以光谱学为基础的方法测定血浆蛋白结合率
光谱技术也多用于药物血浆蛋白结合常数测定。药物与蛋白质结合生成超分子复合物后,体系的光谱、电化学性质发生改变,从而提供蛋白质浓度或结构方面的信息。常用的光谱法包括紫外-可见吸收光谱法(UV-visible),荧光光谱法(fluorescence),红外光谱法(infrared),元二色谱法(circulardichroism,CD),旋光法(opticalrotatorydispersion,ORD)以及核磁共振法(NMR)。利用这些方法除了可以测定药物与蛋白质结合率,还可以获得蛋白质和药物的结合位点数、结合位置、作用力类型以及在药物作用下蛋白质结构与功能变化的信息。光谱学技术不适合研究多平衡体系。 荧光光谱法具有灵敏度高、选择性强、用样量少等优点,因此在研究小分子与蛋白质的相互作用中,荧光光谱法占有重要地位。但该法需要经过大量的计算,较其他方法不简便、不直观。 表面等离子体子共振技术是近年来研究很热门的一种新技术,它采......阅读全文
以光谱学为基础的方法测定血浆蛋白结合率
光谱技术也多用于药物血浆蛋白结合常数测定。药物与蛋白质结合生成超分子复合物后,体系的光谱、电化学性质发生改变,从而提供蛋白质浓度或结构方面的信息。常用的光谱法包括紫外-可见吸收光谱法(UV-visible),荧光光谱法(fluorescence),红外光谱法(infrared),元二色谱法(ci
微量热法测定血浆蛋白结合率
微量热法是近年来发展起来的一种研究生物热化学与生化过程动力学的重要方法,该法对反应体系的溶剂性质、光谱性质和电学性质等没有任何限制条件,在测定中也不需添加任何试剂,不会干扰生物体系的正常活动与代谢,已被先后用于一些抗肿瘤药物、生物染料、药物小分子与DNA或蛋白质的相互作用。
概述超滤法的测定血浆蛋白结合率
超滤法与平衡透析法相似,也是研究蛋白质与小分子结合作用的常用方法。该方法是在压力差的驱动下,药物分子扩散透过半透膜。超滤法的最大优点是实现血浆中游离小分子的快速分离、用时短,与平衡透析法相比,大大提高了分离速率。但该方法也同样存在Gibbs-Donna效应、非特异性的透析设备表面的药物吸附效应以
微透析法测定血浆蛋白结合率
微透析技术是一种活体细胞外液的生化物质采样分析技术。因其独有的微创性和取样的连续性,现已被广泛应用于脑组织各种病理生理现象的探索性实验、神经生物化学的检测和药物代谢研究 。微透析法用于药物血浆蛋白结合率测定,基于药物与大分子蛋白结合后不能穿透具有一定相对分子质量截留值的微透析的半透膜,而游离药物
血浆蛋白结合率的经典测定方法之平衡透析法
药物在血浆中会不同程度地与血浆蛋白结合,其结合的程度能够影响药物的体内的吸收、分布、代谢和排泄,进而会影响药物的药效学行为。一般来说,药物在吸收进入血液之后,仅游离的药物能够到达作用部位,产生药理学活性。平衡透析法是基于药物结合的平衡原理来测定药物游离浓度最常用的方法,也是研究药物血浆蛋白结合率的经
血浆蛋白结合率的经典测定方法之平衡透析法
药物在血浆中会不同程度地与血浆蛋白结合,其结合的程度能够影响药物的体内的吸收、分布、代谢和排泄,进而会影响药物的药效学行为。一般来说,药物在吸收进入血液之后,仅游离的药物能够到达作用部位,产生药理学活性。平衡透析法是基于药物结合的平衡原理来测定药物游离浓度最常用的方法,也是研究药物血浆蛋白结合率的经
简述血浆蛋白结合率的特点
血浆蛋白结合率为可逆性疏松结合,结合型药物分子量增大,不能跨膜转运、代谢和排泄,并暂时失去药理活性,某些药物可在血浆蛋白结合部位上发生竞争排挤现象。药物分子与血浆蛋白结合的特点(和药物与受体蛋白结合情况相似):具有饱和性与可逆性、结合物无活性、有竞争置换现象。
血浆蛋白结合率的基本介绍
血浆蛋白结合率(binding rate of plasma protein, BRPP)系指药物吸收入血液后,多数与血浆蛋白结合,治疗剂量的药物与血浆蛋白结合的百分率。 在正常情况下,各种药物以一定的比率与血浆蛋白结合,在血浆中常同时存在结合型与游离型。而只有游离型药物才具有药物活性。当两种
