核酸的定量测定实验——二苯胺法
实验方法原理DNA 分子中2-脱氧核糖残基在酸性溶液中加热降解, 产生2-脱氧核糖并形成ω-羟基-γ-酮基戊醛, 后者与二苯胺试剂反应生成蓝色化合物, 其反应为： 蓝色化合物在595 nm 处有最大吸收峰, 且DNA 在40～400 μg 范围内时, 光密度与DNA 浓度呈正比。在反应液中加入少量乙醛, 可以提高反应灵敏度。实验材料蛋白质试剂、试剂盒小牛胸腺DNANaOH二苯胺纯冰醋酸过氯酸乙醛仪器、耗材试管吸量管容量瓶722 分光光度计实验步骤1. 标准曲线的绘制: 取干燥试管6 支, 编号, 按下表加入试剂。 加完后混匀, 于60 ℃恒温水浴中保温1 h , 冷却后于595 nm处比色测定, 以零号管调零点。以DNA 浓度为横坐标, 光密度为纵坐标, 绘制标准曲线。2. 样品测定: 取试管3 支, 两支为样品管, 一支为对照管。对照管操作与标准曲线零号管相同。向每支样品管加2.0 ......阅读全文
蛋白质的定量测定实验
试剂、试剂盒 Bradford 试剂 牛血清白蛋白 (BSA) 标准溶液 Tris-缓冲盐溶液 仪器、耗材
蛋白定量BCA法－VS－Bradford法实验分析
精-确的蛋白质定量是蛋白质相关实验所必需的，这些实验涉及分子生物学，细胞生物学，生物化学，发育生物学和神经科学的研究课题。依托不同的科学原理，目前已经发展出多种不同的蛋白测定方法，科研工作者广泛使用的方法比如紫外吸收法（UV），双缩脲法，考马斯亮蓝法（Bradford）、Folin-酚试剂法（Low
核酸的纯化，浓缩和定量
一、核酸的纯化 在分子克隆的所有操作中，最基本的操作是核酸的纯化。其关键步骤是去蛋白质，通常只要用酚/氯仿。氯仿抽提核酸的溶液即可。每当需要把克隆有某一些所用的酶灭活或去除以便进行下一步时，可进行这种抽提。然而，如要从细胞裂解液等复杂的分子混合物中纯化核酸，则要先用某些蛋白水解酶消化大部分蛋白质后
二维凝胶的定量分析实验（二）
4. 传输数据转化为光密度传输的数据必须转换成光密度（当然荧光染色不能做这种转换）。在大多数的二维数据包中不需要用到这个。蛋白质浓度与光密度呈线性相关，而非传输值。光密度 (OD) 和传输值之间的关系如下：OD= - log (I/I0) 。由于这种关系不是直线，一个给定的传输增加值与不同的 O
核酸扩增荧光定量检测
如果怀疑有乙肝的情况，那么需要到医院进行专业的检查，比如做核酸扩增荧光定量检测之类的，当然核酸扩增荧光定量检测还可以测量其他方面的情况，比如测解脲脲原体，接下来我们来了解一下核酸扩增荧光定量检测的相关情况吧。核酸扩增荧光定量检测检查什么核酸方面的检查有核酸扩增荧光定量检测检查，那么核酸扩增荧光定量检
核酸定量内标与外标
众所周知，在实时荧光定量PCR（Quantitative Real-time PCR）中模板的浓度对数值与结果Ct值呈线性关系，Ct值越小，浓度越高。根据所选取定量数学模型的差别，主要有外标定量法（外标法）和内标定量法（内标法）两种定量方法。这些数学模型就像特殊标记的尺子，把得到的Ct值测量为浓度值
核酸检测实验室如何评价荧光定量PCR仪!
