抗原和免疫血清的制备实验——抗人血清抗体的制备
实验材料家兔试剂、试剂盒羊毛脂石蜡油卡介苗生理盐水仪器、耗材研钵离心机培养箱实验步骤1. 弗氏佐剂的制备将羊毛脂与石蜡油按1:5比例混合,高压灭菌。2. 人血清—弗氏完全的制备将灭菌佐剂一份置研钵中,边研磨边滴加等量的含卡介苗3—4毫克/毫升的抗原液,使成油色水乳剂,研磨要充分,使乳剂滴入冰水中不扩散。3. 免疫动物可采用一次性免疫法,即将抗原与佐剂制成的乳剂分多个点兔背部皮肤,也可注入足底2~4针各0.45毫升,总量约3毫升,一个月后试血。......阅读全文
抗原和免疫血清的制备实验——抗人血清抗体的制备
实验材料家兔试剂、试剂盒羊毛脂石蜡油卡介苗生理盐水仪器、耗材研钵离心机培养箱实验步骤1. 弗氏佐剂的制备将羊毛脂与石蜡油按1:5比例混合,高压灭菌。2. 人血清—弗氏完全的制备将灭菌佐剂一份置研钵中,边研磨边滴加等量的含卡介苗3—4毫克/毫升的抗原液,使成油色水乳剂,研磨要充分,使乳剂滴入冰水中
抗原和免疫血清制备实验—抗红细胞抗体(溶血素)制备
实验材料家兔试剂、试剂盒红细胞悬液生理盐水阿氏液仪器、耗材离心机培养箱实验步骤1. 红细胞悬液的制备(1) 采血采取的绵羊血与灭菌的保存液等量混合,置冰箱中,可保存数周,也可用抗凝方法(2) 洗涤血球先将抗凝血液离心沉淀(2000 cpm×5分钟)吸去上清。加入2~3倍的生理盐水并用毛细滴管反复吹
抗原和免疫血清的制备实验——抗菌血清的制备
抗体是机体接受抗原刺激后产生的一种具有免疫特异性的球蛋白。在免疫学实践,为制备抗体常以抗原性物质(细菌、病毒、类毒素、血清及其他蛋白质)给动物注射。经过一定时间后,动物血清中可以产生大量的特异性抗体。这种含有特异性抗体的血清称为免疫血清。实验材料家兔试剂、试剂盒普通培养基甲醛盐水石灰酸盐水生理盐水仪
抗原和免疫血清的制备实验
实验材料 家兔试剂、试剂盒 普通培养基甲醛盐水石灰酸盐水生理盐水仪器、耗材 标准比浊管离心机实验步骤 1. 抗原的制备:标准菌株的选择:所用的菌种伤寒杆菌H901和伤寒杆菌O901应具有典型形态菌落及生化反应。在生理盐水中不发生自身凝集,与特异血清有高度凝集者可作为菌种。2. 菌液的制备(1)原液制
抗原与免疫血清的制备实验
将抗原注射于动物体,可刺激动物的 B 淋巴细胞转化为浆细胞而产生特异性抗体,待动物血清中累积大量抗体时,采集其血液,分离析出血清,此即含抗体的免疫血清,或称抗血清。制备特异性强、效价高的免疫血清对于微生物的鉴定,传染病的诊断与治疗,抗原分析,免疫球蛋白的鉴定及其他蛋白质的鉴定与研究均有很大的用途。
抗原与免疫血清的制备实验
将抗原注射于动物体,可刺激动物的 B 淋巴细胞转化为浆细胞而产生特异性抗体,待动物血清中累积大量抗体时,采集其血液,分离析出血清,此即含抗体的免疫血清,或称抗血清。制备特异性强、效价高的免疫血清对于微生物的鉴定,传染病的诊断与治疗,抗原分析,免疫球蛋白的鉴定及其他蛋白质的鉴定与研究均有很大的用途。实
抗原与免疫血清的制备
实验方法原理 动物产生抗体的量,一方面可因动物的种类、年龄、营养状况及刺激部位的感受性的不同而不同外,另方面还与抗原的种类、注射量、注射途径、注射次数以及注射的间隔时间有关。抗原量低到一定限度时,抗体不能产生或用现有方法不能测出,但超过最高限度对抗体的产生反起抑制作用。在最低限度以上,抗体根据抗原量
免疫血清的制备实验
免疫血清的制备是一项常用的免疫学实验技术。高效价、高特异性的免疫血清可作为免疫学诊断的试剂(如用于制备免疫标记抗体等),也可供特异性免疫治疗用。(来源:医学基础免疫学实验指导,主编金伯泉李恩善,第1 版,北京:世界图书出版社,1990) 实验方法原理具有免疫原性的抗原可刺激机体相应B细胞增殖、分化
免疫血清的制备
