心肌肌原纤维ATP酶的提取和活性测定——差速离心法
实验材料心室肌试剂、试剂盒咪唑氯化镁氯化钾氯化钙TCA测磷标准液测磷显色液Triton X-100ATP仪器、耗材剪刀玻璃匀浆器离心机离心管漩涡震荡仪试管量筒显微镜心肌肌原纤维ATPase为Ca2+、Mg2+ATPase，分解ATP成ADP和Pi，并释放能量，提供肌原纤维收缩需要。肌原纤维的提取采用Salaro和Pagani法，主要采用差速离心和Triton X-100脱膜法。酶活性测定方法与肌浆网Ca2+ATPase的测定方法基本相同。......阅读全文
酶活性的测定方法
一般采用测定酶促反应初速度的方法来测定活力，因为此时干扰因素较少，速度保持恒定。反应速度的单位是浓度/单位时间，可用底物减少或产物增加的量来表示。因为产物浓度从无到有，变化较大，而底物往往过量，其变化不易测准，所以多用产物来测定
酶活性测定的方式
酶促反应速度的测定可采用两种方式： 一、测定完成一定量反应所需的时间； 二、测定单位时间内的酶促反应量。前者称为终点法，后者称为动力学法。 终点法 该方式是在特定条件下，将样品中要检知的酶作用一定量的底物，然后根据反应进行到某一程度（即达到某一指标）所需要的时间长短来估计酶的活力。 其
酶活性的测定实验
连续性检测 实验方法原理 1.酶的量或浓度可以用摩尔量表示，或者用酶单位的活性表示。酶活力=每单位时间转化的底物摩尔数=速率×反应体积。酶活性是存在的活性酶量
酶活性的测定实验
酶活性的测定可应用于：（1）酶动力学的研究；（2）酶抑制的研究。实验方法原理1.酶的量或浓度可以用摩尔量表示，或者用酶单位的活性表示。酶活力=每单位时间转化的底物摩尔数=速率×反应体积。酶活性是存在的活性酶量的量度，取决于指定的条件。SI单位是katal，1 katal = 1 mol /s，更实际
差速离心的测定方法
⑴样品：蛋白质⑵样品溶液与离心：将样品溶于缓冲液中，用一定规格的双槽分析池，一边加入溶液一边加入溶剂。分析池与平衡池平衡重量，使平衡池比分析池轻0.5g以内，然后分别装入分析转头。抽真空。开Schlieren光光源，选择工作速度，室温离心。转动腔达到真空后离以机开始运转加速，此时在观察窗口可以看到离
酶活性测定实验
实验方法原理U/L＝K•ΔA/min实验步骤1. 诱导试剂．2. 开机预温达37度．3. 选取测定程序．4. 测试：加入试剂准确计的30秒后测定读取吸光度．以后每隔30秒测定一次．5. 实验结果：计算ΔA/min求出测定结果．
酶活性测定实验
实验方法原理U/L＝K•ΔA/min实验步骤1. 诱导试剂．2. 开机预温达37度．3. 选取测定程序．4. 测试：加入试剂准确计的30秒后测定读取吸光度．以后每隔30秒测定一次．5. 实验结果：计算ΔA/min求出测定结果．
多酚氧化酶活性的测定（氧电极法）
原理 多酚氧化酶是一种含铜的氧化酶，能使一元酚和二元酚氧化生成醌。多酚氧化酶活性可以用氧电极测量反应耗氧的速度，或用比色法测量产物的形成，常用的底物如儿茶酚（邻苯二酚）和多巴（3，4－二羟苯丙氨酸）。 仪器药品 测氧仪
单胺氧化酶活性测定_同位素法
实验材料大鼠试剂、试剂盒磷酸钠缓冲液蒸馏水盐酸苯乙胺甲苯5-羟色胺双草酸盐β-乙基-苯乙胺盐酸盐苯-醋酸乙酯闪烁液仪器、耗材制冰机水浴锅试管试管架计数瓶离心机离心管移液枪漩涡振荡仪单胺氧化酶(monoamine oxidase )为催化单胺氧化脱氨反应的酶。缩写MAO，也有称为含黄素胺氧化酶的。EC
细胞生长的ATP检测[荧光素酶法]
1．ATP反应液（Bio-Orbit）是粉末状混合物，含有荧光素、荧光素酶、0.5mmol醋酸镁、50mg BSA和0.1μmol无机焦磷酸。在4℃可以保存1个月。用前用10ml含2mmol/L EDTA的0.1mol/L pH7.75 Tris-醋酸缓冲液稀释。稀释液分装后可在－20℃长期保存。2