荧光定量PCR的检测是一系列从采样、保存运输、样品处理、核酸提取、扩增等一系列流程的组合，任何一个环节出现问题都会导致最终结果的错误。虽然在前面一系列的文章中讲述了提取试剂、扩增试剂的评价但是这些仍远远不够，因此我在后续的文章中会尽可能覆盖到所有的检测环节。 荧光定量PCR的检测离不开荧光定量
测定温度对微生物的影响实验——法二
实验方法原理温度通过影响蛋白质、核酸等生物大分子的结构与功能以及细胞结构如细胞膜的流动性及完整性来影响微生物的生长，繁殖和新陈代谢。过高的环境温度会导致蛋白质或核酸的变性失活，而过低的温度会使酶活力受到抑制，细胞的新陈代谢活动减弱。每种微生物只能在一定的温度范围内生长，低温微生物最高生长温度不超过
苯胺类化合物测定方法介绍盐酸萘乙二胺分光光度法
一、原理苯胺被硫酸溶液吸收,经重氮化后与盐酸乙二胺偶合,生成紫红色化合物,根据颜色深浅,用分光光度法测定。本法检出限为0.2μg/5ml,当采样体积为30L时,最低检出浓度为0.007mg/m3。二、仪器①多孔玻板吸收管。②具塞比色管:10ml。③空气采样器:流量范围0～1L/min。④分光光度计。
光气测定方法介绍苯胺紫外分光光度法
当排放筒光气浓度达每立方米几十克甚至几百克的情况下,采用碘量法测定;经净化处理后的废气在50mg/m3时,可采用紫外分光光度法。后者也适用于车间或环境空气中光气的测定。以下介绍苯胺紫外分光光度法。一、原理含光气(COCl2)的气体先经装有硫代硫酸钠和无水碳酸钠的双联玻璃球,以除去氯、二氧化氮、氨等干
核糖核酸酶（胰腺）的测定实验
实验方法原理RNaseⅠ分解 RNA 形成 3'-磷酸单核苷酸和 3'-磷酸多核苷酸，以 Cp 或 Up 结尾形成一个 2'，3'-环状磷酸中间体。实验材料酶样品试剂、试剂盒乙酸缓冲液乙酸铀酰-高氯溶液RNA（酵母）溶液核酸核酸酶仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「
核糖核酸酶（胰腺）的测定实验
基本方案 实验方法原理 RNaseⅠ分解 RNA 形成 3'-磷酸单核苷酸和 3'-磷酸多核苷酸，以 Cp 或 Up 结尾形成一个 2'
核酸定量哪家强？荧光探针VS分光光度法
DNA编码所有的遗传信息，是创造所有生物生命的蓝图。它充当允许遗传物质在世代之间传递的存储设备。而RNA充当读取DNA中存储信息的读卡器。DNA中存储的遗传信息由RNA携带，同时RNA充当核糖体的信使，并在核糖体中合成蛋白质。分子生物学这整个过程称为“中心法则”。 基于核酸的检测的范围继续扩大，关
如何做好荧光定量PCR实验？（二）
2.4 实时多重PCR探针的选择：多重实时PCR的多种含意有两种：一为选择保守的探针和引物，利用不同的染料标记探针，在检测时可根据荧光的颜色来判定不同的产物。另一种为选择保守的引物，扩增不同长度的目的片段，反应中加入SYBRN染料，最后根据不同目的片段的Tm值来判定不同的物品。多重实时PCR的荧光探
实时荧光定量PCR具体实验步骤（二）
5 制备用于绘制梯度稀释标准曲线的DNA模板①针对每一需要测量的基因，选择一确定表达该基因的cDNA模板进行PCR反应。反应体系：序号 反应物 剂量1 10× PCR缓冲液 2.5 ul2 MgCl2 溶液 1.5 ul3 上游引物F 0.5 ul4 下游引物R 0.5 ul5
实时荧光定量PCR原理和实验（二）
归一后的荧光信号再扣除本底，就得到DRn：DRn = Rn,样本- Rn,空白。DRn是最后构建PCR实时扩增曲线的纵坐标。 无论绝对定量还是相对定量，在得到实验结果后，还要考虑数据之间的可比性问题。在实验操作中，取样都是以体积或重量为单位的，但是同样体积或重量的样本所来源的细胞数目并不一样
蛋白质定量实验_胺衍生法
试剂、试剂盒OPA 储存液实验步骤1.于分析前至少 30 min 将 15uL 2-巯基乙醇加人到 5 mL OPA 储存液中, 这一试剂可稳定维持一天。所有荧光样品和相关反应在所有时间内都需要避光。2.蛋白质标准品 (0.2~10 ug/mL) 和未知浓度的待测样品在分析前需要调节 pH 至 8.