实验方法原理 具有免疫原性的抗原可刺激机体相应B细胞增殖、分化形成浆细胞并分泌特异性抗体。由于抗原分子表面的不同决定簇为不同特异性的B细胞克隆所识别,因此由某一抗原刺激机体后产生的抗体,实际上为针对该抗原分子表面不同决定簇的抗体混合物(即多克隆抗体)。另外,抗体的产生具有回忆应答的规律性,现为初次免
兔抗人血清抗体的制备和效价测定
实验原理 凡能刺激机体产生抗体,并能与抗体发生特异性结合的物质称为抗原。物质所具有的这种特性称为抗原性(Antigenicity)。当机体受抗原刺激后,在体液中出现的一种能与相应抗原发生反应的球蛋白,称免疫球蛋白(Immunoglobulin, Ig)。含有免疫球蛋白的血清称免疫血清。 医学上常
免疫血清制备方法
免疫血清的制备可用于:(1)制备免疫标记抗体等;(2)供特异性免疫治疗用等。实验方法原理具有免疫原性的抗原可刺激机体相应B细胞增殖、分化形成浆细胞并分泌特异性抗体。由于抗原分子表面的不同决定簇为不同特异性的B细胞克隆所识别,因此由某一抗原刺激机体后产生的抗体,实际上为针对该抗原分子表面不同决定簇的抗
免疫血清制备方法(二)
五、结果鉴定 以双相琼脂扩散试验测定所获免疫血清的抗体效价,并用琼指免疫电泳鉴定免疫血清中抗体的质量,应产生单一的沉淀弧线。鉴定方法的具体步骤参见有关部分。 六、材料 (一) 动物:健康成年家兔,雄性,体重2~3公斤。 (二) 器材:剪刀、镊子、注射器(2ml、50ml)附针头(9号、6号)、称量瓶
免疫血清制备方法(一)
免疫血清的制备是一项常用的免疫学实验技术。高效价、高特异性的免疫血清可作为免疫学诊断的试剂(如用于制备免疫标记抗体等),也可供特异性免疫治疗用。免疫血清的效价高低取决于实验动物的免疫反应性及抗原的免疫原性。如以免疫原性强的抗原刺激高应答性的机体,常可获得高效价的免疫血清。而使用免疫原性弱的抗原免疫时
抗肽抗体的制备实验
提高免疫原性肽的抗血清,是最简单的方法,获得非隔离的蛋白质的抗体,例如,对来自DNA序列信息的推定蛋白质序列。 这种方法也是有用的,当隔离的抗原是困难或费时,或当抗原是一个大的蛋白家族的成员。实验步骤: 将10 mg BSA溶于0.5 ml 0.1 mol/l pH6.8的磷酸钠
抗肽抗体的制备实验2
实验材料抗体试剂、试剂盒磷酸钠缓冲液MBS二甲基酰胺EDTAPBS仪器、耗材分光光度计离心机实验步骤1. 将10 mg 的血蓝蛋白溶于2 ml pH10的硼酸缓冲液中,置于15 ml 的玻璃试管中,温和振摇。2. 加10 μmol 的合成肽。3. 缓慢加入1 ml 的0.3%戊二醛溶液,于室温
抗肽抗体的制备实验1
实验材料抗体试剂、试剂盒磷酸钠缓冲液MBS二甲基酰胺EDTAPBS仪器、耗材分光光度计离心机实验步骤1. 将10 mg BSA溶于0.5 ml 0.1 mol/l pH6.8的磷酸钠缓冲液中,置于一个2 ml 的玻璃试管,加50 μl MBS/DMF溶液,于室温下温和搅拌30 min。 2. 加
免疫血清的制备及效价测定
实验概要本实验制备了抗绵羊红细胞 (SRBC)的免疫血清并对其效价进行了测定。实验原理1. 制备免疫血清的传统方法是将抗原注入动物体内,由动物体内 B 细胞增殖分化成浆细胞产生抗体。由于抗原分子(完全抗原)具有多种抗原决定簇,每一种抗原决定簇可以激活具有相应抗原受体的 B 细胞系产生该决定簇的
免疫血清的制备及效价测定
制备免疫血清的传统方法是将抗原注入动物体内,由动物体内 B 细胞增殖分化成浆细胞产生抗体。由于抗原分子(完全抗原)具有多种抗原决定簇,每一种抗原决定簇可以激活具有相应抗原受体的 B 细胞系产生该决定簇的抗体,因此用抗原免疫机体获得的免疫血清一般均为多克隆抗体。 制备的免疫血清的质量(特异性、
免疫血清的制备及效价测定
实验概要本实验制备了抗绵羊红细胞 (SRBC)的免疫血清并对其效价进行了测定。实验原理1. 制备免疫血清的传统方法是将抗原注入动物体内,由动物体内 B 细胞增殖分化成浆细胞产生抗体。由于抗原分子(完全抗原)具有多种抗原决定簇,每一种抗原决定簇可以激活具有相应抗原受体的 B 细胞系产生该决定簇的
