表面等离子共振检测蛋白相互作用实验——用BlAcore芯片
实验材料CM-5 葡聚糖芯片（BIAcore）配体蛋白靶蛋白试剂、试剂盒PBS胺-偶联试剂盒（详见「其他」）仪器、耗材BIAcore SPR 设备BIA 评估软件（point-and-click）实验步骤1. 插入一个新的 BIAcore CM-5 葡聚糖芯片。2. 用 PBS 作为工作液以持续流动系统平衡系统。3. 用实验确定最佳缓冲条件和浓度使非特异性结合到羧酸酯化葡聚糖上的靶蛋白和配体蛋白最小化。对带有高度带负电荷的葡聚糖非特异吸收的配体可能变性，并且在溶液中可非特异性地结合靶蛋白。4. 插入一张新的芯片。5. 在 N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）存在的情况下通过注入 1-（3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺（EDC）活化葡聚糖羧酸酯。6. 在低 pH 的乙酸钠缓冲液中注入配体蛋白，使得葡聚糖上存在足够的蛋白量。同做几个平行实验，在这些平行实验中变化葡聚糖上配体蛋白的密度。改变接触时间和蛋白质浓度，进行 7~14 步中的操作......阅读全文
蛋白共沉淀检测实验_用蛋白A／G琼脂糖
实验材料全细胞抽提物试剂、试剂盒抗体免疫共沉淀缓冲液氯化钠蛋白 A G-琼脂糖浆2 × 样品缓冲液（用于 SDS-PAGE 胶）仪器、耗材20 ml 注射器和 18-G 针头汉密尔顿注射器实验步骤1. 在冰上将以下组分加入离心管，双份：0.5～1 mg 全细胞抽提物1 μg 抗体5 mol/L Na
使用ProteOn－XPR36蛋白相互作用阵列系统
使用ProteOn XPR36蛋白相互作用阵列系统分析抗体-膜结合蛋白以及蛋白-脂类物质间的相互作用介绍：研究细胞膜、膜结合蛋白和抗体间的相互作用以及这些作用的互相影响是药物研发中非常值得关注的事情。膜蛋白和膜相关蛋白以及多肽类物质在很多生物过程中的地位都非常重要，同时还参与到一些诸如癌症等疾病的关
各种蛋白互作检测方法优缺点分析
聚焦蛋白质互作研究进展与实验方法研究蛋白-蛋白相互作用是理解生命活动的基础。蛋白质—蛋白质互作网络是生物信息调控的主要实现方式，是决定细胞命运的关键因素。检测蛋白质间相互作用的实验方法有哪些？这些检测方法各有什么优缺点?总结如下。1. 生化方法●共纯化、共沉淀，在不同基质上进行色谱层析(需要补充)●
SPR在生物医药领域的最新应用
传感器（MP-SPR)生物传感器、气体传感器、食品安全、环境监测、免疫响应、实验开发◆ 应用MP-SPR技术测量气体导致的表面变化MP-SPR仪器用于表征由不同气体导致的聚合物薄膜变化。不同的湿度显示了与聚合物相互作用的浓度依赖性，并且乙醇蒸气看起来渗入了聚合物层。◆ 应用MP-SPR技术测定生
GFP－和荧光共振能量转移技术测定蛋白质相互作用实验－1
实验材料 进行转染的细胞株按第二阶段所介绍的方法制备表达了蛋白质探针的细胞试剂、试剂盒 N-二羟乙基甘氨酸消化缓冲液NN-二甲基甲酰胺磷酸钠磷酸盐缓冲溶液TE木瓜蛋白酶Cy3 和 Cy5 OSu 单功能硫代吲哚花菁琥珀酰亚胺酯抗体SDS-聚丙烯酰胺凝胶明胶溶液聚-L-赖氨酸质粒 DNAGFP 融合载
GFP－和荧光共振能量转移技术测定蛋白质相互作用实验－2
16. 标记反应以后，采用下述公式计算标记率： Aλ X M / [ ( A280-ƒ X Aλ ) X ελ ]式中 Aλ是染料在其最大吸收波长λ处的吸收度，A280 是蛋白质在 280nm 的吸收度，M 是以
植物蛋白芯片的构建和抗原抗体相互作用的研究实验
实验材料异丙基-β-D-硫代半乳糖苷试剂、试剂盒PP 缓冲液变性裂解缓冲液仪器、耗材微量滴定板实验步骤3.1 高通量蛋白的表达和纯化我们用在 PQE30 表达载体里构建的，可表达带 N 端 RGS-His6 标记的大肠杆菌 cDNA 表达克隆来生产重组植物蛋白。由于超出本章节的范围，我们不在此详细叙
植物蛋白芯片的构建和抗原抗体相互作用的研究实验
实验材料 异丙基-β-D-硫代半乳糖苷试剂、试剂盒 PP 缓冲液变性裂解缓冲液仪器、耗材 微量滴定板实验步骤 3.1 高通量蛋白的表达和纯化我们用在 PQE30 表达载体里构建的，可表达带 N 端 RGS-His6 标记的大肠杆菌 cDNA 表达克隆来生产重组植物蛋白。由于超出本章节的范围，
