表面等离子共振检测蛋白相互作用实验——用BlAcore芯片

实验材料CM-5 葡聚糖芯片(BIAcore)配体蛋白靶蛋白试剂、试剂盒PBS胺-偶联试剂盒(详见「其他」)仪器、耗材BIAcore SPR 设备BIA 评估软件(point-and-click)实验步骤1. 插入一个新的 BIAcore CM-5 葡聚糖芯片。2. 用 PBS 作为工作液以持续流动系统平衡系统。3. 用实验确定最佳缓冲条件和浓度使非特异性结合到羧酸酯化葡聚糖上的靶蛋白和配体蛋白最小化。对带有高度带负电荷的葡聚糖非特异吸收的配体可能变性,并且在溶液中可非特异性地结合靶蛋白。4. 插入一张新的芯片。5. 在 N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)存在的情况下通过注入 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(EDC)活化葡聚糖羧酸酯。6. 在低 pH 的乙酸钠缓冲液中注入配体蛋白,使得葡聚糖上存在足够的蛋白量。同做几个平行实验,在这些平行实验中变化葡聚糖上配体蛋白的密度。改变接触时间和蛋白质浓度,进行 7~14 步中的操作......阅读全文

用-GST-融合蛋白检测蛋白质蛋白质相互作用实验

GST 融合蛋白作为在细菌中表达的重组蛋白,从它们被介绍以来,已用于成千上万个研究项目中(Smith and johnson 1988)。它们常常被用于制备抗体,这些抗体可用于研究蛋白质-蛋白质相互作用以及分析生化反应。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W

研究GST标签蛋白,原来可以这么简单

为什么要研究GST标签蛋白?谷胱甘肽巯基转移酶(GST)是在真核细胞中天然存在的大小26KDa的蛋白。GSTs可以催化外源性物质结合到谷胱甘肽(GSH)上,因而对诸多环境毒素包括化疗药物、残留的药物、除草剂及致癌物起到解毒作用。许多研究人员将GST的DNA序列整合到表达载体上来生产带有GST标签的融

BIACORE3000生物分子相互作用分析仪使用说明

BIACORE3000操作手册本手册包括BIACORE3000工作原理,实验步骤,操作规程,注意事项等。BIA是基于表面等离子体共振(SPR)技术来实时跟踪生物分子间的相互作用,而不用任何标记物的技术。表面等离子体子共振(surface plasmon resonance , SPR)是一种

表面等离子体共振OpenSPR改进肽筛选研究方法

在任何治疗开发项目的第一阶段,有必要使用一个完善的模型系统来审查比较新的治疗药物。用一个稳定的模型系统来比较新的治疗方法。建立模型系统将为有效的筛选分析提供基础,从而使研究者能够有效地比较和对比他们感兴趣的治疗剂的各种生物学变化。重要的是,透明质酸介导的运动受体,也被称为RHSMM,通常在乳腺癌,结

研究蛋白质之间相互作用的实验方法

白质与蛋白质之间相互作用构成了细胞生化反应网络的一个主要组成部分,蛋白-蛋白互作网络与转录调控网络对调控细胞及其信号有重要意义。把原来spaces空间上的一篇蛋白质与蛋白质间相互作用研究方法转来,算是实验技巧分类目录的首篇。一、酵母双杂交系统酵母双杂交系统是当前广泛用于蛋白质相互作用组学研究的一种重

Nicoya个人型分子相互作用仪(SPR)与电镜在纳米金颗粒分...

Nicoya个人型分子相互作用仪(SPR)与电镜在纳米金颗粒分析中的效果对比纳米金属颗粒具有独特的光学特性,通常纳米金属颗粒选用的是贵金属,因为它们的化学性质稳定,其中金和银能在可见光和近红外光范围内激发LSPR效应。这些性能特征对新一代生物传感器的开发,全新合成技术的评估,潜在物理特征的探究以及其

SPR轻松搞定脂类动力学研究

表面等离子共振技术SPR通常被用来分析蛋白与蛋白,蛋白与小分子,蛋白与核酸,蛋白与适配体,蛋白与脂质体等分子间的相互作用。目前另一个非常热的方向是脂类结合动力学研究,已经有很多科学家使用SPR技术测定了脂类的亲和力和脂类系列不同类型的特异性。 为什么要研究脂类的相互作用? 细胞膜由磷脂双分子层组成含

分子互作江湖(上):门派林立-市场火爆

  认知自然界的本质一定要了解相互作用,先辈们已总结了4种基本相互作用:引力相互作用、电磁相互作用、强相互作用和弱相互作用。就生命科学涉及的分子研究尺度而言,主要研究的是后两种相互作用。人们已经发展了ELISA、免疫共沉淀等一些经典的分子互作方法,但其只能描述终点。新型的分子互作仪器可以研究实时、动

