表面等离子共振检测蛋白相互作用实验——用BlAcore芯片

实验材料CM-5 葡聚糖芯片(BIAcore)配体蛋白靶蛋白试剂、试剂盒PBS胺-偶联试剂盒(详见「其他」)仪器、耗材BIAcore SPR 设备BIA 评估软件(point-and-click)实验步骤1. 插入一个新的 BIAcore CM-5 葡聚糖芯片。2. 用 PBS 作为工作液以持续流动系统平衡系统。3. 用实验确定最佳缓冲条件和浓度使非特异性结合到羧酸酯化葡聚糖上的靶蛋白和配体蛋白最小化。对带有高度带负电荷的葡聚糖非特异吸收的配体可能变性,并且在溶液中可非特异性地结合靶蛋白。4. 插入一张新的芯片。5. 在 N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)存在的情况下通过注入 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(EDC)活化葡聚糖羧酸酯。6. 在低 pH 的乙酸钠缓冲液中注入配体蛋白,使得葡聚糖上存在足够的蛋白量。同做几个平行实验,在这些平行实验中变化葡聚糖上配体蛋白的密度。改变接触时间和蛋白质浓度,进行 7~14 步中的操作......阅读全文

表面等离子共振检测蛋白相互作用实验——用-BlAcore-芯片

实验材料CM-5 葡聚糖芯片(BIAcore)配体蛋白靶蛋白试剂、试剂盒PBS胺-偶联试剂盒(详见「其他」)仪器、耗材BIAcore SPR 设备BIA 评估软件(point-and-click)实验步骤1. 插入一个新的 BIAcore CM-5 葡聚糖芯片。2. 用 PBS 作为工作液以持续流动

表面等离子共振检测蛋白相互作用实验——用-NTASAM-芯片

实验材料NTA-SAM 芯片配体蛋白靶蛋白(组氨酸标记)试剂、试剂盒PBS/HeBSNaOHNi(II)SO4仪器、耗材BIAcore SPR 设备BIA 评估软件(point-and-click)实验步骤1. 插入一张 NTA-SAM 芯片并使用 PBS 或者 HeBS 作为运转缓冲液。2. 注入

表面等离子共振检测蛋白相互作用实验

用 BlAcore 芯片 用 NTA-SAM 芯片             实验方法原理 实验材料 CM

表面等离子共振检测蛋白相互作用实验

实验方法原理 实验材料 CM-5 葡聚糖芯片(BIAcore)配体蛋白靶蛋白试剂、试剂盒 PBS胺-偶联试剂盒(详见「其他」)仪器、耗材 BIAcore SPR 设备BIA 评估软件(point-and-click)实验步骤 1. 插入一个新的 BIAcore CM-5 葡聚糖芯片。2. 用 PBS

表面等离子共振技术在蛋白蛋白相互作用的应用(二)

控制软件SensiQ的控制软件在原始反应曲线生成时,同时并实时获取和展示两个通道内的数据。参照通道内的数据被减除,以补偿热漂移、非特异性结合、总折射指数移相等效应,从而得到清晰高质的实验数据。控制软件在反应曲线上简单加入报告点,用来确定样品注入后产生的结合反应。报告点的添加可在实验中的任何时候由人工

表面等离子共振技术在蛋白蛋白相互作用的应用(一)

应用领域结合特异性、抗体选择、抗体质控、疾病机制、药物发明、生物治疗、生物处理、生物标记物、配体垂钓、基因调控、细胞信号传导、亲和层析、结构-功能关系、小分子间相互作用等检测原理表面等离子共振(SPR)是一种光学现象,可被用来实时跟踪在天然状态下生物分子间的相互作用。这种方法对生物分子无任何损伤,且

表面等离子共振的检测原理

  综合运用  表面等离子共振广泛应用于研究结合特异性、抗体选择、抗体质控、疾病机制、药物发明、生物治疗、生物处理、生物标记物、配体垂钓、基因调控、细胞信号传导、亲和层析、结构-功能关系、小分子间相互作用等。  检测原理  表面等离子共振(SPR)是一种光学现象,可被用来实时跟踪在天然状态下生物分子

简介表面等离子共振的实验原料

  蛋白质–蛋白质(Protein–Protein)  多肽–受体(Peptide–Receptor)  抗体–抗原(Antibody–Antigen)  膜受体–配体(Membrane Receptor–Ligand)  凝集素–聚糖/糖蛋白(Lectin–Polysacharride/Glyco

