直至染色体丧失它的保护末端，这种“磨损”触及绳索，破坏染色体导致了细胞死亡。 这样当然好——最终
λ噬菌体载体DNA的碱性磷酸酶处理实验
λ 噬菌体两臂内部末端 5'-磷酸基团的去除，能有效防止自连和减少非重组噬菌体的背景。当使用含单一克隆位点的插入型载体（如 λgt10、λgt11 和 λORF8）或使用虽含多克隆位点但用单一酶切割的插入型载体（如 λgt18-23 和 λZAP) 时，本方法可被用于抑制非重组子背景。本实验
λ噬菌体载体DNA的碱性磷酸酶处理实验
实验方法原理 λ 噬菌体两臂内部末端 5'-磷酸基团的去除，能有效防止自连和减少非重组噬菌体的背景。当使用含单一克隆位点的插入型载体（如 λgt10、λgt11 和 λORF8）或使用虽含多克隆位点但用单一酶切割的插入型载体（如 λgt18-23 和 λZAP) 时，本方法可被用于抑
λ噬菌体载体DNA的碱性磷酸酶处理实验
实验方法原理 λ 噬菌体两臂内部末端 5'-磷酸基团的去除，能有效防止自连和减少非重组噬菌体的背景。当使用含单一克隆位点的插入型载体（如 λgt10、λgt11 和 λORF8）或使用虽含多克隆位点但用单一酶切割的插入型载体（如
λ噬菌体DNA(48502bp)的限制性内切酶酶切片段
没有的位点：NotI, SfiI,SpelAatI6个位点:12347,31481,33000,39995,40599,40617片段长度:19044,12436,7886,6995,1519,604,18AatII10个位点:5110,9399,11248,14979,29041,40811,41
美英科学家获2018年度诺贝尔化学奖
当地时间10月3日上午11时45分（北京时间10月3日下午5时45分）2018年度诺贝尔化学奖揭晓。今年该奖项的获得者是美国的弗朗西丝·阿诺德（Frances H. Arnoid）、美国的乔治·史密斯（George P. Smith）和英国的格雷戈里·温特（Sir Gregory P. Win
λ噬菌体的局限性λ噬菌体
实验方法原理 本实验以含原λ噬菌体和缺陷噬菌体λdg的双重溶原菌gal+作为供体,经紫外线诱导后,获取能转导半乳糖发酵基因的高频转导噬菌体裂解液,然后让这些转导噬菌体将gal+基因转移到受体菌gal-中去。实验材料 供体菌 : Escherichia coli K12 F2 gal + (带有原噬菌
sanger和他的DNA测序方法
sanger是英国生物化学家，1918年8月13日生于英格兰格洛斯特夏郡，在剑桥大学圣· 约翰学院获哲学博士学位，毕业后到著名的剑桥医学研究会分子生物学实验室工作。Sanger的工作主要研究蛋白质的结构，特别是研究测定胰鸟素分子的结构，成功地测定了胰鸟素的精细结构，因而获得了1958年的诺贝尔化
λ噬菌体DNA限制性内切酶图谱分析
实验方法原理 λDNA是线状双链DNA,EcoRⅠ在其上有5个切点,产生6个片段,通过琼脂糖凝胶电泳可将这几条片段分离开。如何重建这6个片段呢?可用两种限制性内切酶同时或先后作用于λDNA。例如λDNA经EcoRⅠ切割后在凝胶上分离开来的6条带可洗脱出来,然后分别将这6条片段用HindⅢ切割。结果表
λ噬菌体DNA限制性内切酶图谱分析
实验方法原理λDNA是线状双链DNA,EcoRⅠ在其上有5个切点,产生6个片段,通过琼脂糖凝胶电泳可将这几条片段分离开。如何重建这6个片段呢?可用两种限制性内切酶同时或先后作用于λDNA。例如λDNA经EcoRⅠ切割后在凝胶上分离开来的6条带可洗脱出来,然后分别将这6条片段用HindⅢ切割。结果表明
表达β半乳糖苷酶噬菌体的噬菌斑分析
材料：LB或NZCYM顶层琼脂或琼脂糖，含有X-gal对于3ml顶层琼脂，加40ul 2%X-gal。X-gal要在临用前才加入已冷却的顶层琼脂（47℃）中。大肠杆菌铺平板细菌只有不是β-半乳糖苷酶的过量表达株，可采用任何支持特异性λ噬菌体裂解生长的大肠杆菌。细菌染色体上单拷贝lacZ基因的存在不影
sanger和他的DNA测序方法
Sanger酶学法sanger是英国生物化学家，1918年8月13日生于英格兰格洛斯特夏郡，在剑桥大学圣· 约翰学院获哲学博士学位，毕业后到著名的剑桥医学研究会分子生物学实验室工作。Sanger的工作主要研究蛋白质的结构，特别是研究测定胰鸟素分子的结构，成功地测定了胰鸟素的精细结构，因而获得了195
解读2018诺贝尔化学奖成果：用进化的力量解决化学问题
地球的生命经过长期进化最终获得强大的适应力，散布于各种严酷环境，包括热温泉、深海以及沙漠等。如果能够借助进化的力量，我们在化工、医学等众多领域中遇到的难题也就迎刃而解。 美国科学家弗朗西丝·阿诺德、乔治·史密斯以及英国科学家格雷戈里·温特正是基于相同理念，在实验室模拟自然进化，通过不同途径释
用进化的力量解决化学问题——解读2018年诺贝尔化学奖成果
地球的生命经过长期进化最终获得强大的适应力，散布于各种严酷环境，包括热温泉、深海以及沙漠等。如果能够借助进化的力量，我们在化工、医学等众多领域中遇到的难题也就迎刃而解。 美国科学家弗朗西丝·阿诺德、乔治·史密斯以及英国科学家格雷戈里·温特正是基于相同理念，在实验室模拟自然进化，通过不同途径
