用于表达分析的mRNA的制备实验——基本方案
同时检测包含成百上千种基因的 RNA 水平，从而构建一个详细的基因表达谱是分子生物学新的一项激动人心的本领。这是通过将 mRNA 定量扩增并用生物素标记再与 DNA 芯片杂交实现的，芯片上预先固定有与目的 mRNA 互补的寡核苷酸序列。来源：《精编分子生物学实验指南 第五版 第二十一章》用于表达监测以及与寡核苷酸芯片杂交的 mRNA 扩增实验方法原理扩增步骤完全决定于干净、完整的起始 RNA。对培养的细胞，作者采用胍盐裂解再用树脂纯化（如 Qiagen RNeasy Kit）的方案。 扩增 mRNA 可从 Poly（A）＋或总 RNA 开始。尽管 poly（A）＋灵敏度更高，因为除 掉了 cDNA 反应期间大部分与 rRNA 的错配，而使用总 RNA 起始则可以分析那些细 胞或组织有限的生物系统。使用总 RNA 起始一个重要的修正是将 cDNA 第一链合成的温度从 37℃ 提高到 50℃。探针选择严格限制在编码区最后的 600 ......阅读全文
1溴丁烷的制备实验
仪器、耗材半微量有机制备仪圆底烧瓶球形冷凝管导气管小玻璃漏斗量筒250 mL烧杯75°弯管直形冷凝管接尾管真空塞筒形分液漏斗圆底烧瓶30 mL锥形瓶蒸馏头温度计套管温度计实验步骤药品：4 mL浓H2SO4，2.5 mL n-C4H9OH；3.3 g NaBr；饱和NaHCO3溶液仪器：半微量有机制备
乙酸乙酯的制备实验
实验方法原理实验步骤仪器：加热套；250 mL三口瓶；75°弯头；直形冷凝管；真空接尾管；150 mL锥形瓶；真空塞；125 mL滴液漏斗（以上均为19#）；温度计（200℃、100℃）； 500 mL烧杯2个；量筒（10mL、100mL）；125mL分液漏斗；蒸馏头19#。药品：95%乙醇；浓硫酸
颗粒剂的制备实验_感冒退热颗粒剂的制备
实验材料大清叶板蓝根连翘拳参试剂、试剂盒纯化水乙醇蔗糖粉糊精仪器、耗材烧杯玻璃棒天平旋蒸仪圆底烧瓶桑皮纸实验步骤一、准备 1. 原辅料的处理: 根据药材的有效成分不同，可采用不同的溶剂和方法进行提取，一般多用煎煮法提取有效成分，用等量乙醇精制时放置的时间、回收乙醇后放置的时间可根据实验安排情况，适
细胞凋亡的mRNA检测
研究者们发现了很多在细胞凋亡时表达异常的基因，检测这些特异基因的表达水平也成为检测细胞凋亡的一种常用方法。据报道，Fas 蛋白结合受体后能诱导癌细胞中的细胞毒性T细胞（cytotoxic T cells）等靶细胞。Bcl-2 和bcl-X （长） 作为抗凋亡（bcl-2 和bcl-X）的调节物，它们
mRNA的分离与纯化
真核细胞的mRNA分子最显著的结构特征是具有5’端帽子结构（m7G）和3’端的Poly(A)尾巴。绝大多数哺乳类动物细胞mRNA的3’端存在20-30个腺苷酸组成的Poly（A）尾，通常用Poly（A+）表示。这种结构为真核mRNA的提取，提供了极为方便的选择性标志，寡聚（dT）纤维素或寡聚（U）
细胞凋亡的mRNA检测
研究者们发现了很多在细胞凋亡时表达异常的基因，检测这些特异基因的表达水平也成为检测细胞凋亡的一种常用方法。据报道，Fas 蛋白结合受体后能诱导癌细胞中的细胞毒性T细胞（cytotoxic T cells）等靶细胞。Bcl-2 和bcl-X （长） 作为抗凋亡（bcl-2 和bcl-X）的调节物，它们
原核mRNA的降解
原核生物mRNA的降解是不同核糖核酸酶包括核酸内切酶，3'核酸外切酶和5'核酸外切酶的共同作用的结果。在一些情况下，长度为数十至数百个核苷酸的小RNA分子（sRNA）可通过与互补序列碱基配对来促进RNase III对特定mRNA的降解。
mRNA的分离与纯化
[实验原理]真核细胞的mRNA分子最显著的结构特征是具有5’端帽子结构（m7G）和3’端的Poly(A)尾巴。绝大多数哺乳类动物细胞mRNA的3’端存在20-30个腺苷酸组成的Poly（A）尾，通常用Poly（A+）表示。这种结构为真核mRNA的提取，提供了极为方便的选择性标志，寡聚（dT）纤维素或