表面等离子共振实验的调和方法

  任何一对亲和分子,一个(靶分子)被键合在生物传感器表面,另一个(分析物)被置于溶液中。当含有分析物的溶液流经靶分子键合的生物传感器表面时,亲和性复合物生成。  SensiQ配备双通道流动注射分析式微射流系统,内有85nL流动池。SensiQ使用一次性的SPR生物传感器,装卸简便。生物传感器表面包

表面等离子共振技术检测乳铁蛋白的介绍

  以临界角入射到不同折射率的两种金属介质界面的入射光线可以引起金属产生自由的电子共振,电子吸收光能量使反射光大幅减弱,能够使反射光在一定角度内完全消失的入射角称为SPR角。SPR角随介质表面折射率变化而变化,而折射率的变化又与介质表面结合的分子质量成正比,因此可以通过对生物反应过程中SPR角的动态

表面等离子共振的等离子波

  等离子体通常指由密度相当高的自由正、负电荷组成的气体,其中正、负带电粒子数目几乎相等。把金属表面的价电子看成是均匀正电荷背景下运动的电子气体,这实际上也是一种等离子体。当金属受电磁干扰时,金属内部的电子密度分布会变得不均匀。因为库仑力的存在,会将部分电子吸引到正电荷过剩的区域,被吸引的电子由于获

利用-BIAcore-分析相互作用的蛋白质

BIAcore表面等离子共振广泛应用于:(1)研究各种生物分子(如多肽、蛋白质、寡核苷酸,以及病毒、细菌、小分子化合物)之间的相互作用过程;(2)特异性抗体检测或质控、疾病机制、药物筛选;(3)相关药物动力学实时监测、配体垂钓、免疫调节、结构-功能关系等。实验方法原理Biacore是基于表面等离子体

表面等离子共振生物分子相互作用分析基于SPR原理

  生物分子相互作用分析是基于SPR原理的新型生物传感分析技术,无须进行标记,也可以无须纯化各种生物组分。在天然条件下通过传感器芯片实时、原位和动态测量各种生物分子如多肽、蛋白质、寡核苷酸、寡聚糖,以及病毒、细菌、细胞、小分子化合物之间的相互作用过程。表面等离子共振是表面增强拉曼的重要增强机理之一,

表面等离子共振的技术展望

  随着 SPR 技术成为分析生物化学、药物研发和食物监控领域中的一个不可缺少的部分 ,SPR 生物传感器的应用将更加趋向多样化 , 特别是它在小分子检测和脂膜领域的新兴应用将使其在未来的药物发现和膜生物学中扮演一个越来越重要的角色。 近几年 , 其发展尤为迅猛 , 随着 SPR 仪器的不断完善和生

表面等离子共振SPR光学原理

  我们在前面提到光在棱镜与金属膜表面上发生全反射现象时,会形成消逝波进入到光疏介质中,而在介质(假设为金属介质)中又存在一定的等离子波。当两波相遇时可能会发生共振。当消逝波与表面等离子波发生共振时,检测到的反射光强会大幅度地减弱。能量从光子转移到表面等离子,入射光的大部分能量被表面等离子波吸收,使

利用-BIAcore-分析相互作用的蛋白质

            实验方法原理 Biacore是基于表面等离子体共振(SPR)技术来实时跟踪在天然状态下生物分子间的相互作用,无需任何标记物。表面等离子体共振(surface plasmonresonance,SPR)是一种光学现象,在传感芯片发生全反

表面等离子共振的QDATTM分析软件

  反应曲线的分析以及其后的动力学和亲和性数据测算通常繁琐费时。SensiQ的QDATTM分析软件极大地简化了数据分析过程,为研究人员的动力学和亲和性测定提供了简单、省时、可信的手段。  QDATTM是在Biologic Software公司应用广泛的Clamp and Scrubber架构之上开发

表面等离子共振的控制软件介绍

  SensiQ的控制软件在原始反应曲线生成时,同时并实时获取和展示两个通道内的数据。参照通道内的数据被减除,以补偿热漂移、非特异性结合、总折射指数移相等效应,从而得到清晰高质的实验数据。控制软件在反应曲线上简单加入报告点,用来确定样品注入后产生的结合反应。报告点的添加可在实验中的任何时候由人工进行

简介表面等离子共振的技术特点

  SPR 光学生物传感器经过 20 年来的发展 , 已经成为生命科学和制药领域的一种重要的研究工具。与传统的相互作用技术如超速离心,荧光法,热量测定法等相比,SPR生物传感器[1]具有如下显著特点:  实时检测,能动态地监测生物分子相互作用的全过程  无需标记样品,保持了分子活性  样品需要极少,

