色谱那些事(第三期):氨基柱的使用
“色谱那些事 ” 回顾:硅胶基质和聚合物基质色谱柱的保存,色谱柱对液相系统的要求本期内容:氨基柱的使用 氨基柱简介 氨基柱,全称氨丙基键合硅胶色谱柱,色谱柱家族中最灵活的色谱柱,不仅可以用于正反相还可以应用于离子交换(弱阴离子交换柱)中。 氨基柱的键合官能团氨丙基要比C18,C8柱的键合官能团更容易水解,特别是当你的使用条件是反相条件下时,要特别注意控制pH值范围,pH值越低越有发生水解的危险; 流动相中水的比例越高当然也越有发生水解的危险(建议水比例不超过40%)。 提示:在使用后以及准备长时间放置该柱时,必要的清洗和将氨基柱保存于纯的有机溶剂中是很好的保养措施。 氨基柱的活化 对于新氨基柱,首先应详细阅读使用说明书,了解柱子出厂保存溶剂。一般出厂会保存在正相溶剂中,如果保存溶剂与你将要使用的流动相极性不同不互溶,请先用异丙醇过渡。过渡过程中应注意异丙醇粘度较大,会导致柱压很高,应使用小流速过渡。 当使用反......阅读全文
苯基柱和C18的区别
C18和苯基柱都是反向柱子,但是C18和苯基柱相比,苯基柱会改变峰的出峰顺序。C18柱仅仅具有疏水作用,而苯基柱不仅具有疏水,还有拍拍作用,所以对于具有共轭体系的物质来说,会具有一定的选择性,出峰顺序会与C18柱不同
五氟苯基柱使用注意事项
例如五氟苯基柱。 为了应对越来越复杂的化合物分析,只用疏水性的色谱柱,已经不能满足分析的需要。
氨基柱使用需要注意的地方
氨基柱其固定相是以超纯全多孔球形硅胶为基质,通过采用独有的固定相键合技术,使用含有氨基丙基官能团的有机硅烷键合而成,能比硅胶柱更快达到平衡,对流动相的水含量没有硅胶柱敏感。适用于大多数正相色谱的应用,还可作为HILIC亲水作用色谱的固定相,可用于极性化合物的正相分析,弱阴离子交换以及含水的反相液相分
氨基柱做反相使用时的原理
氨基柱在含水量多的情况下是很不稳定的。也不宜在强酸的环境下使用。用的是缓冲液则先用水/乙腈清洗再用乙腈,.氨基住其本质属于正相柱,使用氨基柱除了采用正相系统作为流动相以外,一般还采用乙腈-水作为流动相,但是要求乙腈的含量不得低于80%,含水过多的流动相对氨基柱有损害,一般尽量不要用含水过多流动相。建
苯基柱和C18的区别
C18和苯基柱都是反向柱子,但是C18和苯基柱相比,苯基柱会改变峰的出峰顺序。C18柱仅仅具有疏水作用,而苯基柱不仅具有疏水,还有拍拍作用,所以对于具有共轭体系的物质来说,会具有一定的选择性,出峰顺序会与C18柱不同
苯基柱可以走高比例水相吗
不可以。苯基柱的使用属于正相色谱,反相色谱都可以使用,多用于含苯基的物质,属于专用柱子。其在用于正相色谱时,可用如正己烷等低极性流动相,使用高比例的水相反而会溶解,因此不能使用。苯基柱是由苯基和二氧化硅组成的,苯基和二氧化硅的分子结构都是平面的,苯基柱就是由苯基之间通过二氧化硅连接形成一种分子结构为
色谱那些事(第二期):色谱柱对液相系统的要求
“色谱那些事 ” 上期回顾:硅胶基质和聚合物基质色谱柱的保存本期内容:色谱柱对液相系统的要求 不同规格色谱柱的平衡时间 一般色谱柱的平衡时间取决于色谱柱的尺寸,通常在进入10-20倍柱体积,基线达到平稳后,柱子可达到平衡。 在下表总结了不同尺寸的色谱柱的平衡时间。 色谱柱对流动相 p
甲氨蝶呤原料药-甲氨蝶呤-高效液相色谱法
方法名称: 甲氨蝶呤原料药-甲氨蝶呤-高效液相色谱法应用范围: 本方法采用高效液相色谱法测定甲氨蝶呤原料药中甲氨蝶呤的含量。本方法适用于甲氨蝶呤原料药。方法原理: 供试品经流动相溶解并定量稀释,进入高效液相色谱仪进行色谱分离,用紫外吸收检测器,于波长302nm处检测甲氨蝶呤的峰面积,计算出其含量。试
实验室分析仪器液相色谱仪色谱柱常见问题八十三
氨基柱在进酸性样品时,很伤柱子,如使用一段时间后,柱效降低,峰形改变,如何恢复?答:氨基柱测酸性样品,应该是用氨基柱的 HILIC 模式。酸的存在可能会使略带负电荷的氨基官能团质子化,导致使用一段时间后对于某些类的分析物保留性质有所改变或表现在柱效下降。建议:用 5-10 倍的柱体积的含 0.5-1
氨基柱出峰时间延迟,什么原因
这个流动相酸性比较强。要特别注意控制pH值范围,pH值越低越有发生水解的危险,流动相中水的比例越高当然也越有发生水解的危险。最理想的pH范围在pH 3.0-7.0当使用氨基柱进行酸性物质的分析时,酸性物质的存在意味着质子的存在,可能会使略带负电荷的氨基官能团质子化,导致使用一段时间后对于某些类的分析
