简述核酸探针技术及其在微生物检测中的应用
随着分子生物学和分子化学的飞速发展,对病原微生物的鉴定已不再局限于对它的外部形态结构及生理特性等一般检验上,而是从分子生物学水平上研究生物大分子,特别是核酸结构及其组成部分。在此基础上建立的众多检测技术中,核酸探针(Nuclear acid probe)以其敏感、特异、简便、快速的特点成为世人瞩目的生物技术革命的新产物,已逐步应用于病原微生物的检测。 核酸探针是将已知核苷酸序列DNA pian段用同位素或其他方法标记,加入已变性的被检DNA中 ,在一定条件下即可与该样品中有同源序列的DNA区段形成杂交双链,从而达到鉴定样品中DNA的目的,这种能认识到特异性核苷酸序列有标记的单链DNA分子就称为核酸探针或基因探针。根据核酸探针中核苷酸成分的不同,可将其分为DNA探针或RNA探针,一般大多选用DNA探针;根据选用基因的不同分为两种,一种探针能同微生物中全部DNA分子中的一部分发生反应,它对某些菌属、菌种、菌株有特......阅读全文
核酸纯化怎样保存核酸
纯化后的核酸,最后多使用水或者低浓度缓冲液溶解;其中 RNA 以水为主,DNA 则多以弱碱性的 Tris 或者 TE 溶解。经典的 DNA 溶解方法多提倡使用 TE 溶解,认为 EDTA 可以减少 DNA 被可能残留下来的 DNase 降解的风险;如果操作过程控制得当,DNase 的残留几乎是可以忽
核酸纯化怎样保存核酸
纯化后的核酸,最后多使用水或者低浓度缓冲液溶解;其中 RNA 以水为主,DNA 则多以弱碱性的 Tris 或者 TE 溶解。经典的 DNA 溶解方法多提倡使用 TE 溶解,认为 EDTA 可以减少 DNA 被可能残留下来的 DNase 降解的风险;如果操作过程控制得当,DNase 的残留几乎是可以忽
核酸纯化怎样保存核酸
纯化后的核酸,最后多使用水或者低浓度缓冲液溶解;其中 RNA 以水为主,DNA 则多以弱碱性的 Tris 或者 TE 溶解。经典的 DNA 溶解方法多提倡使用 TE 溶解,认为 EDTA 可以减少 DNA 被可能残留下来的 DNase 降解的风险;如果操作过程控制得当,DNase 的残留几乎是可以忽
核酸纯化仪简介/核酸纯化仪
Nucleic Acid Extraction System是使用通用磁珠法提取核酸的高科技产品,具有自动化程度高,提取速度快,结果稳定,操作简便的优点。利用一般生化专用的96孔反应盘,可同时操作1-32个样品,可广泛应用于常规科研、基因组学、疾控系统、食品安全、法医等领域。使用本仪器只需加入样品与
核酸检测移动站核酸隔离采样室
什么是移动核酸采样隔离箱?国内xinguan病毒疫情已经渐渐好转,但是xinguan病毒对于我们的威胁远远没有过去,“无症状感染者”的出现,让危险难以预测。随着企业复工复业,各行各业渐渐恢复正轨,人们的生活也基本恢复正常,更多的人愿意参与核酸检测来确保安全,面对越来越多的检测需求,采样人员每天要穿着
取消常态化核酸后,核酸检测公司何去何从?
资本市场似乎早就精准地预判到了这个产业今天的结局。12月6日,北京调整了全市核酸检测查验措施,进入商超、商务楼宇及各类公共场所,可不查验核酸检测阴性证明。在此之前,上海、广州、深圳、重庆、成都等地也先后优化了核酸查验政策。随之而来的问题是——(1)在过去两年里乘上风口的核酸产业,未来还能否持续运营?