细胞生长的ATP检测[荧光素酶法]
1、ATP反应液（Bio-Orbit）是粉末状混合物，含有荧光素、荧光素酶、0.5mmol醋酸镁、50mg BSA和0.1μmol无机焦磷酸。在4℃可以保存1个月。用前用10ml含2mmol/L EDTA的0.1mol/L pH7.75 Tris-醋酸缓冲液稀释。稀释液分装后可在－20℃长期
蛋白的生物活性测定方法（结晶紫法和MTT法）
结晶紫法活性测定1、取对数生长期的人胰腺癌SW1990细胞，用0.25%胰酶（以无钙镁离子PBS溶液配制，pH7.4）消化后，加入RPMI-1640培养基（10%新生牛血清，100U/ml青霉素，100U/ml链霉素，pH7.2）吹打细胞，使形成细胞悬液。进行细胞计数，使细胞数为2~2.5×105个
液泡质子ATP酶的功能和特点
液泡质子ATP酶由液泡膜H+-ATP酶及液泡膜焦磷酸酶组成。其中液泡膜H+-ATP酶有以下特点：分子量400KD，水解ATP的活性位点在液泡膜的细胞质一侧。H+/ATP计量约为2～3。Cl-、Br-、I-等对该酶有激活作用。该酶可被硝酸盐抑制，但不被钒酸盐抑制。液泡膜H+-ATP酶与跨液泡膜的物质转
P型ATP酶的定义和功能
中文名称P型ATP酶英文名称P-type ATPase定 义分布于各种生物细胞质膜中的ATP动力泵的一类，含有两个相同的催化性α亚基，转运时至少有一个α亚基被磷酸化（phosphorylated）故名。包括有植物、真菌和细菌的H+泵和高等真核生物中的钠钾ATP酶、钙酶等。应用学科细胞生物学（一级学
P型ATP酶的功能和特点
中文名称P型ATP酶英文名称P-type ATPase定 义分布于各种生物细胞质膜中的ATP动力泵的一类，含有两个相同的催化性α亚基，转运时至少有一个α亚基被磷酸化（phosphorylated）故名。包括有植物、真菌和细菌的H+泵和高等真核生物中的钠钾ATP酶、钙酶等。应用学科细胞生物学（一级学
单胺氧化酶活性测定_高效液相色谱法
实验材料大鼠试剂、试剂盒苯胺β-苯乙胺优降宁过氯酸苯甲醛磷酸钠缓冲液甲醇仪器、耗材HPLC紫外检测器制冰机水浴锅离心机离心管移液枪试管试管架比色皿酶标仪微量注射器单胺氧化酶(monoamine oxidase )为催化单胺氧化脱氨反应的酶。缩写MAO，也有称为含黄素胺氧化酶的。EC1．4．3．4。作
NK细胞活性测定实验——乳酸脱氢酶释放法
实验方法原理乳酸脱氢酶（LDH）存在于细胞内，正常情况下，不能透过细胞膜。当细胞受到损伤时，由于细胞膜通透性改变，LDH可从细胞内释放至培养液中。释放出来的LDH再催化乳酸的过程中，使氧化型辅酶Ⅰ（NAD+）变成还原型辅酶（NADH2），后者再通过递氢体－吩嗪二甲酯硫酸盐（PMS）还原碘硝基氯化氮唑
脂肪酶的活性测定
方法：⒈粗酶液的制备用电子天平分别称取粗脂肪酶0.010 g、0.020 g 和0.030 g， 用蒸馏水溶解并定容至100 mL， 配成浓度分别为0.01%、0.02% 和0.03%的粗酶液。⒉实验设计本实验以10 mL色拉油为底物，以酶用量、水解温度、反应时间为因素，通过酸价的测定选定其水解的最
脂肪酶的活性测定
方法：⒈粗酶液的制备用电子天平分别称取粗脂肪酶0.010 g、0.020 g 和0.030 g， 用蒸馏水溶解并定容至100 mL， 配成浓度分别为0.01%、0.02% 和0.03%的粗酶液。⒉实验设计本实验以10 mL色拉油为底物，以酶用量、水解温度、反应时间为因素，通过酸价的测定选定其水解的最
淀粉酶活性的测定
一、原理 淀粉酶（amylase）包括几种催化特点不同的成员，其中α－淀粉酶随机地作用于淀粉的非还原端，生成麦芽糖、麦芽三糖、糊精等还原糖，同时使淀粉浆的粘度下降，因此又称为液化酶；β－淀粉酶每次从淀粉的非还端切下一分子麦芽糖，又被称为糖化酶；葡萄糖淀粉酶则从淀粉的非还原端每次切下一个葡萄糖。