全自动表面等离子体共振成像仪的优异功能

1.阵列式检测,同一芯片可同时获得多达400种相互作用     创新的阵列式芯片设计,同一芯片可同时分析超过400组相互作用,与传统的通道-技术相比,所需时间缩短百倍,并节约试剂和人力成本,特别适用于快速筛选。 2.无标记,实时生物分子相互作用分析与成像     基于SPR技术、新型的生物传感技术,

蛋白质相互作用(protein-interaction)实验方法

免疫共沉淀和亲和层析共分离:免疫共沉淀是证明蛋白质-蛋白质相互作用的最直接最经典和最有效的方法,如蛋白A能与B相互作用结合成异源二聚体,无论用抗A或抗B的抗体或与A或 B的亲和物偶联的agarose小珠都能把A和B沉淀下来。因此广泛用于蛋白质相互作用研究。常用的小珠:GST-Agarose(不需要抗

大分子相互作用仪的技术原理

  表面等离子共振(surface plasmon resonance,SPR)是一种光学物理传感技术。一束P偏振光在一定的角度范围内入射到棱镜端面,在棱镜与金属薄膜(Au或Ag)的界面将产生表面等离子波。当入射光波的传播常数与表面等离子波的传播常数相匹配时,引起金属膜内自由电子产生共振,即表面等离

【2020行研报告】SPR为何有近30亿潜在市场规模?

SPR(Surface plasmon resonance,表面等离子体共振)技术,作为一个通用检测平台,被广泛应用在药物筛选、科学研究等领域,用于生物分子间亲和力、结合特异性、浓度定量等分析。基于该技术的分子相互作用仪由于结构复杂、核心技术被国外垄断,造成仪器价格昂贵,难以全面普及。2019年,中

蛋白芯片检测ENA

 大渊自身抗体九项IgG抗体蛋白芯片检测系统是一种定性的蛋白芯片,共集合有抗dsDNA抗体、抗Histone抗体、 抗Smith抗体、抗SSA抗体、抗SSB抗体、抗Scl-70抗体、抗JO-1抗体、抗Rib-P抗体、抗RNP抗体九个指标。采用间接法原理,特异性强,灵敏度高。标记方法为胶体金标

蛋白芯片检测Hp

大渊幽门螺旋杆菌(HP)IgG抗体蛋白芯片检测系统(PBT-HP-01-A型芯片)是一种定性的蛋白芯片,共放有细胞毒素相关蛋白(CagA),尿素酶C(ureC)二个指标,采用间接法原理,特异性强,灵敏度高。标记方法为免疫金标记。  大渊幽门螺旋杆菌(HP)现症蛋白芯片鉴定检测系统(PBT-HP-02

实时无标记SPR技术研究分子相互作用的优势介绍(一)

分子间相互用是细胞接受信号和传递信号的基础,是研究药物作用的本质所在,因此研究分子间的相互作用对于揭示生命起源、细胞病变、药物开发等是不可忽视的过程,也是当前生命科学与医药领域的研究热点;传统研究分子相互作用的方法众多,包括酵母双杂、噬菌体展示、Elisa、Western、FRET、Co-IP、Pu

大分子相互作用仪SPR技术原理

表面等离子共振(surface plasmon resonance,SPR)是一种光学物理传感技术。如图1所示,一束P偏振光在一定的角度范围内入射到棱镜端面,在棱镜与金属薄膜(Au或Ag)的界面将产生表面等离子波。当入射光波的传播常数与表面等离子波的传播常数相匹配时,引起金属膜内自由电子产生共振

大分子相互作用仪SPR技术原理

表面等离子共振(surface plasmon resonance,SPR)是一种光学物理传感技术。如图1所示,一束P偏振光在一定的角度范围内入射到棱镜端面,在棱镜与金属薄膜(Au或Ag)的界面将产生表面等离子波。当入射光波的传播常数与表面等离子波的传播常数相匹配时,引起金属膜内自由电子产生共振

利用-BIAcore-分析相互作用的蛋白质

试剂、试剂盒 EDC氨基乙醇ExtracleanHEPES 缓冲的盐水缓冲液HClNHS小鼠抗-TSH 单克隆抗体兔抗小鼠-Fc 结构域TSHTSH 稀释液仪器、耗材 BIAcore 仪器CM-5 传感芯片实验步骤 第一阶段  捕获表面的制备和结合试验材料缓冲液和溶液将贮存溶液稀释到适当的浓度。ED

中科院苏州纳米技术与纳米仿生研究所学者访问药物所

  7月2日,应上海药物研究所杨财广研究员的邀请,中科院苏州纳米技术与纳米仿生研究所马宏伟研究员来药物所进行学术交流,做了题为复杂环境下的蛋白质-X相互作用检测的报告。   马宏伟研究员主要致力于生物材料(表面引发聚合反应,材料的表面修饰,新材料的开发等),生物传感器(QC