高效亲和色谱法测定血浆蛋白结合率
高效亲和色谱法用于测定药物与血浆蛋白的结合,可由药物的迁移变化率的连续变化计算出药物与蛋白的结合常数。色谱系统良好的精密度和重现性可提供大量结合作用的对比研究,并易于与MS等技术联用。该方法允许多种药物同时进样,并可同时测定多种药物与蛋白的结合常数,对立体选择性蛋白结合的研究非常有用。 高效亲
超速离心法测定血浆蛋白结合率
超速离心法的基本原理是在一定的离心力场的作用下,根据小分子与蛋白质在液体介质中沉降速度或密度不同而停留在液体介质中不同的位置而分离的方法。在药物蛋白结合率的测定中,蛋白结合的药物形成沉淀,游离的药物小分子在离心管的上清液中被定量测定。此法的优点是克服了Gibbs-Donna效应以及膜吸附效应等与
平衡透析法测定血浆蛋白结合率的介绍
平衡透析法是定量研究蛋白质与小分子结合平衡的一种传统且成熟的膜分离技术。平衡透析法的工作原理是基于分子大小或者重量不同,将大分子溶液和小分子溶液分别置于只允许小分子透过而不允许大分子透过的半透膜两侧,它是在无外力驱动条件下,药物分子扩散透过半透膜,当透析达到平衡时,测定膜两侧溶液中小分子的浓度,
平衡透析法测定血浆蛋白结合率原理及装置
药物血浆蛋白结合率(plasma protein binding, PPB)是药物在动物体内重要的药理学参数之一,影响着药物体内游离浓度进而影响药物的处置过程。药物在进入血液后与血浆蛋白会有不同程度结合,血液中游离药物的比例会影响其在体内吸收、分布、代谢和排泄的过程,与血浆蛋白结合的药物可能会有更长
血浆蛋白结合率的分析研究趋势
近年来,随着药动学的深入研究,药物与血浆蛋白的结合率已成为药学领域中的研究热点,特别是对于那些血浆蛋白结合率高的药物。平衡透析法虽然操作复杂且费时,但是分析成本低,可以直接得到游离小分子的浓度,仍然为常规的测定方法。光谱法可以测定药物与蛋白质结合率,此外还可以获得蛋白质和药物的结合位点数,结合位
临床化学检查方法介绍血浆结合球蛋白半定量测定介绍
血浆结合球蛋白半定量测定介绍: 血浆结合球蛋白是一组来源结构、氨基酸组成不同,功能各异的不均质蛋白的混合体。血浆结合球蛋白半定量测定正常值: 0.5-2.0g/L。血浆结合球蛋白半定量测定临床意义: (1) 增高: ① 各种炎症、结核病、风湿病、类风湿性关节炎等。
以PCR为基础的相关技术
(一)巢式PCR 定义: 是对靶基因进行二次扩增,第二次扩增用的模板就是第一次的扩增产物。 应用: 可以得到足够和特异性的扩增产物,在靶基因表达量比较低或者一些其他原因导致的,使用常规的PCR无法得到理想的产物得时候。 注意事项: (1)第二次扩增的时候,必须至少有一条引物是另外设计
生化检测项目血浆结合球蛋白半定量测定介绍
血浆结合球蛋白半定量测定介绍: 血浆结合球蛋白是一组来源结构、氨基酸组成不同,功能各异的不均质蛋白的混合体。血浆结合球蛋白半定量测定正常值: 0.5-2.0g/L。血浆结合球蛋白半定量测定临床意义: (1) 增高: ① 各种炎症、结核病、风湿病、类风湿性关节炎等。
平衡透析法检测血浆蛋白结合率原理及注意事项
药物血浆蛋白结合率(Plasma Protein Binding, PPB)即血液中与蛋白结合的药物占总药量的百分数,可以反映药物与血浆蛋白结合的程度。药物血浆蛋白结合率是药物在动物体内重要的药理学参数之一,影响着药物体内游离浓度进而影响药物的分布与排泄。药物在进入血液后与血浆蛋白会有不同程度结合,
以硅膜为基础纯化-PCR-产物实验方法
试剂、试剂盒 乙醇PCR 样品仪器、耗材 真空装置真空泵真空废物收集装置真空管PCR 纯化系统实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂乙醇,80%(75 ml/板;使用前配制)2. 核酸和寡核苷酸在 96 孔板中的 PCR 样品(每样品 20?lOOul)3. 特殊设备Vac-man96 真空装置
以硅膜为基础纯化-PCR-产物实验方法
试剂、试剂盒 乙醇 PCR 样品 仪器、耗材 真空装置 真空泵 真空废物收集装置
以硅膜为基础纯化-PCR-产物实验方法
