蛋白质定量实验_胺衍生法
试剂、试剂盒OPA 储存液实验步骤1.于分析前至少 30 min 将 15uL 2-巯基乙醇加人到 5 mL OPA 储存液中, 这一试剂可稳定维持一天。所有荧光样品和相关反应在所有时间内都需要避光。2.蛋白质标准品 (0.2~10 ug/mL) 和未知浓度的待测样品在分析前需要调节 pH 至 8.0-10.5。将 10 检测样品与 1 00xLOPA 储存液 (含 2-巯基乙醇) 混合，于室温下孵育 15 min。3.加入 3 mL 0.5mol/L 的 NaOH, 混勻。4.在激发光为 340nm, 发射光为 440~455nm 处，于荧光比色皿内对荧光进行读数。5.在检测的动态范围内蛋白质浓度和荧光之间的联系应该是线性的，可以用来估计未知样品的浓度。注释相比基于吸光度的蛋白质定量分析方法，这 3 种染料都提供了更好的灵敏度和动态范围。由于染料在水溶液中的水溶性和稳定性更佳，所以 OPA 检测法普遍优于荧光胺检测法。使用胺衍......阅读全文
蛋白质定量实验_胺衍生法
试剂、试剂盒OPA 储存液实验步骤1.于分析前至少 30 min 将 15uL 2-巯基乙醇加人到 5 mL OPA 储存液中, 这一试剂可稳定维持一天。所有荧光样品和相关反应在所有时间内都需要避光。2.蛋白质标准品 (0.2~10 ug/mL) 和未知浓度的待测样品在分析前需要调节 pH 至 8.
M13噬菌体衍生载体的制备实验——载体衍生法
M13噬菌体是一种丝状噬菌体，感染宿主后不裂解细菌细胞，只利用细胞内物质完成自身增殖，组装成完整病毒颗粒后被宿主细胞分泌而出，宿主细胞仍能继续生长分裂。为分子生物学中理想的质粒载体。基因间隔区的有些核苷酸序列即使发生突变、缺失活插入外源DNA片段，也不会影响M13DNA的复制，这为M13DNA构建克
化学衍生法的目的是什么？
色谱技术中的化学衍生法系指在色谱过程中用特殊的化学试剂（一般称为衍生化试剂或标记试剂）使样品成分转变相应的衍生物之后进行分离检测或进行检测的方法。目的为：1、将紫外—可见强吸收功能基团引入被检测对象或将其转变为荧光衍生物，以提高检测灵敏度；2.提高对分析样品的分离和选择性。从是否与HPLC系统联机的
液相色谱柱后衍生法特点
保证舌尖上的安全，是国家十三五计划的重要战略。国家卫计委印发的《食品安全标准与监测评估“十三五”规划(2016-2020年)》提出在“十三五”期间进一步完善食品安全标准与监测评估工作体系，制订、修订300项食品安全国家标准，自修订起陆续实施。 3月1日起，新实施的这一批国家标准包括GB 47
关于气相色谱卤化衍生化法介绍
在目标化合物中引入卤原子后可使用ECD检测器，提高检测的灵敏度，同时可以改善挥发性和稳定性，常用的卤化衍生化方法如下： （1）卤素法：用卤素直接作为衍生化试剂处理样品，卤素的作用是加成或取代 （2）卤化氢法：常用HCl和HBr为衍生化试剂与不饱和链发生加成反应或与羟基发生置换反应 （3）N
高效液相色谱柱后衍生法特点
保证舌尖上的安全，是国家十三五计划的重要战略。国家卫计委印发的《食品安全标准与监测评估“十三五”规划(2016-2020年)》提出在“十三五”期间进一步完善食品安全标准与监测评估工作体系，制订、修订300项食品安全国家标准，自修订起陆续实施。 3月1日起，新实施的这一批国家标准包括GB 478
GCMS法分析亚硝基胺
亚硝胺是公认的致癌物质，国内外有人应用70多种亚硝胺类化合物，在一千多只大鼠内做试验，几乎所有脏器都可诱发癌瘤，所以，有人把亚硝胺称作“广谱”致癌物。 亚硝胺类化合物普遍存在于谷物、牛奶、干酪、烟酒、熏肉、烤肉、海鱼、罐装食品以及饮水中。不新鲜的食品（尤其是煮过久放的蔬菜）内亚硝酸盐的含量较高。
交叉配血凝聚胺法
交叉配血-凝聚胺法： 1.原理 凝聚胺（polymatching）法首先利用低离子介质降低溶液的离子强度，减少红细胞周围的阳离子云，促进血清（浆）中的抗体与红细胞相应抗原结合，再加入带亚电荷的高价阳离子多聚物-凝聚胺溶液，中和红细胞表面的负电荷。缩短细胞间距，形成可逆的非特异性聚集，并使IgG型抗
交叉配血（凝聚胺法）