甲氨蝶呤高效液相色谱法测定
(R)-甲氨蝶呤照高效液相色谱法(通则0512)测定。供试品溶液:取本品,加流动相溶解并稀释制成每1mL中约含0.2mg的溶液。对照溶液:精密量取供试品溶液1mL,置100mL量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀。系统适用性溶液:取消旋甲氨蝶呤,加流动相溶解并稀释制成每1mL中约含40µg的溶液。色谱条
不同色谱柱的适用范围
1、C18柱C18色谱柱是最常用、每个实验室必备的通用型色谱柱。填料是硅胶基质上键合十八烷基,有较高的碳含量和较好的疏水性,适用于大多数化合物,包括非极性、极性小分子及一些多肽及蛋白质。随着每家色谱柱制造商的研发,C18柱的类型还在不断增加。适用pH范围由原来的2~8,发展到现在1~14,与纯水
简单介绍一下每种色谱柱的适用范围
1、C18柱C18色谱柱是最常用、每个实验室必备的通用型色谱柱。填料是硅胶基质上键合十八烷基,有较高的碳含量和较好的疏水性,适用于大多数化合物,包括非极性、极性小分子及一些多肽及蛋白质。随着每家色谱柱制造商的研发,C18柱的类型还在不断增加。适用pH范围由原来的2~8,发展到现在1~14,与纯水相的
Supelco推出Ascentis-Express-F5五氟苯基柱
Sigma-Aldrich旗下著名分析品牌Supelco 近日宣布推出基于熔融核®色谱填料技术的Ascentis® Express F5 五氟苯基柱。Supelco 早先推出的Discovery HS F5 五氟苯基柱,一直就深受广大分析工作者的喜爱。现在推出基于更高技术的Ascentis®
与色谱柱相关的问题汇总(五)
41.UPLC色谱柱可以反冲吗?HPLC的色谱柱可以简单反冲,但是,UPLC的色谱柱.也是一样的吗?如果压力偏高,该怎么办? 答:如果两端筛板孔径对称,UPLC柱应该也是可以反冲的。发现压力偏高,当然也可以用反冲清洗的方法维护,UPLC柱和普通色谱柱比,只是压力高一点,不应该有什么特殊吧
USP规定的液相色谱柱的编号看这里
C18是目前是最常用的填料。美国药典委员会(USP)为了不支持任何特定的高效液相色谱柱制造商,开发了一个可以描述新药申请提交时包含各种类型键合柱填料的通用的分类系统。该系统将液相色谱柱填料命名为“L”,气相色谱柱固定相命名为“G”,担体命名用“S”。因为大多数送审记录中使用的是C18,因此将C18命
C18色谱柱的柱体积是多少
250*4.6mm色谱柱柱体积为4.2ml,新色谱柱平衡至少用10倍体积的流动相,以1ml/min的流速需要平衡42min。色谱柱规格:填料:常见的C18、C8、氰基柱、苯基柱、氨基柱等等规格:这些数据通常写在一起。比如5um,4.6mm*250mm。其中5um是填料的孔径。4.6mm是柱子的内径,
C18色谱柱的柱体积是多少
250*4.6mm色谱柱柱体积为4.2ml,新色谱柱平衡至少用10倍体积的流动相,以1ml/min的流速需要平衡42min。色谱柱规格:填料:常见的C18、C8、氰基柱、苯基柱、氨基柱等等规格:这些数据通常写在一起。比如5um,4.6mm*250mm。其中5um是填料的孔径。4.6mm是柱子的内径,
C18色谱柱的柱体积是多少
250*4.6mm色谱柱柱体积为4.2ml,新色谱柱平衡至少用10倍体积的流动相,以1ml/min的流速需要平衡42min。色谱柱规格:填料:常见的C18、C8、氰基柱、苯基柱、氨基柱等等规格:这些数据通常写在一起。比如5um,4.6mm*250mm。其中5um是填料的孔径。4.6mm是柱子的内径,
C18色谱柱的柱体积是多少
250*4.6mm色谱柱柱体积为4.2ml,新色谱柱平衡至少用10倍体积的流动相,以1ml/min的流速需要平衡42min。色谱柱规格:填料:常见的C18、C8、氰基柱、苯基柱、氨基柱等等规格:这些数据通常写在一起。比如5um,4.6mm*250mm。其中5um是填料的孔径。4.6mm是柱子的内径,
C18色谱柱的柱体积是多少
250*4.6mm色谱柱柱体积为4.2ml,新色谱柱平衡至少用10倍体积的流动相,以1ml/min的流速需要平衡42min。色谱柱规格:填料:常见的C18、C8、氰基柱、苯基柱、氨基柱等等规格:这些数据通常写在一起。比如5um,4.6mm*250mm。其中5um是填料的孔径。4.6mm是柱子的内径,
色谱柱那么多,维护方式快拿走!