抗肽抗体的制备
实验材料 抗体试剂、试剂盒 磷酸钠缓冲液MBS二甲基酰胺EDTAPBS仪器、耗材 分光光度计离心机实验步骤 1. 将10 mg BSA溶于0.5 ml 0.1 mol/l pH6.8的磷酸钠缓冲液中,置于一个2 ml 的玻璃试管,加50 μl MBS/DMF溶液,于室温下温和搅拌30 min。 2
免疫学技术:免疫血清制备方法
免疫血清的制备是一项常用的免疫学实验技术。高效价、高特异性的免疫血清可作为免疫学诊断的试剂(如用于制备免疫标记抗体等),也可供特异性免疫治疗用。免疫血清的效价高低取决于实验动物的免疫反应性及抗原的免疫原性。如以免疫原性强的抗原刺激高应答性的机体,常可获得高效价的免疫血清。而使用免疫原性弱的抗原免疫时
血清制备实验
血清制备实验 实验材料 血 仪器、耗材
血清制备实验
实验材料 血仪器、耗材 低温离心机4℃冰箱试管–80℃低温储藏箱实验步骤 1. 取血后,37℃下,让血液凝固1 到2 小时(不加抗凝剂);2. 4℃冰箱过夜(让血块固缩);3. 当血清自然析出后, 4℃,3000 转/分,离心10 分钟,分离血清,弃去不溶物;4. 将血清移至一干净试管,并分装成小份
血清制备实验
抗血清为含有某一类具有特异免疫功能的抗体分子的血清,一般为动物被人工注射某类抗原后制备的动物血清。高效价的抗血清用于研究工作以及疾病的诊断和治疗。实验材料血仪器、耗材低温离心机4℃冰箱试管–80℃低温储藏箱实验步骤1. 取血后,37℃下,让血液凝固1 到2 小时(不加抗凝剂);2. 4℃冰箱过夜(让
酶标记抗体或抗原的制备
标记方法应符合:技术方法简单、产率高,且重复性好;标记反应不影响酶和抗原或抗体的活性;酶标志物稳定,应避免酶、抗体(抗原)以及酶标志物各自形成聚合物等。1.戊二醛交联法:同源双功能交联剂(1)一步法:连接AP。 ①优点:操作简便、有效,重复性好。②缺点:交联时分子间比例不严格,大小不一,影响效果。(
酶标记抗体或抗原的制备
标记方法应符合:技术方法简单、产率高,且重复性好;标记反应不影响酶和抗原或抗体的活性;酶标志物稳定,应避免酶、抗体(抗原)以及酶标志物各自形成聚合物等。 1.戊二醛交联法:同源双功能交联剂 (1)一步法:连接AP。 ①优点:操作简便、有效,重复性好。 ②缺点:交联时分子间比例不严格,大小
抗原抗体反应的人单克隆抗体的制备
小鼠的单克隆抗体蛋白应用于人体后,作为抗原能引起人的免疫应答,大大降低其生物活性,并可能导致变态反应。因此人源单克隆抗体在临床治疗上有广泛应用前景,引起人们的普遍兴趣。但是人单克隆抗体制备存在许多技术上和伦理上的障碍,如人杂交瘤细胞系不稳定,有些抗原不能对人进行人工免疫,人B细胞只能从外周血中分
若想提供抗原制备抗体,需要提供多少抗原?
① 如果您的抗原是合成多肽,通常需要5mg以上。对于需要做亲和纯化的项目,需要额外提供3-4mg多肽。提供的多肽要求是冻干粉。② 如果抗原是蛋白,建议您提供3-5mg浓度为1mg/ml以上的蛋白并注明蛋白保存的缓冲液和蛋白浓度。对于需要做亲和纯化的项目,需要额外提供3-4mg蛋白用于亲和纯化。 该量
抗磷酸肽的多克隆抗体制备实验
实验材料用磷酸肽-BSA 交联物免疫过的兔的粗制血清试剂、试剂盒PBS/叠氮化物MgCl2仪器、耗材分光光度计透析袋填装有 BSA-琼脂糖亲和介质的柱子填装有磷酸酪氨酸亲和介质的柱子填装有同种非磷酸肽亲和介质的柱子填装有同源的磷酸肽亲和介质的柱子填装有阳性-筛选的磷酸肽亲和介质的柱子实验步骤1. 将
抗磷酸肽的多克隆抗体制备实验
实验方法原理 实验材料 用磷酸肽-BSA 交联物免疫过的兔的粗制血清试剂、试剂盒 PBS/叠氮化物MgCl2仪器、耗材 分光光度计透析袋填装有 BSA-琼脂糖亲和介质的柱子填装有磷酸酪氨酸亲和介质的柱子填装有同种非磷酸肽亲和介质的柱子填装有同源的磷酸肽亲和介质的柱子填装有阳性-筛选的磷酸肽亲和介质的