植物蛋白芯片的构建和抗原抗体相互作用的研究实验
实验材料：异丙基-β-D-硫代半乳糖苷试剂、试剂盒：PP 缓冲液 变性裂解缓冲液 仪器、耗材：微量滴定板实验步骤：3.1 高通量蛋白的表达和纯化我们用在 PQE30 表
OpenSPR助力JAK/Stat信号通路抗癌药物分子机制研究
宫颈癌是女性第二常见的恶性肿瘤，近年来其发病有年轻化的趋势。基于塔斯品碱及其衍生物的化学结构所设计合成的同分异构化合物TAD-1822-7-F2 (F2)和TAD-1822-7-F5 (F5)可以有效抑制HeLa细胞的增殖。西安交通大学的研究人员使用OpenSPR的表面等离子共振(SPR)技
Nicoya－OpenSPR－在酶类研究中的创新应用
Nicoya OpenSPR 在酶类研究中的创新应用------β羧化β-碳酸酐酶结构对γ-碳酸酐酶结合的影响 碳酸酐酶CcaA是蓝藻细菌羧酶体的组成成分。CcaA含有特征性的未知功能的C末端延伸，通过与γ-碳酸酐酶（CcmM）的相互作用被整合到羧酶体上，在很多蓝藻细菌中CcmM是具有酶活性的碳酸酐
相互作用蛋白鉴定实验
鉴定诱饵蛋白（半乳糖苷酶） 鉴定诱饵蛋白（LacZ 的活性分析） 相互作用蛋白捕获 实验方法原理 捕捉相互作用蛋白的第一步是构建能够表达
相互作用蛋白鉴定实验
实验方法原理 捕捉相互作用蛋白的第一步是构建能够表达 LexA 与目的蛋白的融合体的质粒。这种质粒转化到包含 LEU2 和lacZ 报道基因的报道酵母株中，并要行一系列的对照实验来鉴定所构建的诱饵蛋白是否适用，是否需要修饰，或是否应改变酵母菌报道条件。这些对照实验实现了诱饵蛋白在酵母菌中作为
分子间相互作用分析：荧光标记VS无标记
同无标记技术相比，利用荧光技术检测分子间相互作用的实验成本较低，例如荧光共振能量转移和凝胶迁移实验，无需昂贵的仪器便可完成结合分析。然而，基于荧光标记的检测技术也存在自己的局限性，像凝胶迁移实验就只能用来检测蛋白和核酸间的相互作用。那么在具体的实验中，研究人员该如何选择合适的检测技术呢？不要着急，下
以光谱学为基础的方法测定血浆蛋白结合率
光谱技术也多用于药物血浆蛋白结合常数测定。药物与蛋白质结合生成超分子复合物后，体系的光谱、电化学性质发生改变，从而提供蛋白质浓度或结构方面的信息。常用的光谱法包括紫外-可见吸收光谱法(UV-visible)，荧光光谱法(fluorescence)，红外光谱法(infrared)，元二色谱法(ci
一种利用表面等离子共振定量流感病毒的新方法...（二）
材料和方法 对照血清(绵羊)和病毒抗原购自英国NIBSC，除了B/Brisbane/3/2007血清和抗原来自荷兰Solvay Phormaceuticols，PR/B/34血清(鸡)和病毒是购自美国Charles River Laboratories。重组的全长HA蛋白(A/H1N1
一种利用表面等离子共振定量流感病毒的新方法...（五）
表3：添加剂对回收的影响。参照抗原B/Jiangsu/lO/2005(5 ug/ml)与添加剂混合，并在B表面上分析样品。结果与HBS-EP+缓冲液中无添加剂的对照样品进行比较。 工艺样品的分析 为了测试生物传感器方法的性能，对流感疫苗纯化过程中不同阶段的样品进行了分析，从收集的细胞
一种利用表面等离子共振定量流感病毒的新方法...（六）
讨论在本文中，我们展示了一种新颖的定量HA的生物传感器方法的开发和初步结果，它利用了与SRID方法相同的参照抗原和血清，再加上固定的HA。来自不同供应商的重组HA蛋白经过固定化的测试，并根据固定性质(如活性和直接稀释到固定缓冲液的高浓度)进行挑选(数据未显示)。挑选出的蛋白可利用标准的氨基偶联步骤，
基于表面等离子体共振的贵金属纳米超晶材料研究获进展
随着现代纳米科学与技术的发展，贵金属纳米超晶材料制备和可控光学特性的研究引起了人们广泛的兴趣，其在光电、新能源、工业催化、超材料、传感技术、生物医用等诸多领域有着广阔的应用前景。贵金属(尤其是Au和Ag)纳米超晶以表面等离子体共振（surface plasmon resonance，SPR）效应