表面等离子共振技术的背景介绍

  表面等离子共振技术,英文简写SPR,是从20世纪90年代发展起来的一种新技术,其应用SPR原理检测生物传感芯片(biosensor chip)上配位体与分析物之间的相互作用情况,广泛应用于各个领域。  1902年,Wood在一次光学实验中,首次发现了SPR现象并对其做了简单的记录,但直到39年后

大分子相互作用仪

大分子相互作用仪。又称光学表面等离子共振生物分析仪。BIACORE是基于表面等离子共振(surface Plasmon resonance, SPR)开发的新型生物分析传感技术。该技术的3个核心部分是传感器芯片,SPR光学检测系统和微射流卡盘。实验时,现将一种生物分子固定在传感器的葡聚糖表面,将

大分子相互作用仪的简介

  大分子相互作用仪。又称光学表面等离子共振生物分析仪。BIACORE是基于表面等离子共振(surface Plasmon resonance, SPR)开发的新型生物分析传感技术。该技术的3个核心部分是传感器芯片,SPR光学检测系统和微射流卡盘。实验时,现将一种生物分子固定在传感器的葡聚糖表面,将

大分子相互作用仪

大分子相互作用仪。又称光学表面等离子共振生物分析仪。BIACORE是基于表面等离子共振(surface Plasmon resonance, SPR)开发的新型生物分析传感技术。该技术的3个核心部分是传感器芯片,SPR光学检测系统和微射流卡盘。实验时,现将一种生物分子固定在传感器的葡聚糖表面,将

表面等离子共振的商业化系统

  表面等离子共振已经在商业化的检测仪器中应用。目前最广泛使用的是Biacore Life Sciences公司生产的Biacore系列。Biacore Life Sciences现已被General Electric收购。其它表面等离子共振的商业仪器还有例如ICx的SensiQ等。  SensiQ

表面等离子共振仪器结构及工作原理

  表面等离子共振仪核心部件包括光学系统、传感器芯片、液体处理系统三个主要部分,其他的组成部分包括LED状态指示器及温度控制系统等。  光学系统  能够产生和测量SPR信号的光电组分称为光学检测单元。  传感器芯片  传感器的芯片是其最为核心的部件。在SPR技术中必须首先有一个生物分子偶联在传感片上

表面等离子共振的消逝波的介绍

  根据法国物理学家菲涅尔所提出的光学定理:可知,当光从光密介质射入光疏介质,入射角增大到某一角度,使折射角达到90°时,折射光将完全消失,而只剩下反射光,这种现象叫做全反射。(图1)当以波动光学的角度 来研究全反射时,人们发现当入射光到达界面时并不是直接产生反射光,而是先透过光疏介质约一个波长的深

光学分析的表面等离子共振法

表面等离子共振(SurfacePlasmonResonance,SPR)是一种物理光学性质,它是一种沿着金属和电介质界面传播的电磁波。光以一定的角度入射到界面时,若在界面发生完全内反射,会产生衰减波。若衰减波在金属表面与自由电子耦合,则发生表面等离子体激元共振,光的反射率达到最小,此时的入射角称为表

表面等离子共振分子互作BIACORE的原理

首先先了解几个术语和定义:表面等离子共振(Surface Plasmon Resonance,SPR)一、消逝波当光从光密介质入射到光疏介质,入射角增加到某一角度,使折射角达到90°时,折射光将完全消失,而只剩下反射光,这种现象叫做全反射。当以波动光学的角度来研究全反射时,人们发现当入射光到达界面时

用-GST-融合蛋白检测蛋白质蛋白质相互作用实验

实验材料 结合到谷胱甘肽-球脂糖的 GST 融合蛋白试剂、试剂盒 碱性缓冲液 封闭缓冲液 相互作用缓冲液PK 缓冲液还原型谷胱甘肽于 Tris-Cl中洗涤缓冲液 1 洗涤缓冲液 2蛋白酶蛋白激酶 A[y-32P]ATP仪器、耗材 与待筛选蛋白结合的膜或滤膜Sephadex G-50 转柱实验步骤 材

用-GST-融合蛋白检测蛋白质蛋白质相互作用实验

            实验材料 结合到谷胱甘肽-球脂糖的 GST 融合蛋白 试剂、试剂盒 碱性缓冲液 封闭缓冲液 相