甲苯胺蓝染色实验
基本方案 试剂、试剂盒 甲苯胺蓝染料 实验步骤
甲苯胺蓝染色实验
试剂、试剂盒 甲苯胺蓝染料实验步骤 1. 用水稀释甲苯胺蓝染液（按所期望染色程度，凭实验经验决定稀释度，由1：100稀释起始）。 2. 在稀释好的染色液中短暂浸泡玻片，然后在水中浸泡数次，按选定方法进行压片固定
甲苯胺蓝染色实验
甲苯胺蓝是常用的人工合成染料的一种，属于醌亚胺染料类，这类染料一般含有两个发色团，一个是胺基，一个是醌型苯环，来构成色原显色。染料除有发色团外，还要有能使色原对组织及其他被染物产生亲和力的原子团即助色。试剂、试剂盒甲苯胺蓝染料实验步骤1. 用水稀释甲苯胺蓝染液（按所期望染色程度，凭实验经验决定稀释
核酸定量分析方法
核酸定量分析 DNA 或 RNA(以260nm处的吸光值为基础) 1. 制备用蒸馏水稀释过的DNA 或 RNA 样品溶液 ( 典型稀释比为 1:100 或 5:500μl) 2. 使用紫外光源,在260 nm 处测定吸光值,也可以在280 nm 和230 nm 测定吸光值 (260/280 的光吸收
测定渗透压对微生物的影响实验——法二
实验方法原理在等渗溶液中，微生物正常生长繁殖；在高渗溶液（例如高盐、高糖溶液）中，细胞失水收缩，而水分为微生物生理生化反应所必需，失水会抑制其生长繁殖；在低渗溶液中，细胞吸水膨胀，细菌、放线茵霉菌及酵母菌等大多数微生物具有较为坚韧的细胞壁，而且个体较小，因而在低渗溶液中一般不会像无细胞壁的细胞那样容
盐酸萘乙二胺分光光度法测定苯胺类化合物实验过程
样品采集用一支内装5.0ml吸收液的多孔玻板吸收管,以0.5L/min流量,采气20～30L。步骤1、标准曲线的绘制①取八支10ml具塞比色管,按表1配制标准系列。②各管加入0.25%亚硝酸钠溶液0.50ml,摇匀,静置5min,加入2.5%氨基磺酸铵溶液0.50ml,强烈振摇至无小气泡发生为止。放
蛋白质含量的定量测定——双缩脲法（Biuret法）
实验原理具有两个或两个以上肽键的化合物皆有双缩脲反应。在碱性溶液中双缩脲与铜离子结合形成复杂的紫好色复合物。而蛋白质及多肽的肽键与双缩脲的结构类似，也能与Cu2+形成紫红色络合物，其最大光吸收在540nm处。其颜色深浅与蛋白质浓度成正比，而与蛋白质的分子量及氨基酸的组成无关，该法测定蛋白质的浓度范围
蛋白质的定量测定——福林酚法(Folin—酚试剂法)
实验原理 Folin—酚试剂法最早是由Lowry确定的测定蛋白质浓度的基本方法。以后在生物化学领域得到广泛的应用。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的，只是加入了第二种试剂，即Folin—酚试剂，以增加显色量，从而提高了检测蛋白质的灵敏度。这个方法的优点是灵敏度高，比双缩脲法灵敏得多，缺点是费时较
二氨基联苯胺分光光度法原理和应用
二氨基联苯胺分光光度法:本法适用于饮用水及其水源水中总硒的测定。在酸性条件下,3,3’-二氨基联苯胺与硒作用生成黄色化合物,pH在7左右时能被甲苯萃取,比色定量。水样需经混合酸液消化后,将四价以下的无机和有机硒氧化至四价硒,再经筮酸消化将六价硒还原至四价硒,然后测定总硒含量。所用设备、耗材:具塞比色
简述氯硫二苯胺的适应症
1、用于控制精神分裂症，主要用于Ⅰ型精神分裂症（以精神运动性兴奋和幻觉妄想为主），尤其对急性患者效果显著，但不能根治。对慢性精神分裂症患者疗效较差，对Ⅱ型精神分裂症患者无效，甚至加重病情。还可用于治疗其他精神病的兴奋躁动、紧张不安、幻觉、妄想等症状，对忧郁症状及木僵症状的疗效较差。 2、镇吐：
关于氯硫二苯胺的用法用量介绍
1、（1）氯硫二苯胺口服25～75mg，每天2～3次，1～2周内逐渐增至每天400～600mg，2～3次分服。维持量每天100～300mg，2～3次分服。（2）氯硫二苯胺肌内注射：可用于控制严重症状，一般每次25～50mg，深部肌内注射。（3）静脉注射：偶可用于极度躁动患者，每次不超过50mg，
概述氯硫二苯胺的药理作用
1、氯硫二苯胺的抗精神病作用：目前认为，氯硫二苯胺通过阻断与情绪和思维有关的边缘系统的多巴胺受体而起抗精神病作用。而阻断网状结构上行激活系统的α肾上腺素受体，则与镇静安定的作用有关。正常人服用治疗量后，出现安静、活动减少、感情淡漠、注意力降低、对周围事物不感兴趣等反应。安静时可诱导入睡，但易被唤
简述氯硫二苯胺的禁忌症
1、有吩噻嗪类过敏史和骨髓抑制患者禁用氯硫二苯胺。 2、闭角型青光眼、前列腺增生及昏迷患者禁用氯硫二苯胺。 3、尿毒症、严重心血管疾病及肝损害的患者禁用氯硫二苯胺。 4、有癫痫史或有脑器质性病变的患者慎用或禁用氯硫二苯胺。 5、糖尿病、甲状腺功能低下者慎用和禁用氯硫二苯胺。