一种利用表面等离子共振定量流感病毒的新方法...（三）
表1 计算浓度和变异系数，以分析B/jiangsu/10/2005(图3) SRID 血清以Cy3-染料标记。未标记的血清和Cy3-标记的血清（小于总血清量的0.5％；证实不会干扰沉淀)与熔化的琼脂糖混合，浇铸在模中，以形成凝胶中的孔。样品和参照抗原在加入凝胶孔之前，用1％的两性洗涤
一种利用表面等离子共振定量流感病毒的新方法...（一）
一种利用表面等离子共振定量流感病毒的新方法—单向放射免疫扩散法一种利用表面等离子共振定量流感病毒的新方法——单向放射免疫扩散法译自= A novel assay for lnfluenza virus quantification using surfece plasman resanance. V
一种利用表面等离子共振定量流感病毒的新方法...（四）
为了扩展特异性研究，对27种不同的血清与固定了HA/H3N2的表面之间的结合进行分析(图5、表2)。结果显示只有特异针对H3N2亚型的血清才能与表面明显结合。抗-B和抗-H1N1血清显示出低的结合水平。相应地，利用50 mM HCl、0.05％ P2O再生后，也开展了27种血清与固定了HA/
中国表面等离子共振技术引领者英柏生物完成PreA轮融资
近日，中国表面等离子共振（SPR）技术平台引领者英柏生物宣布完成Pre-A轮融资，本轮融资由金坛资本投资，浩悦资本担任本轮融资的独家财务顾问。本轮融资将助力英柏生物的商业化装机、量产、市场推广与销售，建设实验室以扩大产能，以及持续性的新产品研发投入。 英柏生物成立于2013年，致力于表面等离子
如何全面分析分子间相互作用
【导语】来自GE医疗集团生命科学部的表面等离子共振技术（Biacore）和微量热技术（Microcal）的相互补充、相互印证可以为我们正确全面判定分 子间相互作用的全面机制，提供充分的信心：不仅可定量研究结合的快慢（ka\kd，Ka为结合速率常数，Kd为解离速率常数），结合的强弱（KD
小型传感器监测食品污染
12月25日电韩国研究人员日前宣布，他们发明了一种小型生物芯片传感器，可快速、准确地对食品和环境污染进行检测。 据韩联社报道，由郑奉铉领导的韩国生命科学和生物技术研究所研发的这种生物芯片传感器利用表面等离子体共振技术，即通过接收被扫描物体表面反射的激光共振信号来辨别分子层面的结构，从而检测被测对象
蛋白质组与蛋白质组学简介1
一、蛋白质组概念：一个细胞、一个组织或一个机体全部基因所表达的全部蛋白质。 二、蛋白质组学研究范畴 1.蛋白质和蛋白质间 2.蛋白质和核酸之间 3.蛋白质及其组成质点的分离、分析、鉴定 4.蛋白质结构分析 5.生理、病理或不同发育状态下蛋白质组表
新一代平行分析的SPR生物传感器
摘要：基于表面等离子体共振的生物传感器是一种非标记的，实时生物分子相互作用检测工具。由于技术的限制，早先的SPR技术采用顺序分析的方式。现在，最新一代的SPR仪采用平行分析的方式，单次进样就可以测定1－6对相互作用的动力学。与传统技术相比，平行分析具有数据质量好、基线联动和通量高的优点。表面等离子体
用DNA－芯片技术检测基因的表达
实验概要生物芯片是将生命科学研究中所涉及的不连续的分析过程(如样品制备、化学反应和分析检测)，利用微电子、微机械、化学、物理技术、计算机技术在固体芯片表面构建的微流体分析单元和系统，使之连续化、集成化、微型化。生物芯片技术主要包括四个基本要点：芯片方阵的构建、样品的制备、生物分子反应和信号的检测。1
用DNA芯片技术检测基因的表达
一、芯片制备基因芯片的制备主要有两种基本方法，一是在片合成法，另一种方法是点样法。在片合成法是基于组合化学的合成原理,它通过一组定位模板来决定基片表面上不同化学单体的偶联位点和次序。在片合成法制备DNA芯片的关键是高空间分辨率的模板定位技术和固相合成化学技术的精巧结合。目前，已有多种模板技术用于基因
用DNA芯片技术检测基因的表达
一、芯片制备基因芯片的制备主要有两种基本方法，一是在片合成法，另一种方法是点样法。在片合成法是基于组合化学的合成原理,它通过一组定位模板来决定基片表面上不同化学单体的偶联位点和次序。在片合成法制备DNA芯片的关键是高空间分辨率的模板定位技术和固相合成化学技术的精巧结合。目前，已有多种模板技术用于基因