MVA病毒储液制备实验
实验材料成片 CEF 或 BHK-21 细胞改造的痘苗病毒试剂、试剂盒MEM-10 和 MEM-2.5 完全培养基仪器、耗材150 cm2 组织培养瓶CO2培养箱Sorvall 离心机250 ml 无菌离心瓶实验步骤1. 用 1.5 ml 胰酶/EDTA 加 8.5 ml 的维持培养基消化 7 瓶 150 cm2 组织培养瓶培养的基本成片的 CEF 细胞或两瓶 BHK-21 细胞(见「细胞培养实验」基本方案 1 步骤 4~7),分装于 20 个 150 cm2 组织培养瓶中。在加湿的 5% CO2 培养箱 37℃ 培养至接近单层成片的程度 (通常为 2 天/L 分别对 CEF 和 BHK-21 细胞进行 1:3 和 1:10 稀释。用 BHK-21 细胞时,单层细胞密度应为 90%。2. 移弃培养基并向每瓶中加入 30 ml MEM-2.5 完全培养基。3. 溶解 MVA 病毒并在冰上超声 30 s......阅读全文
MVA-病毒储液制备实验
基本方案 免疫染色法滴度测定 实验方法原理 实验材料 成片 CEF 或 BHK-
MVA-病毒储液制备实验
实验材料成片 CEF 或 BHK-21 细胞改造的痘苗病毒试剂、试剂盒MEM-10 和 MEM-2.5 完全培养基仪器、耗材150 cm2 组织培养瓶CO2培养箱Sorvall 离心机250 ml 无菌离心瓶实验步骤1. 用 1.5 ml 胰酶/EDTA 加 8.5 ml 的维持培养基消化 7 瓶
MVA-病毒储液制备实验
实验方法原理 实验材料 成片 CEF 或 BHK-21 细胞改造的痘苗病毒试剂、试剂盒 MEM-10 和 MEM-2.5 完全培养基仪器、耗材 150 cm2 组织培养瓶CO2培养箱Sorvall 离心机250 ml 无菌离心瓶实验步骤 1. 用 1.5 ml 胰酶/EDTA 加 8.5 ml
MVA-病毒储液制备实验——免疫染色法滴度测定
实验方法原理MVA 病毒滴度通常是用免疫染色法进行测定,因为 MVA 不能在 CEF 或 BHK-21 细胞中形成噬斑。实验材料CEF 或 BHK-21 细胞MVA病毒储液试剂、试剂盒MEM-10 和 MEM-2.5 完全培养基1:1 丙酮/甲醇PBS(含和不含3% FBS两种)PBS/H2O2兔抗
痘苗病毒储液制备
实验方法原理 实验材料 悬浮培养的 HeLa S3 细胞痘苗病毒试剂、试剂盒 完全 MEM-10 和 MEM-2.50.25 mg ml 胰酶仪器、耗材 Sorvall H-6000A 转子150 cm2 组织培养瓶CO2 培养箱实验步骤 1. 用血细胞计数器对悬浮培养的 HeLa S3 细胞进行细
痘苗病毒储液制备
基本方案 噬斑分析测定滴度 实验方法原理 实验材料 悬浮培养的 HeLa S3
痘苗病毒储液制备
实验材料悬浮培养的 HeLa S3 细胞痘苗病毒试剂、试剂盒完全 MEM-10 和 MEM-2.50.25 mg ml 胰酶仪器、耗材Sorvall H-6000A 转子150 cm2 组织培养瓶CO2 培养箱实验步骤1. 用血细胞计数器对悬浮培养的 HeLa S3 细胞进行细胞计数。2. 将 5×
杆状病毒储液制备实验
实验方法原理 实验材料 悬浮培养的 Sf 9 细胞待接种的杆状病毒(野生型的或重组)试剂、试剂盒 含10%胎牛血清的昆虫细胞培养液 TNM-FH仪器、耗材 150 mm 培养瓶 27℃ 培养箱 倒置显微镜 带有 GH-3.7 水平转子的4℃GPR离心机 带螺口盖的冻存管 液氮罐 500 ml 旋转细
杆状病毒储液制备实验
基本方案 从悬浮培养中制备 基本方案 从单层培养中制备 噬斑试验测定滴度 实验方法原理 实验材料
痘苗病毒储液制备——噬斑分析测定滴度
