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细胞破碎和蛋白质溶解实验_​(高速)珠磨法

实验方法原理该法应视为研磨法的扩展。它用玻璃珠替代磨料。小量样品(湿重不超过 3 g)可在试管内进行,大量样品需使用特制的高速珠磨机。实验材料酵母试剂、试剂盒缓冲液仪器、耗材高速珠磨机实验步骤1. 0.1~3 g 湿重细胞混悬在等体积缓冲液内。容器建议选用结实的聚乙烯试管;2. 每克湿重细胞加入 1~3 g 预冷的玻璃珠;3. 用混旋搅拌器最大强度混旋 3~5 次,每次 1 min, 两次之间置冰上冷却 1 min。注意事项1. 本法最常用来破碎酵母。2. 玻璃珠直径 500 um,用前如下处理:浓盐酸洗后,双蒸水洗至中性,烘干。用前预冷。3. 混旋时易漏出,宜用有密封圈的螺旋盖关紧试管或用石蜡膜封好。......阅读全文

样品前处理-细胞破碎

  细胞破碎技术是指利用外力破坏细胞膜和细胞壁,使细胞内容物包括目的产物成分释放出来的技术,由于细菌、酵母、真菌、植物都有细胞壁,但成分不同,且同类细胞结成的网状结构不同,因此其细胞壁的坚固程度不同,总体呈现递增态势。动物细胞虽没有细胞壁,但具有细胞膜,也需要一定的细胞破碎方法来破膜,达到提取产物的