1. 原理凝聚胺（polymatching）法首先利用低医学教育网离子介质降低溶液的离子强度，减少红细胞周围的阳离子云，促进血清（浆）中的抗体与红细胞相应抗原结合，再加入带亚电荷的高价阳离子多聚物-凝聚胺溶液，中和红细胞表面的负电荷，缩短细胞间距，形成可逆的非特异性聚集，并使IgG型抗体直接凝集红细
纤维蛋白原Clauss法与PT衍生法的差异
纤维蛋白原（Fib）除了诊断低纤维蛋白原血症和溶栓监测等之外，可以作为动脉的心血管事件的预测指标，因此用于筛查时就需要足够标准化和良好的重现性，以便于临床判断或解释。除了Fib抗原分析之外，在临床常规分析中Clauss方法无疑是最好的选择，但是目前仍有为数不少的临床实验室用PT衍生法的计算值报告结果
反相高效液相色谱柱前衍生荧光检测法测定游离多胺
反相高效液相色谱柱前衍生荧光检测法测定游离多胺摘 要 合成新型荧光试剂1, 22苯并23, 42二氢咔唑292异丙基氯甲酸酯(BCIC)作为柱前衍生化试剂,在Eclip se XDB2C8色谱柱上,通过梯度洗脱对5种多胺进行了分离和在线质谱定性。在乙腈中,以硼酸钠缓冲液(pH 9)为催化剂, 40
国标盐酸萘乙二胺法
硼酸饱和液调节ph值为弱酸性。亚铁氰化钾溶液乙酸锌溶液，使蛋白质沉淀。亚铁氰化钾与乙酸锌生成亚铁氰化锌与蛋白质发生共沉淀现象。对氨基苯磺酸溶液使生物体中的亚硝酸根转化为重氮根，即对重氮基苯磺酸。盐酸萘乙二胺溶液与重氮基苯磺酸形成偶氮类化合物，显色剂。标准亚硝酸钠溶液组制定工作曲线所用。
聚胺法分离染色质
聚胺法分离染色质试剂、试剂盒：秋水仙胺、聚胺缓冲液实验步骤：有丝分裂中细胞的同步化37℃，用合适的含有 FCS，抗生素和其他必要成分的培养基培养细胞。2. 收集有丝分裂细胞前 10~16 小时在培养基中以 0.06 μg/ml 的浓度加入秋水仙胺。收获细胞并在聚胺缓冲液中裂解3. 收获细胞。对于悬浮
柱后衍生装置可用于在线衍生
柱后衍生装置，无缝兼容任何品牌液相色谱仪。用于在线衍生，检测氨甲酯类农药及残留、草甘膦等残留。操作简单，易于维护。 柱后衍生装置特征：1.快速且易于设置只需连接一个来自色谱柱的入口。只需连接一个进入检测器的出口。2.模块式设计可选1个或2个反应器。可选1个或2个衍生剂泵。3.久经考验的自清洗泵，大大
什么是衍生化？衍生化实验分类？
衍生化技术就是通过化学反应将样品中难于分析检测的目标化合物定量的转化成另一易于分析检测的化合物，通过后者的分析检测可以对目标化合物进行定性和（或）定量分析。该技术在色谱分析中得到广泛应用。按衍生化反应发生在色谱分离之前还是之后进行，可将衍生化分为柱前衍生化和柱后衍生化。1. 柱前衍生化的目的柱前衍生
柱前衍生法测量游离脂肪酸含量的介绍
油脂水解产物中游离脂肪酸的检测主要利用气相色谱法, 但预处理步骤较为繁琐, 需要通过改变水解产物pH 值或利用薄层色谱预先将游离脂肪酸分离。柱前衍生HPLC 法测定游离脂肪酸不需要分离游离脂肪酸的前处理, 且HPLC 检测分离温度较低, 脂肪酸热降解程度大大降低, 具有气相色谱法无可比拟的优越性
大鼠基质细胞衍生因子1(SDF1)ELISA检测法
大鼠基质细胞衍生因子-1(SDF-1)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 SDF-1 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 SDF-1与单抗结合，加入生物素化的抗大鼠SDF-1，形成免疫复合物连接在板上，辣根
α－萘胺法植物根系活力测定实验
实验方法原理吸附在根表面的α－萘胺会被植物根所氧化，生成红色的2－羟基－1－萘胺沉淀于具有氧化力的根表，使这部分根染成红色。根对α－萘胺的氧化力与其呼吸强度，主要是与呼吸酶过氧化物酶活性有着密切关系，据认为α－萘胺氧化过程是在过氧化物酶的催化下进行的，该酶的活力愈强，对α－萘胺的氧化力就愈强，染色也
α－萘胺法植物根系活力测定实验
实验方法原理 吸附在根表面的α－萘胺会被植物根所氧化，生成红色的2－羟基－1－萘胺沉淀于具有氧化力的根表，使这部分根染成红色。根对α－萘胺的氧化力与其呼吸强度，主要是与呼吸酶过氧化物酶活性有着密切关系，据认为α－萘胺氧化过程是在过氧化物酶的催化下进行的，该酶的活力愈强，对α－萘胺的氧化力就愈强，染色
植物根系活力测定(α萘胺氧化法)