Wizard SV96 PCR 纯化系统提供了一个以膜为基础,用于从 96 孔板中进行高产率 PCR纯化的方法。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。试剂、试剂盒乙醇PCR 样品仪器、耗材真空装置真空泵真空废物收集装置真空管PCR 纯化系统实验步骤一、材料1. 缓冲液、溶液和
肠炎沙门氏菌以核酸为基础的检测方法
细胞核酸DNA和RNA是唯一一类可以携带信息的大分子。由于所有的细胞都含有这种分子,可以利用它作为检测的标靶。标靶通常是一个特异性核酸序列,它可通过以补体核酸分子作为探针来检出。与免疫学方法相似,探针也需要加附适当的标记,如放射性同位素、酶或发光的标识物。Fitts等人在食品沙门氏菌检测中引入了
肠炎沙门氏菌以抗体为基础的检测方法
利用抗原-抗体反应的显著特异性,来进行细菌的鉴别和血清学定型,已有半个多世纪的历史。细菌菌体或鞭毛抗原的特异性抗体的存在,使得人们可以建立一些快速方法来检测以食品为载体的病原。已经建立的沙门氏菌免疫学检测方法有许多种,大致可分为以酶标抗体(ELISA),荧光抗体染色(免疫荧光法),同位素标记抗体
以磁珠为基础分离基因组-DNA-的实验方法
试剂、试剂盒 全血 口腔涂片或样品污染物 二硫苏糖酵 乙醇 异丙醇 裂解缓冲液
以磁珠为基础分离基因组-DNA-的实验方法
试剂、试剂盒 全血口腔涂片或样品污染物二硫苏糖酵乙醇异丙醇裂解缓冲液仪器、耗材 自动定位器P250 盒装吸头 血液基因组高产量系96 孔收集板BiomekFX 自动机械工作平台分离装置传热板储液器微量吸头离心架筐加热块磁分离架DNAIQ系统实验步骤 方法1:利用液体处理自动机械工作平台从20ul全血
以磁珠为基础分离基因组-DNA-的实验方法
Wizard Magne Sil 基因组 DNA 纯化系统是使用一种固相顺磁性硅质顆粒来纯化基因组 DNA。该技术取代了以真空过滤和离心为基础的 DNA 纯化形式,而且还使样本处理更加经济、高效。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。试剂、试剂盒全血口腔涂片或样品污染物二硫苏
血浆蛋白S测定的原理
(1)血浆总蛋白S测定1)原理:血浆总蛋白S(total protein S,TPS)包括游离PS(FPS)和与补体C4结合的PS(C4bp-PS)。由于二者对于抗人蛋白S抗体有相似反应,因此用免疫学方法(如火箭电泳、酶联免疫法)检测的是TPS。2)临床意义:减低见于先天性和获得性PS缺陷症,后者见
临床化学检查方法介绍血浆蛋白S测定
血浆蛋白S测定介绍: 血浆蛋白S测定是对血浆中的血浆总蛋白S(TPS)包括游离PS(FPS)和与补体C4结合的PS(C4bp-PS)。进行测定,以助于判断血液疾病。血浆蛋白S测定正常值: 血浆总蛋白S测定,97.56%±9.76%。 血浆游离蛋白S(FPS)测定,100.9%士29.1%。血浆
血浆蛋白的分类方法
血浆蛋白是血浆中最主要的固体成分,含量为60~80g/L,血浆蛋白质种类繁多,功能各异。用不同的分离方法可将血浆蛋白质分为不同的种类。 最初用盐析法只是将血浆蛋白分为白蛋白和球蛋白,后来用分段盐析法可细分为白蛋白、拟球蛋白、优球蛋白和纤维蛋白等组分。 用醋酸纤维薄膜电泳法可分为白蛋白、α1球
以干细胞为基础的失明治疗的进展
在移植过程中,标记为红色的人类感光前体细胞迁移并整合到退化的犬视网膜中。绿色标记是突触制造者,表明移植的细胞开始与视网膜中的二级神经元形成连接。 如果,在致盲的视网膜疾病患者中,人们可以简单地将从培养皿中提取的健康的感光细胞导入视网膜,并恢复视力,那会怎么样?这是一种治疗失明的诱人而直接的策略
以PCR为基础的检测工具的优缺点
第一,PCR反应是快速的。整个DNA提取,扩增和检测的过程通常少于6小时,如果反应利用嵌套的引物,过程可能长些。对于一些样本来说,比如来自粪便和表皮,就需要在DNA提取中增加步骤,这样就延长了整个检测的时间到14小时。 用购买的核苷酸提取工具就能缩短检测时间,同时机械进行提取,使PCR方案最优化或