基因活性的同位素分析实验——原位裂解细胞的CAT分析法
实验材料转染细胞试剂、试剂盒Triton裂解液仪器、耗材培养皿培养箱实验步骤1. 60 mm 培养皿中转染了CAT表达质粒的细胞,用2 ml PBS洗1次。每培养皿加入2 ml 低渗缓冲液,在室温下温育2~5 min。2. 吸去低渗缓冲液,加入400 μl Triton裂解液。用橡胶刮子将细胞刮离培养血,用1 000 μl 移液器将裂解物移入1.5 ml 微量离心管中。3. 微量离心1 min 除去细胞核,不可溶性蛋白。将上清转入一个干净的微量离心管中, 进行CAT活性分析。 ......阅读全文
荧光免疫分析法
荧光免疫分析法是将免疫学反应的特异性和荧光技术的敏感性结合起来的一种方法。荧光免疫分析在医学的基础研究及临床诊断中占有重要地位,而性能优良的标记探针的开发则是发展这一技术的决定性因素。近年来,半导体荧光纳米晶由于其特殊的物理、化学性质,吸引了人们的广泛关注,并已作为新一代荧光标记物开始被广泛应用
免疫分析法简介
免疫分析法是利用毒物 与标记毒物竞争性结合抗体检测毒物的方 法.可用于某些毒药物的筛选试验。利用免 疫分析法进行检测,当没有加入非标记毒药 物时,抗体完全与标记毒药物结合生成标记 毒药物-抗体复合物。加入非标记毒药物后, 非标记毒药物也将与抗体结合,生成非标记 毒药物_抗体复合物,从而抑制标记毒药物
波谱分析法
通常所说的四大名谱:紫外:四个吸收带,产生、波长范围、吸光系数 。红外:特征峰,吸收峰影响因素、不同化合物图谱联系与区别 。核磁:N+1率,化学位移影响因素,各类化合物化学位移 。质谱:特征离子、重排、各化合物质谱特点(如:有无分子离子峰等)。波谱分析的特点四种波谱分析的特定功能如下:
滴定分析法简介
滴定分析法,是化学分析法的一种,将一种已知其准确浓度的试剂溶液(称为标准溶液)滴加到被测物质的溶液中,直到化学反应完全时为止,然后根据所用试剂溶液的浓度和体积可以求得被测组分的含量,这种方法称为滴定分析法(或称容量分析法)。
免疫分析法相关
电泳技术 基本原理:免疫扩散与电泳技术相结合。 类型:对流免疫电泳、火箭免疫电泳、免疫电泳、双向免疫电泳(交叉免疫电泳) 对流免疫电泳 基本原理:多数蛋白质抗原在碱性缓冲液中带负电荷,在电泳时从负极向正极移动。抗体在碱性缓冲液只带微弱的负电 荷,且相对分子质量较大,电泳力较小,在琼脂电渗
质谱分析法
质谱分析法是通过对被测样品离子的质荷比的测定来进行分析的一种分析方法。被分析的样品首先要离子化,然后利用不同离子在电场或磁场的运动行为的不同,把离子按质荷比(m/z)分开而得到质谱,通过样品的质谱和相关信息,可以得到样品的定性定量结果。 从J.J. Thomson制成第一台质谱仪,到现在已有近9
瞬时转染分析法
摘要: 介绍5种瞬时转染分析法:瞬时转染分析法、稳定转染分析法、体外转录分析法、转基因分析法和同源重组分析法. 1.瞬时转染分析法 目前有很多功能性分析方法用于研究转录调控,最常用的方法是瞬时转染分析法.该方法是通过一定的转染程序将含目的调控区
质谱分析法
质谱仪种类非常多,工作原理和应用范围也有很大的不同。从应用角度,质谱仪可以分为下面几类:有机质谱仪:由于应用特点不同又分为:①气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)在这类仪器中,由于质谱仪工作原理不同,又有气相色谱-四极质谱仪,气相色谱 质谱-飞行时间质谱仪,气相色谱-离子阱质谱仪等。②液相色谱-质谱联
质谱分析法
用高速电子束的撞击等不同方式使试样分子成为气态带正电离子,其中有分子离子M+和各种分子碎片阳离子。在高压电场(电压为V)加速下,质量m的带正电粒子在磁感应强度为B的磁场中作垂直于磁场方向的圆周运动,其运动半径r与粒子的质荷比(m/e)有如下关系:显然质荷比大小不同的正离子将按不同的曲率半径依次分散成