核酸与核酸类似物的区别
核酸类似物是与天然存在的RNA和DNA类似(结构相似)的化合物,用于医学和分子生物学研究。核酸类似物在组成核酸的核苷酸分子以及组成核苷酸的碱基、五碳糖和磷酸基团的分子间发生了改变 。通常,这些改变使得核酸类似物种的碱基配对和碱基堆积性质发生了改变。比如通用碱基可与所有四个经典碱基配对,又比如磷酸-糖
核酸纯化仪应用领域/核酸纯化仪
几乎在每个实验室,与生物分子相关的分离纯化工作都是十分重要,且必不可少的。但要对多个样品进行纯化还是相当困难的,不仅需要选择合适的纯化技术,而且工作量也特别大,很难满足当前飞速发展对高通量样品进行提取纯化的需求。TIANLONG NP968磁珠提取纯化系统是使用磁珠法技术,可同时操作1-32个样
核酸提取仪核酸提取仪种类、优势、特点
酸提取仪,是应用配套的核酸提取试剂来自动完成样本核酸的提取工作的仪器,核酸提取仪分为两类:一类是大型的自动化的,一般称为自动液体工作站;另一类是小型自动核酸提取仪,利用封装好的配套试剂自动完成提取纯化过程。大型自动液体工作站因为设备成本高昂,运行成本高,适合一次提取几千个同一种类标本,所以真正得
保护核酸采样人员安全移动核酸采样箱
随着企业复工复业,各行各业渐渐恢复正轨,人们的生活也基本恢复正常,更多的人愿意参与核酸检测来确保安全,面对越来越多的检测需求,采样人员每天要穿着厚重闷热的防护fu长时间工作,非常疲累。并且每次穿脱防护fu需要花费大量的时间和进行流程繁琐的消毒程序,极不方便。 为了更好的保护采样人员的安全和提
免费核酸无了?各地出台新核酸政策
2022年11月1日起,贵阳市常态化核酸检测有了新变化,除部分风险人员可进行免费核酸检测外,其他群众需按照“愿检尽检”原则,进行自费检测。除了贵州,四川、甘肃和广东等地也于近日宣布对常态化核酸检测进行收费。在四川,宜宾的南溪区、翠屏区、叙州区、三江新区、高县、屏山县和长宁县也于近日先后发布通告宣布核
核酸染色实验
实验方法原理 在一般情况下,通过盐酸水解后使 DNA 残基分解碱基,然后从碳键处打断糖苷键而游离出醛基,再与无色复红液(Schiff)进行反应,形成紫红色的复合物(DNA)。常用 Feuhgen-Rossenbeck 染色法(孚尔根染色法)。实验材料 石蜡组织切片试剂、试剂盒 Schiff 试剂染色
核酸的提取
要回答这个问题要确定你是在哪一步发现降解了。是在质粒提取后后,直接点样发现降解的话,可能是提取过程中大肠杆菌富含DNase,或是操作过程中碱裂解过长如果是在酶切过程中降解了,可能有盐离子污染导致特异性酶变成非特异性酶了,把质粒都降解了。如果是在保存一段时间发现降解了,可能是保存液不是TE或是质粒发生
核酸的定量
核酸的定量 核酸的定量是分光光度计使用频率最高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸,单链、双链DNA,以及RNA。核酸的最高吸收峰的吸收波长 260 nm。 每种核酸的分子构成不一,因此其换算系数不同。定量不同类型的核酸,事先要选择对应的系数。如:1OD 的吸光值分别相当于50μg/ml的d
核酸探针标记
实验概要核酸探针根据核酸的性质,可分为DNA和RNA探针;根据是否使用放射性标记物与否,可分为放射性标记探针和非放射性标记探针;根据是否存在互补链,可分为单链和双链探针;根据放射性标记物掺入情况,可分为均匀标记和末端标记探针。实验原理分子生物研究中,最常用的探针即为双链DNA探针,它广泛应用于转基因
核酸的定量
核酸的定量 核酸的定量是分光光度计使用频率最高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸,单链、双链DNA,以及RNA。核酸的最高吸收峰的吸收波长260nm。每种核酸的分子构成不一,因此其换算系数不同。定量不同类型的核酸,事先要选择对应的系数。如:1OD的吸光值分别相当于50μg/ml的dsDN
核酸提取仪
产品型号 核酸提取仪NP968 处理体积 20uL-1000uL 样品通量 1-32 磁珠回收效率 >95% 磁棒 32 加热温度 裂解加热温度:室温-120℃ 洗脱加热温度:室温-120℃ 振荡混合 多模式多档可调 磁珠大小 > 1um 试剂种类 磁珠法试剂 操作界面 中文
核酸纯化方法
核酸抽提与纯化是分子生物学试验的基础,核酸纯化方法是影响提取核酸质量高低的最重要因素,也是下游分子生物学试验成败的关键。目前常见的核酸纯化方法有PC 抽提/醇沉淀方法、高盐沉淀蛋白质/醇沉淀方法、离心柱法和生物磁珠法,这几种方法各有其优势和劣势。
核酸抽提
mRNA的分离 与rRNA和tRNA不同的是,哺乳动物细胞的绝大部分mRNA在其3'端均有一poly(A)尾,因此可以用oligo(dT)-纤维素亲和层析法从大量的细胞RNA中分离mRNAdmonds等,1971;At Leder,1972)。在构建cDNA文库时, 必须经上述纯化步骤制
核酸检测要求
检测新型冠状病毒特异序列的方法最常见的是荧光定量PCR(聚合酶链式反应)。因PCR反应模板仅为DNA,因此在进行PCR反应前,应将新型冠状病毒核酸(RNA)逆转录为DNA。在PCR反应体系中,包含一对特异性引物以及一个Taqman探针,该探针为一段特异性寡核苷酸序列,两端分别标记了报告荧光基团和淬灭
核酸质谱仪种类
核酸质谱仪种类有多种。1、按分析目的可分:化验室核酸质谱仪和工业核酸质谱仪。2、按质量分析器的时空属性可分:时间型核酸质谱仪和空间型核酸质谱仪。3、按结构可分:台式核酸质谱仪和落地式核酸质谱仪。4、按分辨率可分:低分辨核酸质谱仪和高分辨核酸质谱仪。5、按离子化方式可分:电子轰击电离核酸质谱仪、快原子
什么核酸复性?