用纳米粒子可生成等离子共振彩色全息图

  公元4世纪,罗马人制造了一种名为莱克格斯杯(Lycurgus cup)的特殊玻璃杯,玻璃内分布着精细的金银微粒,能根据光照方向不同改变颜色,光从一边照是绿色,从另一边照是红色的。虽然制造者也未必知道其中原理,但现在我们知道,这是由于表面等离子共振造成的。   据物理学家组织网报道,最近,英国剑桥

新型表面等离子体共振光谱仪研制成功

  4月10日,中科院计划财务局组织专家对长春应用化学研究所承担的院科研装备研制项目“集成电化学方法的表面等离子体共振及其高通量分析仪器”进行了现场验收。验收专家分别听取了项目的结题、财务和用户使用报告,审阅了项目组提交的验收材料,并实地考察了研制样机的示范性实验操作,一致同意该项目通过验收。  

不用做免疫共沉淀也能检测间接相互作用?

生物被膜是由细菌胞外大分子包裹形成的有组织的细菌群体,其通常由细胞外聚合物组成,包括蛋白质、DNA和多糖,生物被膜能够帮助细菌抵御抗生素和宿主的免疫防御机制。值得注意的是,生物被膜会附着于导尿管、心脏植入物、消毒不充分的外科手术工具等医疗器械上,从而引起医院获得性感染。绿脓杆菌广泛分布于自然界及正常

SPR生物分子相互作用分析仪创新技术优势大盘点(一)

生命活动的基础是生物分子间以及生物分子与其它分子间的相互作用。研究生物分子间的相互作用,如蛋白与蛋白,蛋白与核酸、蛋白与脂类,核酸与多肽等,可以从分子水平上了解生命现象,包括细胞功能、各种生理活动、病变、药物作用机理、免疫反应等机制,从而阐明生命活动的机理,发现生命的本质、开发新药等。这对于人类认识

蛋白共沉淀检测实验_备择-用GST融合蛋白

实验材料全细胞抽提物试剂、试剂盒谷胱甘肽-琼脂糖或者谷胱甘肽-琼脂糖浆抗体免疫共沉淀缓冲液氯化钠蛋白 A G-琼脂糖浆2 × 样品缓冲液(用于 SDS-PAGE 胶)仪器、耗材20 ml 注射器和 18-G 针头汉密尔顿注射器实验步骤1. 按照蛋白 A/G-琼脂糖浆所述的方式准备两份样本(见「用蛋白

相互作用蛋白鉴定实验——相互作用蛋白捕获

实验方法原理实验要经过两次连续大量的酵母菌平板筛选过程。酵母菌含有 LexA 融合探针、报道基因和插入PJG4-5(见图19.1.6)的 GAL 启动子控制下的 cDNA 表达文库。最近,已有可供用于这个系统的文库。实验材料携带适当质粒组合的酵母菌试剂、试剂盒完全(CM)缺失成分液体培养基含有如下指

GFP-和荧光共振能量转移技术测定蛋白质相互作用实验

            实验材料 进行转染的细胞株 按第二阶段所介绍的方法制备表达了蛋白质探针的细胞 试剂、试剂盒 N-二羟乙基甘氨酸

GFP-和荧光共振能量转移技术测定蛋白质相互作用实验

我们将方案分成三个阶段: 第一阶段介绍蛋白质的制备及蛋白质的荧光染料标记;第二阶段,通过转染或微注射将适当的探针成分导入细胞;第三阶段,图像的收集和分析过程。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。实验材料进行转染的细胞株按第二阶段所介绍的方法制备

国内颠覆性突破-新型高通量药物筛选NanoSPR分子互作平台

  2022年9月1日,Advanced Functional Materials杂志以“An Nanoplasmonic Portable Molecular Interaction Platform for High-Throughput Drug Screening”为题在线发表了华中科技大学

布鲁克发布基于表面等离子体共振的HTS药物筛选新方案

  摘  要  Sierra表面等离子体共振(SPR)Pro系列用于高通量药物筛选(HTS)  • 独创的Sierra SPR-32 Pro支持多通道HTS ,可在不影响样品性质并兼顾灵敏度的情况下,深入探究动力学  • SPR通过非标定量HTS技术对药物研发中的分子相互作用提供新的视角,可更好的进

蛋白芯片检测心梗

一、什么是心肌梗塞?   心肌梗塞(acute myocardial infarction,AMI)是由于冠状动脉急性闭塞引起部分阶段心肌缺血性坏死。临床常表现为剧烈而持久的胸痛,血清心肌酶活力增高,以及反映心肌急性损伤、缺血和坏死一系列特征性心电图衍变。常并发心律失常及急性循环功能障碍。属冠心