质谱分析法
质谱仪种类非常多,工作原理和应用范围也有很大的不同。从应用角度,质谱仪可以分为下面几类:有机质谱仪:由于应用特点不同又分为:① 气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)在这类仪器中,由于质谱仪工作原理不同,又有气相色谱-四极质谱仪,气相色谱 质谱书籍-飞行时间质谱仪,气相色谱-离子阱质谱仪等。② 液相色谱
库伦分析法介绍
库仑分析法创立于1940年左右,其理论基础就是法拉第电解定律。库仑分析法是对试样溶液进行电解,但它不需要称量电极上析出物的质量,而是通过测量电解过程中所消耗的电量,由法拉第电解定律计算出分析结果。为此,在库仑分析中,必须保证:电极反应专一,电流效率100%,否则,不能应用此定律。以测量电解过程中
质谱分析法
用高速电子束的撞击等不同方式使试样分子成为气态带正电离子,其中有分子离子M+和各种分子碎片阳离子。在高压电场(电压为V)加速下,质量m的带正电粒子在磁感应强度为B的磁场中作垂直于磁场方向的圆周运动,其运动半径r与粒子的质荷比(m/e)有如下关系: 显然质荷比大小不同的正离子将按不同的曲率半径依次分散
滴定分析法概论
滴定分析法和滴定方式 1.化学计量点、滴定终点、滴定误差(TE)的概念要知道 滴定误差(TE):取决于滴定反应的完全程度和指示剂的选择是否恰当。 滴定曲线的特点:(1)曲线的起点取决于被滴定物质的性质或浓度,一般被滴定物质的浓度越高,滴定曲线起点越低(2)滴定开始时,曲线平缓;至化学计量点
滴定分析法分类
滴定分析方法可根据化学反应、滴定剂来源、终点指示信号、滴定剂加入过程等进行分类。滴定分析方法可根据化学反应的不同,可分为酸碱滴定、沉淀滴定、络合滴定和氧化还原滴定,具体介绍如下: 酸碱滴定法:用已知浓度的酸(或碱)来滴定未知浓度的碱(或酸)的方法,可用于测定酸、碱和两性物质,是一种利用酸碱反应进行容
极谱分析法
极谱法的基本装置如图1所示,发生电解的为滴汞电极,此电极的上端为一贮汞瓶,瓶中的汞通过塑料管进入毛细管(内径约0.05mm),然后有规则地滴入电解池的溶液中,使滴汞电极表面不断更新,以获得良好的重现性和准确度。另一电极多用饱和甘汞电极(SCE),偶用Ag-AgCl电极。由直流电源B、可变电阻R和滑线
常见滴定分析法
1、酸碱滴定法 滴定分析法中,酸碱滴定最基本。 中心问题:“酸碱平衡”,本质是酸碱之间的质子传递。 2、配位滴定法 主要是:EDTA的结构、性质、配位平衡、稳定常数、滴定曲线、指示剂的选择及消除干扰的方法。 重点:配位平衡。在配位滴定中, 除主反应外, 还有各种副反应干扰主反应的进行,
质谱分析法
原理使试样中各组分电离生成不同荷质比的离子,经加速电场的作用,进入质量分析器,通过电磁场按不同m/e的变化,分子离子及碎片离子的质量数及其相对峰度,提供分子量,元素组成及结构的信息。主要特点:(1)质量测定范围广泛;(2)分辨高;(3)绝对灵敏度,可检测的最小样品量。
利用CAT技术测定聚四氟乙烯涂层与基材的粘结强度
自从1938年被偶然发现以来,聚四氟乙烯(以下简称PTFE)因其独特的材料特性而得到广泛应用。它具有很高的化学抗性,可以在很大的温度范围内使用,不易燃,具有良好的滑动性能即低摩擦系数,等等。除了航空航天、计算机等行业外,PTFE还广泛的用于密封,绝缘体,服装,工业过滤(阻止特殊物质),以及可见的
DNA酶I足迹分析法实验——NA酶I足迹分析法
本分析方法用来检测DNA上特异的蛋白质结合位点。位点上结合的蛋白质可保护 D N A 的 磷 酸 二 酯 键 骨 架 免 于 受 D N A 酶 I 催 化 的 水 解 。 水 解 后 D N A 片 段 在 变 性DNA测序胶上分离,通过放射自显影可使结合位点显示出来。足迹法已进一步发展成为确定D
什么是荧光分析法(发射光谱分析法)?