变性DNA在适当条件下,可使两条分开的单链重新形成双螺旋DNA的过程称为复性(renaturation)。当热变性的DNA经缓慢冷却后复性称为退火(annealing)。DNA复性是非常复杂的过程,影响DNA复性速度的因素很多:DNA浓度高,复性快;DNA分子大复性慢;高温会使DNA变性,而温度过低
什么核酸杂交?
具有互补序列的不同来源的单链核酸分子,按碱基配对原则结合在一起称为核酸杂交(hybridization)。杂交可发生在DNA-DNA、RNA-RNA和DNA-RNA之间。杂交是分子生物学研究中常用的技术之一,利用它可以分析基因组织的结构,定位和基因表达等,常用的杂交方法有Southern印迹法,No
核酸检测原理
所有生物除朊病毒外都含有核酸,核酸包括脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA),新型冠状病毒是一种仅含有RNA的病毒,病毒中特异性RNA序列是区分该病毒与其它病原体的标志物。新型冠状病毒的核酸检测的取样方法既不需要开刀也不需要打针,只要轻轻一抹。到了发热门诊或者是相应的检查室,医生会让病人张开嘴,
核酸检测要求
检测新型冠状病毒特异序列的方法最常见的是荧光定量PCR(聚合酶链式反应)。因PCR反应模板仅为DNA,因此在进行PCR反应前,应将新型冠状病毒核酸(RNA)逆转录为DNA。在PCR反应体系中,包含一对特异性引物以及一个Taqman探针,该探针为一段特异性寡核苷酸序列,两端分别标记了报告荧光基团和淬灭
核酸检测精度
核酸检测是现代比较先进的一种检测方法,可以检测出大部分的病毒,当然很多的病毒不需要用到核酸检测,普通的检测就能够知道了,毕竟核酸检测相对成本会高一点的,核酸检测是有精度的,接下来我们来具体了解一下核酸检测精度吧。核酸检测精度为多少目前核酸检测是比较新型的检测手段,那么核酸检测精度为多少呢?核酸检测的
核酸免疫实验
介绍了用表达抗原的 DNA 增强免疫应答的途径。介绍了核酸免疫的两种方法:①注射含有 DNA 表达载体的生理盐水;② 用 基 因 枪 注 射 DNA。还包括了基因枪方法中使用的 DNA 包被金珠的制备和保存方法。实验步骤基 本 方 案 1 小 鼠 注 射 接 种DNA在免疫前应先阅读动物处理(附 录
什么核酸变性?
在一定理化因素作用下,核酸双螺旋等空间结构中碱基之间的氢键断裂,变成单链的现象称为变性(denaturation)。引起核酸变性的常见理化因素有加热、酸、碱、尿素和甲酰胺等。在变性过程中,核酸的空间构象被破坏,理化性质发生改变。由于双螺旋分子内部的碱基暴露,其A260值会大大增加。A260值的增加与
什么是核酸
核酸是在科学家们研究细胞核时被发现的,也就是说,核酸是从细胞核里提取出来的一种酸性物质,所以称之为核酸。核酸有两大类:一种是脱氧核糖核酸,简称DNA;一种是核糖核酸,简称RNA。我们通常意义下的核酸,就是指DNA,它在细胞里含量极少,如果要提出它,比沙里淘金还难。一个鸡蛋里DNA的含量占鸡蛋总量的2
核酸抽提
最糟糕的心态 - 实验失败了,抱怨试剂不好。实验人员本来是应该拥有修正主义、机会主义、怀疑论等诸多“不完美的”意识,所以一定要用“完美的”自我批评意识来平衡。我为什么没有一双慧眼选择可靠的供应商?我为什么不做预实验检测所购试剂?最糟糕的知识 - RNase A 的作用。RNase A 是内切酶,内切