差速离心法的测定方法
⑴样品：蛋白质⑵样品溶液与离心：将样品溶于缓冲液中，用一定规格的双槽分析池，一边加入溶液一边加入溶剂。分析池与平衡池平衡重量，使平衡池比分析池轻0.5g以内，然后分别装入分析转头。抽真空。开Schlieren光光源，选择工作速度，室温离心。转动腔达到真空后离以机开始运转加速，此时在观察窗口可以看到离
酶活性测定方法对比
1.按反应时间分类法：20世纪50年代以前大都使用固定时间法。这种方法是以酶催化反应的平均速度来计算酶的活性，现多已不用。50年代中期开始采用连续监测法。这种方法用自动生化分析仪上完成，可以测酶反应的初速度，其结果远比固定时间法准确，在高浓度标本尤为明显，但本法也受到反应时间，反应温度，试剂等的
酶活性测定方法对比
1.按反应时间分类法：20世纪50年代以前大都使用固定时间法。这种方法是以酶催化反应的平均速度来计算酶的活性，现多已不用。50年代中期开始采用连续监测法。这种方法用自动生化分析仪上完成，可以测酶反应的初速度，其结果远比固定时间法准确，在高浓度标本尤为明显，但本法也受到反应时间，反应温度，试剂等的影
酶活性测定方法对比
1.按反应时间分类法：20世纪50年代以前大都使用固定时间法。这种方法是以酶催化反应的平均速度来计算酶的活性，现多已不用。50年代中期开始采用连续监测法。这种方法用自动生化分析仪上完成，可以测酶反应的初速度，其结果远比固定时间法准确，在高浓度标本尤为明显，但本法也受到反应时间，反应温度，试剂等的影响
酶反应法提取番茄红素的原理和工艺
原理：酶反应法主要是利用番茄皮自身所含有的酶发生反应来提取番茄红素。方法是在碱性条件下，使番茄皮中的果胶酶和纤维素酶反应，分解果胶和纤维素，使得番茄红素的蛋白质复合物从细胞中溶出。工艺流程：清洗新鲜番茄（粗称）→100℃热烫去皮（5～7s完成）→打浆→加热钝化酶活（85℃，20min）→冷却到55℃
固碳关键酶RubisCO酶活性提取研究获进展
由中国科学院亚热带农业生态研究所副所长（主持工作）吴金水研究员领衔的农业生态过程方向研究团队近日在土壤微生物固碳关键酶RubisCO酶活性提取与测定方法研究方面取得了新进展。 卡尔文循环（Calvin–Benson–Bassham cycle）是光能自养生物和化能自养生物同化CO2的主要途径，
酶法提取法提取胶原蛋白的相关介绍
酶法提取是指可溶性胶原和酸溶性胶原被提取后，需用一些蛋白酶，如胶原酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰凝乳蛋白酶等水解，得到不同的酶促溶性胶原蛋白。所使用的蛋白酶主要分3种：动物蛋白酶（如胰蛋白酶，胃蛋白酶），植物蛋白酶（如木瓜蛋白酶，菠萝蛋白酶），微生物蛋白酶（如碱性蛋白酶，中性蛋白酶）。在对酶法水解
酶和抗体活性、结合物中酶含量及结合率的测定
⑴ 酶与抗体的活性 常用琼脂扩散或免疫电泳法，使抗原与抗体形成沉淀线，经PBS漂洗1天，再以蒸馏水浸泡1小时，将琼脂凝胶片浸于酶底物溶液中着色，如果出现应有的颜色反应，再用生理盐水浸泡，颜色仍然不褪，表示结合物既有酶的活性，也有抗体活性。良好的结合物在显色后，琼扩滴度应在1:16以上。另一个测定
ATP合成的部位——ATP酶的相关介绍
质子反向转移和合成ATP是在ATP酶(腺苷三磷酸酶 adenosine triphosphatase，ATPase)上进行的。叶绿体内囊体膜上的ATP酶也称偶联因子(coupling factor)或CF1-CF0复合体。叶绿体的ATP酶与线粒体、细菌膜上的ATP酶结构十分相似，都由两个蛋白复合
亚硝酸还原酶的酶活性测定
NiRs是胞内酶，其氧化还原反应过程中需要供体电子，且大多需要在厌氧条件下进行。因此体外检测亚硝酸还原酶时需要在密闭无氧且有电子供体的情况下才能进行检测。电子供体有甲基紫精、连二亚硫酸钠和硫代硫酸钠等 。