利用荧光强度进行分析的方法,称为荧光法。在荧光分析中,待测物质分子成为激发态时所吸收的光称为激发光,处于激发态的分子回到基态时所产生的荧光称为发射光。荧光分析法测定的是受光激发后所发射的荧光强弱。
光谱分析法和色谱分析法的区别
(1)分析速度较快 原子发射光谱用于炼钢炉前的分析,可在l~2分钟内,同时给出二十多种元素的分析结果。(2)操作简便 有些样品不经任何化学处理,即可直接进行光谱分析,采用计算机技术,有时只需按一下键盘即可自动进行分析、数据处理和打印出分析结果。在毒剂报警、大气污染检测等方面,采用分子光谱法遥测,不需
电解分析法的概念
是根据基于溶液中某种离子和其指示电极组成的电解池的电解原理建立的分析方法。电重量法是通过对试样溶液进行电解,使被测组分析出并测量其重量的分析方法;库仑法是根据待测物质完全电解时所消耗的电量而进行分析的方法;库仑滴定法是以作为滴定剂的电极反应生成物与溶液中待测组分起作用,根据滴定终点消耗的电量来确定带
差热分析法的原理
差热分析法是以某种在一定实验温度下不发生任何化学反应和物理变化的稳定物质(参比物)与等量的未知物在相同环境中等速变温的情况下相比较,未知物的任何化学和物理上的变化,与和它处于同一环境中的标准物的温度相比较,都要出现暂时的增高或降低。降低表现为吸热反应,增高表现为放热反应。
荧光分析法的概念
荧光分析法是指利用某些物质被紫外光照射后处于激发态,激发态分子经历一个碰撞及发射的去激发过程所发生的能反映出该物质特性的荧光,可以进行定性或定量分析的方法。由于有些物质本身不发射荧光(或荧光很弱),这就需要把不发射荧光的物质转化成能发射荧光的物质。例如用某些试剂(如荧光染料),使其与不发射荧光的物质
色谱分析法
色谱分析法 : 色谱法是一种分离分析方法。它利用样品中各组分与流动相和固定相的作用力不同(吸附、分配、交换等性能上的差异),先将它们分离,后按一定顺序检测各组分及其含量的方法。
滴定分析法的优点
1、操作简单; 2、对仪器要求不高; 3、有足够高的准确度误差不高于0.2%; 4、方便,快捷; 5、便于普及与推广。
滴定分析法的简介
1、滴定分析用的仪器,主要是指具有准确体积的滴定管、容量瓶和移液管。 2、滴定管(流出仪器),其规格有25、50ml;移液管(流出仪器),其规格有2、5、10、25、50ml,刻度移液管其规格有0.1~25ml;常用容量瓶其规格有10、25、100、250、500、1000ml。 3、都需要
发光酶免疫分析法
从标记免疫分析角度, 化学发光酶免疫分析( chem ilum inescen t enzym e imm unoassay,CL E IA ) , 应属酶免疫分析, 只是酶反应的底物是发光剂,操作步骤与酶免分析完全相同[ 5 ]: 以酶标记生物活性物质(如酶标记的抗原或抗体) 进行免疫反
什么是滴定分析法
滴定分析法,是化学分析法的一种,将一种已知其准确浓度的试剂溶液(称为标准溶液)滴加到被测物质的溶液中,直到化学反应完全时为止,然后根据所用试剂溶液的浓度和体积可以求得被测组分的含量,这种方法称为滴定分析法(或称容量分析法)。