Lambda噬菌体
· Lambda DNA Preparation (Stanford DNA Sequence & Technology Center)Detailed protocol for lambda DNA preparation with recipes· Isolati
通过噬菌体ELISA鉴定得到的噬菌体克隆
经过3～4轮的筛选后，应该能够富集到能与受体特异性结合的噬菌体群体。通常而言，在后几轮的筛选中，每次获得的噬菌体总量都会增加，但是单就这个现象并不一定能说明已经筛选到了受体特异性结合的肽段。能与靶分子非特异性结合或者能与筛选基质的噬菌体克隆也会造成这一现象。噬菌体ELISA可以说是最灵敏的鉴定所获取
基于进化的革命获2018年诺贝尔化学奖
将进化论引入实验室的3位科学家获得了2018年诺贝尔化学奖。 美国加州理工学院的弗朗西丝•阿诺德（Frances Arnold）因其在酶（一种催化特定化学反应的蛋白质）定向进化方面的研究获得了一半奖金。从她的研究中得到的酶使人们能够开发出新的方法来生产关键的药物和更环保的生产化工产品的工艺。
烈性噬菌体（virulent－phage）和温和噬菌体（temperate－phage）
噬菌体(bacteriaphage or phage)是病毒的一类，结构很简单，基本上由一个蛋白质外壳包裹着一些核酸组成的。噬菌体的多样性来自于组成其外壳的蛋白质的种类，以及其染色体的类型和结构的不同。（一）烈性噬菌体（ virulent phage）遗传学上应用最广泛的烈性噬菌体是大肠杆菌（ E.
噬菌体裂解酶对治疗龋齿等口腔疾病有显著效果
近日，中国科学院武汉病毒研究所研究员危宏平团队联合武汉大学口腔医院教授李宇红团队研究发现，噬菌体裂解酶能杀灭导致龋齿的细菌，而对常见的口腔共生菌无害，并通过大鼠龋齿模型实验证实能显着降低龋齿程度。 龋齿俗称蛀牙或虫牙，是牙齿被龋坏逐渐形成龋洞的口腔疾病，是导致脱牙的主要原因，包括龋齿在内的口腔
经双限制酶切割用作克隆载体的λ噬菌体DNA的制备实验
实验方法原理 置换型载体（如 λ2001、λDASH、EMBL 系列、Charon 34、Charon 35 和 Charon 40 ) 含有一系列的限制位点，它们在中央填充片段的两端以相反方向排列（Frischaufet al. 1983）。实验材料 噬菌体 T4 DNA 连接酶限制性内切核酸酶λ
经双限制酶切割用作克隆载体的λ噬菌体DNA的制备实验
实验方法原理 置换型载体（如 λ2001、λDASH、EMBL 系列、Charon 34、Charon 35 和 Charon 40 ) 含有一系列的限制位点，它们在中央填充片段的两端以相反方向排列（Frischaufet al. 1983）
用－T7－噬菌体－DNA－聚合酶进行双脱氧测序反应
试剂、试剂盒 去离子蒸馏水 二硫苏糖醇 dNTP 和 ddNTP 标记混合液和 ddNTP 延伸 终止混合液 甲酰胺上样缓冲液 测序酶稀释缓冲
噬菌体竟然可以保护自身基因组免受CRISPR核酸酶切割
细菌和感染它们的病毒正在进行一场与生命本身一样古老的分子军备竞赛。进化为细菌配备了一系列可靶向并破坏病毒DNA的免疫酶，包括CRISPR-Cas系统。但是，杀死细菌的病毒（也称为噬菌体）已设计出了它们自己的工具来帮助它们战胜这些最强大的细菌防御。 如今，在一项新的研究中，来自美国加州大学旧金山
噬菌体裂解酶对治疗龋齿等口腔疾病有显著效果
近日，中国科学院武汉病毒研究所研究员危宏平团队联合武汉大学口腔医院教授李宇红团队研究发现，噬菌体裂解酶能杀灭导致龋齿的细菌，而对常见的口腔共生菌无害，并通过大鼠龋齿模型实验证实能显著降低龋齿程度。 龋齿俗称蛀牙或虫牙，是牙齿被龋坏逐渐形成龋洞的口腔疾病，是导致脱牙的主要原因，包括龋齿在内的
经双限制酶切割用作克隆载体的λ噬菌体DNA的制备实验
置换型载体（如 λ2001、λDASH、EMBL 系列、Charon 34、Charon 35 和 Charon 40 ) 含有一系列的限制位点，它们在中央填充片段的两端以相反方向排列（Frischaufet al. 1983）。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理置换型载体
掌控进化：生命这样被改写
进化的力量通过生命的多样性得以展现。2018年诺贝尔化学奖被授予弗朗西丝·阿诺德、乔治·史密斯和格雷戈里·温特，理由是3人在掌控进化的方式及利用其为人类带来最大福祉方面作出了重要贡献。通过定向进化开发出来的酶如今被用于生产生物燃料、药物和其他事物。同时，利用一种被称为噬菌体展示技术的方法进化出来
噬菌体检查
病原体是许多疾病的主要诱因，对人类健康构成了严重威胁。近年来，食品、水源和环境中致病微生物已造成世界上许多流行病的爆发。因此，为了控制病原体的传播并减少流行病的发生，检测致病微生物的技术的成熟可行性显得尤为重要。 培养物细菌分离和鉴定是实验室检测病原体的“金标准”方法。该检测方法虽然足够灵敏，