实验方法原理经胰酶作用的系列稀释病毒储液常被用于感染适当的细胞系。经过几天的培养后,吸出培养基,将细胞用结晶紫染色。由于感染细胞变缩、变圆和脱落,形成直径 1~2 mm 颜色较淡的噬斑。实验材料生长良好的贴壁培养的单层 BSC-1 细胞病毒储液试剂、试剂盒0.1% 结晶紫(溶于 20% 乙醇)仪器、
杆状病毒储液制备实验——从单层培养中制备
实验材料单层培养的 Sf 9 细胞待接种的杆状病毒(野生型的或重组)试剂、试剂盒含10%胎牛血清的昆虫细胞培养液 TNM-FH仪器、耗材150 mm 培养瓶27℃ 培养箱倒置显微镜带有 GH-3.7 水平转子的4℃GPR离心机带螺口盖的冻存管液氮罐500 ml 旋转细胞培养瓶多转瓶的揽拌台实验步骤1
杆状病毒储液制备实验——噬斑试验测定滴度
实验材料对数生长期单层培养的 Sf 9 细胞试剂、试剂盒杆状病毒储液昆虫细胞培养液仪器、耗材琼脂糖顶层覆盖物台盼蓝顶层覆盖物(选用)60 mm 组织培养皿27℃ 培养箱1.5 ml 带螺口盖的冻存管实验步骤1. 用含 10% 胎牛血清的 TNM-FH 培养液稀释处于对数生长期的 Sf 9 细胞至约
杆状病毒储液制备实验——从悬浮培养中制备
实验材料悬浮培养的 Sf 9 细胞待接种的杆状病毒(野生型的或重组)试剂、试剂盒含10%胎牛血清的昆虫细胞培养液 TNM-FH仪器、耗材150 mm 培养瓶27℃ 培养箱倒置显微镜带有 GH-3.7 水平转子的4℃GPR离心机带螺口盖的冻存管液氮罐500 ml 旋转细胞培养瓶多转瓶的揽拌台实验步骤1
怎么固定储液器?
储液器各部件间一般采用钎焊的连接方式固定。因为钎焊是采用液相温度(熔点)比母材固相温度低的金属材料作为钎料,将零件和钎料加热到钎料熔化,利用液态钎料润湿母材,填充接头间隙并与母材相互溶解和扩散而实现连接零件的方法。 钎焊的优点 a)、钎焊接头平整光滑,外形美观。 b)、钎焊加热温度较低,对
重组MVA活体免疫染色实验
基本方案 实验方法原理 活体免疫染色可用于检测改造的痘苗病毒Ankara (MVA),因为MVA不能形成分开的、易辨认的噬斑,并且这种技术不需要利用筛选的标记
重组MVA活体免疫染色实验
实验方法原理活体免疫染色可用于检测改造的痘苗病毒Ankara (MVA),因为MVA不能形成分开的、易辨认的噬斑,并且这种技术不需要利用筛选的标记基因。实验材料汇片生长的CEF细胞试剂、试剂盒完全 MEM-2、MEM-2.5 和 MEM-10 培养基转染细胞裂解液干冰/乙醇抗外源基因表达蛋白一抗辣根
重组MVA活体免疫染色实验
实验方法原理 活体免疫染色可用于检测改造的痘苗病毒Ankara (MVA),因为MVA不能形成分开的、易辨认的噬斑,并且这种技术不需要利用筛选的标记基因。实验材料 汇片生长的CEF细胞试剂、试剂盒 完全 MEM-2、MEM-2.5 和 MEM-10 培养基转染细胞裂解液干冰/乙醇抗外源基因表达蛋白一
痘苗载体转染细胞实验
实验方法原理 将感兴趣的外源基因亚克隆到质粒转移载体上,外源基因的两端为痘苗病毒基因组非必需基因片段。随后,将重组质粒转染病毒感染的细胞,痘苗病毒基因组与质粒上同源的部分发生同源重组。应用适当的筛选方案,经几轮噬斑纯化,从细胞裂解物中获得重组病毒。实验材料 pSCll/pRB21/pSC65/pLW
痘苗载体转染细胞实验——CaCl2-法
实验方法原理将感兴趣的外源基因亚克隆到质粒转移载体上,外源基因的两端为痘苗病毒基因组非必需基因片段。随后,将重组质粒转染病毒感染的细胞,痘苗病毒基因组与质粒上同源的部分发生同源重组。应用适当的筛选方案,经几轮噬斑纯化,从细胞裂解物中获得重组病毒。实验材料pSCll/pRB21/pSC65/pLW9
痘苗载体转染细胞实验