之前给大家介绍了聚合物基质色谱柱的使用维护和注意事项。本文给大家继续介绍非反相色谱柱的维护再生及使用注意事项。 液相色谱柱在使用过程中,难免会出现污染,损耗等问题,这时就需要对色谱柱进行必要的冲洗维护。从使用的键合相来看,液相色谱柱大体可分为反相柱和非反相柱。对于反相键合相,如C18、C8、苯
氨基柱在进酸性样品时伤柱子如何恢复?
氨基柱在进酸性样品时,很伤柱子,如使用一段时间后,柱效降低,峰形改变,如何恢复?用5-10倍的柱体积的含0.5-1.0%NH3的乙腈-水(50:50)溶液冲洗该柱(冲洗后当然要再用不含碱的流动相洗去多余氨),之后再进行分析这类酸性分析物时建议在流动相中略微添加少许氨如0.1%。
常用柱子问题解答
1、网上对柱子是否可以反冲一直有争论,那什么样的柱子可以反冲,什么不可以。反冲后是正者用,还是反着用。具体到各型号柱子不仅是ODS柱,其他如正向柱、氨基柱、离子交换柱等zui好都有解释。答:一般的正相反相柱应该都能反冲,只有两端筛板孔径不对称的柱子不能反冲,不过目前这样的柱子已经比较少见了。反冲是为
实验室分析仪器液相色谱仪亲水性色谱柱处理办法
一般同正相色谱柱,可参考氨基柱与氰基柱的处理方法;亦可根据色谱柱的可能污染情况,合理选择溶剂冲洗与再生。
与色谱柱相关的问题汇总(一)
色谱柱可分为填充柱和开管柱两大类。多为金属或玻璃制作。有直管形、盘管形、U形管等形状。液相色谱通常均采用填充柱。色谱柱的分离效果取决于所选择的固定相,以及色谱柱的制备和操作条件。 1.网上对柱子是否可以反冲一直有争论,那什么样的柱子可以反冲,什么不可以。反冲后是正者用,还是反着用。具体到
2.1×50mm,1.7um色谱柱的柱体积是多大
应该是150mm,柱长。150毫米色谱柱规格一般就是几个:填料。这个不用多说了,就是常见的C18、C8、氰基柱、苯基柱、氨基柱等等规格。这些数据通常写在一起。比如5um,4.6mm*250mm。其中5um是填料的孔径。4.6mm是柱子的内径,250mm是柱长。通常柱长就是50mm、100mm、150
常见的柱色谱和分离化学成分机理
液相柱1、C18、C8等反相柱。2、氨基柱、苯基柱、氰基柱、硅胶等正相柱3、手性柱。(大赛璐)4、离子柱(离子交换柱和离子分析柱)5、凝胶柱(体积排阻法SEC)6、亲和色谱柱。
常见的柱色谱和分离化学成分机理
液相柱1、C18、C8等反相柱。2、氨基柱、苯基柱、氰基柱、硅胶等正相柱3、手性柱。(大赛璐)4、离子柱(离子交换柱和离子分析柱)5、凝胶柱(体积排阻法SEC)6、亲和色谱柱。
实验室分析仪器液相色谱仪色谱柱常见问题六十
普通的 C18 柱能作为正相色谱柱使用吗?正相色谱体系中最常用也最普通的是那种色谱柱。正相柱在使用过程中与反向柱相比有什么需要注意的地方?答:普通 C18 柱作为正相柱使用,我还没听说过。正相色谱分离模式是指固定相的极性比流动相的极性大,反过来,流动相极性大就是反相。C18 固定相属于疏水性相对比较