隐蔽mRNA的结构特点
1．mRNA的3′-末端有一段含30~200个核苷酸残基组成的多聚腺苷酸（polyA）。此段polyA不是直接从DNA转录而来，而是转录后逐个添加上去的。有人把polyA称为mRNA的“靴”。原核生物一般无polyA的结构。此结构与mRNA由胞核转位胞质及维持mRNA的结构稳定有关，它的长度决定mR
mRNA的分离与纯化
实验概要mRNA的分离与纯化实验原理 真核细胞的mRNA分子最显著的结构特征是具有5’端帽子结构（m7G）和3’端的Poly(A)尾巴。绝大多数哺乳类动物细胞mRNA的3’端存在20-30个腺苷酸组成的Poly（A）尾，通常用Poly（A）表示。这种结构为真核mRNA的提取，提供了极为方便的选择性
关于mRNA疫苗的简介
mRNA疫苗是将含有编码抗原蛋白的mRNA导入人体,直接进行翻译,形成相应的抗原蛋白,从而诱导机体产生特异性免疫应答,达到预防免疫的作用。 [6] mRNA疫苗是继灭活疫苗、减毒活疫苗、亚单位疫苗和病毒载体疫苗后的第三代疫苗,具有针对病原体变异反应速度快、生产工艺简单、易规模化扩大等特点。
mRNA的稳定性
中文名称mRNA稳定性英文名称mRNA stability定 义信使核糖核酸(mRNA)在细胞内存在的稳定程度。mRNA易为外界环境，包括物理的、化学的和酶的因素所破坏，与其他种类RNA相比，半寿期较短，一般为数分钟。体内mRNA的稳定性与特异结合蛋白的存在与否有关。应用学科生物化学与分子生物学（
真核mRNA的降解
真核细胞的翻译和mRNA衰变之间存在着平衡。正在被翻译的mRNA被核糖体，真核起始因子eIF-4E和eIF-4G以及poly（A）结合蛋白结合，不能接触外泌体复合物，mRNA得到保护。mRNA的poly（A）尾巴被特异性外切核酸酶缩短，该核酸外切酶通过RNA上的顺式调节序列和反式作用RNA结合蛋白的
mRNA的转运和翻译
mRNA的转运真核生物和原核生物之间的另一个区别是mRNA的转运。由于真核转录和翻译是在不同的细胞器内进行的，真核mRNA必须从细胞核输出到细胞质。 这一过程可能受不同信号通路的调节。成熟的mRNA通过其加工的修饰被识别，在结合帽结合蛋白CBP20和CBP80及转录/输出复合物（TREX）后通过核孔
原核mRNA的降解
原核生物mRNA的降解是不同核糖核酸酶包括核酸内切酶，3'核酸外切酶和5'核酸外切酶的共同作用的结果。在一些情况下，长度为数十至数百个核苷酸的小RNA分子（sRNA）可通过与互补序列碱基配对来促进RNase III对特定mRNA的降解。
隐蔽mRNA的结构特点
1．mRNA的3′-末端有一段含30~200个核苷酸残基组成的多聚腺苷酸（polyA）。此段polyA不是直接从DNA转录而来，而是转录后逐个添加上去的。有人把polyA称为mRNA的“靴”。原核生物一般无polyA的结构。此结构与mRNA由胞核转位胞质及维持mRNA的结构稳定有关，它的长度决定mR
关于mRNA的功能简介
mRNA含A、U、G、C四种核苷酸，每三个相联而成一个三联体，即密码，代表一个氨基酸的信息，故按数学中排列组合法则计算，可形成43=64个不同的密码。 64个密码中，61个密码分别代表各种氨基酸。每种氨基酸少的只有一个密码，多的可有6个，但以2个及4个的居多数。此外，UAA、UAG、UGA这三
多顺反子mRNA的定义
多顺反子mRNA(Polycistron mRNA)是遗传学,分子生物学名词,指一个mRNA分子编码多个多肽链。
mRNA帽的结构特点
中文名称mRNA帽英文名称mRNA cap定 义信使核糖核酸(mRNA)的5′端帽子结构。真核生物信使核糖核酸(mRNA)的帽结构为7-甲基鸟苷-5′-三磷酸，通过5′-5′方式与mRNA的5′端相连。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），核酸与基因（二级学科）