实验概要掌握用α-萘胺氧化法测定植物根系活力。实验原理植物根系是活跃的吸收器官和合成器官，根的生长情况和代谢水平即根系活力直接影响植物地上部的生长和营养状况以及产量，是植物生长的重要生理指标之一。植物根系能氧化α-萘胺，生成红色的α-羟基-1-萘胺，并沉淀于有氧化能力的根表面，使这部分跟染成红色。根
α－萘胺法植物根系活力测定实验
实验方法原理吸附在根表面的α－萘胺会被植物根所氧化，生成红色的2－羟基－1－萘胺沉淀于具有氧化力的根表，使这部分根染成红色。根对α－萘胺的氧化力与其呼吸强度，主要是与呼吸酶过氧化物酶活性有着密切关系，据认为α－萘胺氧化过程是在过氧化物酶的催化下进行的，该酶的活力愈强，对α－萘胺的氧化力就愈强，染色也
大鼠基质细胞衍生因子1a(SDF1a)ELISA检测法
大鼠基质细胞衍生因子-1a(SDF-1a)ELISA试剂盒 (用于血浆、细胞培养上清液和生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 CXCL12/SDF-1a 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 SDF-1a与单抗结合，加入生物素化的抗大鼠SDF-1a，形成免疫复合物连
实验室分析方法气相色谱卤化衍生化法
在目标化合物中引入卤原子后可使用ECD检测器,提高检测的灵敏度,同时可以改善挥发性和稳定性,常用的卤化衍生化方法如下:(1)卤素法:用卤素直接作为衍生化试剂处理样品,卤素的作用是加成或取代。(2)卤化氢法:常用HCl和HBr为衍生化试剂与不饱和链发生加成反应或与羟基发生置换反应。(3)N-溴代丁二酰
黄曲霉毒素光化学柱後衍生法的原理
分子结构和化学环境是影响物质发射荧光和荧光强度的重要因素.至少具有一个芳环或具有多个共轭双键的有机化合物容易产生荧光,稠环化合物也会产生荧光.饱和的或只有一个双键的化合物,不呈现显著的荧光.最简单的杂环化合物,如吡啶,呋喃,噻吩和吡咯等,不产生荧光.取代基的性质对荧光体的荧光特性和强度均有强烈影响.
柱前衍生和柱后衍生分析说明
1、为什么要衍生? 衍生化最为主要的目的就是提高目的物的可检测性。对于GC来讲,多数是为了增强目的物挥发性或者改善目的物极性;对于HPLC来讲多数是为了提高检测器对目的物的相应。 2、 衍生化分类:柱前衍生和柱后衍生。柱前衍生是在经过分析柱前使分析物与衍生剂反应,反应产物在分析柱上实现分离,
柱前衍生和柱后衍生有什么不同？
柱前衍生和柱后衍生。柱前衍生是在经过分析柱前使分析物与衍生剂反应，反应产物在分析柱上实现分离，实际分离的是衍生产物，检测的也是衍生产物；柱后衍生是分离物在分析柱中实现分离后，在衍生池内与衍生剂反应，在柱子中分离的是目的物，在检测器处检测的衍生产物。 柱前衍生优点是，对设备要求不高，可以手工衍生
柱前衍生和柱后衍生有什么不同？
柱前衍生和柱后衍生。柱前衍生是在经过分析柱前使分析物与衍生剂反应，反应产物在分析柱上实现分离，实际分离的是衍生产物，检测的也是衍生产物；柱后衍生是分离物在分析柱中实现分离后，在衍生池内与衍生剂反应，在柱子中分离的是目的物，在检测器处检测的衍生产物。 柱前衍生优点是，对设备要求不高，可以手工衍生
乙二胺偶氮光度法操作步骤
操作步骤(1)校准曲线的绘制于七个25 ml具塞比色管中,分别加入0、0.25、0.50、1.00、2.00、3.00、4.00 ml苯胺标准使用溶液,各加水至10 ml,摇匀。加0.6 ml 10%硫酸氢钾溶液调节pH1.5~2.0(精密pH试纸测试),加1滴5%亚硝酸钠溶液,摇匀,放置3 min
核苷酸衍生物尿苷酸衍生物介绍
在糖代谢中起着重要作用，UDP是单糖的活化载体，参与糖与双糖多糖的生物合成，如UDP－半乳糖是乳糖的前体，UDP－葡萄糖是糖原的前体，UDP－N－乙酰葡糖胺与糖蛋白生物合成有关。UDP和 UTP也是一类高能磷酸化合物。
色谱仪的柱前衍生和柱后衍生
色谱仪的衍生化主要是为了提高目的物的可检测性。对于气相色谱，主要是为了增强目的物的挥发性或改善目的物的极性。对于液相色谱仪，主要是为了提高检测器对目的物的响应。一、衍生化分类：1、柱前衍生：在分析物经过色谱柱前与衍生剂反应，反应产物在色谱柱上实现分离，实际分离的是衍生产物，检测的也是衍生产物。2、柱