CaCl2 法 DOTAP 法 实验方法原理 将感兴趣的外源基因亚克隆到质粒转移载体上,外源基因的两端为痘苗病毒基因组非必需基因片段。随后,将重组质
关于储液器的要求的介绍
1、气密性:4.15MPa下保压5分钟无泄漏; 2、内部杂质含量:与制冷剂接触表面的杂质含量不大于80mg/m; 3、耐压强度:在6.23MPa下无变形和渗漏; 4、破坏压力:在9.35MPa下无渗漏或破裂; 5、晶粒度:焊接部位铜管平均晶粒度不大于0.15mm; 6、储液器内部:不含
ATF的补料分批/灌流混合工艺在病毒疫苗生产的应用
使用基于ATF的补料分批/灌流混合工艺进行病毒疫苗生产来自德国马克斯·普朗克复杂技术系统动力学研究所和ProBioGen AG等的科学家们在2019年第103期的《Applied Microbiology and Biotechnology》杂志上发表了题为“High titer MVA and
离子色谱储液器的选择与使用
储液器是盛装淋洗液或淋洗液组分的容器,制作的材料应对淋洗液呈完全惰性,溶出物低,一般是由聚乙烯材料制成。储液器带有脱气装置或惰性气体保护措施以及搅拌器等,以便有小弟脱除淋洗液中的气体。储液器是离子色谱系统中操作比较简单的部件,但使用不当也可能给测量工作带来问题。 储液器的容积大小要根据使用淋洗液
储液器的所用材料的相关介绍
1.铜管:T2 主要成分99.9%Cu,拉制铜管GB/T17791-1999 。铜熔点1083度、塑性、导电性、导热性好;线膨胀系数900度19.3/10,加工工艺:电解铜-熔炼-铜锭-剥皮-挤压-拉制 2.钢板:SPCC、ST12、ST14、SPHC深冲钢板,塑性大于28%,抗拉强度大于27
液相色谱仪仪器相关术语储液器
储液器( reservoir)液相色谱仪中存储流动相的容器。
关于储液器的组成和用途的介绍
它是由筒体(BODY)、进气管(INLET PIPE)、出气管(OUTLET PIPE)、滤网(SCREEN)等零部件组成,其工作原理如下: 储液器是配装在空调蒸发器和压缩机吸气管部位,是防止液体制冷剂流入压缩机而产生液击的保护部件。 在空调系统运转中,无法保证制冷剂能全部完全汽化;也就是从
痘苗载体转染细胞实验——DOTAP-法
实验方法原理将感兴趣的外源基因亚克隆到质粒转移载体上,外源基因的两端为痘苗病毒基因组非必需基因片段。随后,将重组质粒转染病毒感染的细胞,痘苗病毒基因组与质粒上同源的部分发生同源重组。应用适当的筛选方案,经几轮噬斑纯化,从细胞裂解物中获得重组病毒。实验材料pSCll/pRB21/pSC65/pLW9
武汉博沃与GeoVaxBravoVax-合作开发新型冠状病毒疫苗
2020年1月27日,武汉博沃与美国生物技术公司GeoVax Labs宣布签署合作意向书,共同研发新型冠状病毒2019-nCoV的疫苗。GeoVax Labs将利用其MVA-VLP疫苗平台及专业知识,使用源自武汉的冠状病毒基因序列来设计和构建候选疫苗。武汉博沃将作为该项目的合作伙伴提供进一步开发
防腐储罐在储液的时候的注意事项
防腐储罐的安全性一直是很多人所关注的,特别是在进行储液的时候,更要多加注意,否则就容易引发很严重的事故,因为防腐储罐中所储放的都是化学物品,一旦出现泄露后,不仅会给环境造成严重的污染,也不利用人们的健康,为了有效的避免这些事故的发生,就要提前做好各种准备工作,那么下面让我们来看看防腐储罐在储液的时候
液相色谱仪-流动相储液瓶安全瓶盖
溶剂瓶敞口或者部分盖住时,将导致溶剂挥发产生有毒气体。使用安捷伦的溶剂安全瓶盖,可以避免溶剂挥发以及可能的化学品泄漏。这些安全瓶盖具有zui佳密封性能,并带有集成的排气阀,在溶剂萃取时维持压力平衡,同时为液相色谱系统提供稳定的流量。排气阀带有PTFE 膜,避免溶剂受到灰尘和粉尘颗粒的污染。• 与