单顺反子mRNA的定义
单顺反子mRNA是指一个mRNA仅包含一种蛋白质的编码信息。
双顺反子mRNA的简介
结构基因是指决定某一种蛋白质分子结构的相应的一段DNA或染色体。在正常情况下，在需要某种或其有关的酶时，在调节基因和操纵基因的控制下等候在启动子(Promotor)位置上的RNA聚合酶开始转录，从而产生了与这些酶有关的结构基因的信使RNA，并由后者合成所需的酶。若其发生突变，便会产生失去活性的蛋
hnRNA和mRNA的关系
人们经分析认为hnRNA是mRNA的前体，证据是：(1) hnRNA和mRNA有相同的序列。用小鼠核内hnRNA分离出的1.5Kb（15S）的RNA分子和10Sβ-珠蛋白mRNA分别与小鼠的b-珠蛋白基因都可进行分子杂交，形成R环。实验结果表明hnRNA中存在与mRNA相同的序列，但比mRNA更为复
动物实验技术：转基因小鼠制备实验
1、 选取7~8周龄雌性小鼠，阴道口封闭，作为供体，下午3:00左右，每只小鼠腹腔注射PMSG（10 IU）。2、 47~48小时后，每只小鼠腹腔注射HCG（0.8 IU），并与正常公鼠合笼；另取数只适龄母鼠（2月龄以上）作为受体，阴道口潮红，与结扎公鼠合笼。3、第二天上午9:00前观察供体、受体，
细菌中制备基因组DNA实验——小量制备
真核生物的一切有核细胞（包括培养细胞）都能用来制备基因组 DNA。真核生物的DNA是以染色体的形式存在于细胞核内，因此，制备DNA的原则是既要将DNA与蛋白质、脂类和糖类等分离，又要保持DNA分子的完整。实验方法原理提取DNA的一般过程是将分散好的组织细胞在含SDS（十二烷基硫酸钠）和蛋白酶K的溶液
甲烷的制备和烷烃的性质实验
试剂、试剂盒无水NaAc碱石灰NaOH (sBr2∕CCl4KMnO4 aqH2SO4正庚烷仪器、耗材硬质大试管玻璃导管试管玻璃水槽大抽滤试管滴液漏斗9.锡纸玻璃棒气压塞红外灯实验步骤1. 制备：将5 g NaAc (无水)、3 g碱石灰、2 g NaOH（s），放在研钵中快速研细混合均匀后用锡纸包
甲烷的制备和烷烃的性质实验
试剂、试剂盒 无水NaAc碱石灰NaOH (sBr2∕CCl4 KMnO4 aqH2SO4正庚烷仪器、耗材 硬质大试管玻璃导管试管玻璃水槽大抽滤试管滴液漏斗9.锡纸玻璃棒气压塞红外灯实验步骤 1. 制备：将5 g NaAc (无水)、3 g碱石灰、2 g NaOH（s），放在研钵中快速研细混
单克隆抗体上清的制备实验——单抗上清大量制备
实验材料抗体试剂、试剂盒DMEM-10乙醇仪器、耗材离心机培养瓶转子实验步骤1. 重复基本方案1步骤1，按1：10分传到终体积100 ml 的完全DMEM-10/HEPES中。 2. 准备传代细胞时，应将175 cm2培养瓶中的内容物（100 ml）转移到—个850 cm2旋转培养瓶中，另加15
酿酒酵母培养基的制备实验——YPAD培养基的制备
试剂、试剂盒酵母提取物蛋白胨葡萄糖偏硫酸腺嘌呤琼脂水仪器、耗材锥形瓶实验步骤1. 在 1 L 的带螺旋盖的瓶中或锥形瓶中将下面的成分溶于 500 ml 水中，置于振荡器上。酵母提取物 6.0 g，蛋白胨 12.0 g，葡萄糖 12.0 g，偏硫酸腺嘌呤 60.0 mg，琼脂 10.0 g，加水到 6
抗原和免疫血清的制备实验——抗人血清抗体的制备
实验材料家兔试剂、试剂盒羊毛脂石蜡油卡介苗生理盐水仪器、耗材研钵离心机培养箱实验步骤1. 弗氏佐剂的制备将羊毛脂与石蜡油按1：5比例混合，高压灭菌。2. 人血清—弗氏完全的制备将灭菌佐剂一份置研钵中，边研磨边滴加等量的含卡介苗3—4毫克/毫升的抗原液，使成油色水乳剂，研磨要充分，使乳剂滴入冰水中
非洲爪蟾生发泡内含物的涂布制备实验实验
实验材料 雌性非洲爪蟾 试剂、试剂盒 OR2 培养液 “5:1” 分离液 分散剂