表面等离子共振检测蛋白相互作用实验——用NTASAM芯片
实验材料NTA-SAM 芯片配体蛋白靶蛋白(组氨酸标记)试剂、试剂盒PBS/HeBSNaOHNi(II)SO4仪器、耗材BIAcore SPR 设备BIA 评估软件(point-and-click)实验步骤1. 插入一张 NTA-SAM 芯片并使用 PBS 或者 HeBS 作为运转缓冲液。2. 注入 10 μl 1 mmol/L 的氢氧化钠,然后注入 25 μl 水性的 1% Ni(II)SO4,随后再加入组氨酸标记的配体蛋白和 aI 预测靶蛋白。3. 使用至少三种靶蛋白的不同浓度重复步骤 2 中的操作。组氨酸标记的配体蛋白能够在 200 mml /L 咪唑的处理下脱离表面。另外,每个实验可用一个新鲜的流动室(每张芯片有 4 个流动室)。4. 使用 BIA 评估软件 point-and-click,计算分离率和结合率常数。使用三个 IE 蛋白浓度所得的结合率和分离率的平均值计算平衡常数。展开......阅读全文
蛋白质组学主要包括哪些分析技术及各自特点
为探究生物进程的分子机制,需要确定介导这个过程的蛋白质-蛋白质间的相互作用。研究蛋白质间相互作用的主要技术总结如下:一、酵母双杂交系统酵母双杂交系统是当前广泛用于蛋白质相互作用组学研究的一种重要方法。其原理是当靶蛋白和诱饵蛋白特异结合后,诱饵蛋白结合于报道基因的启动子,启动报道 基因在酵母细胞内的表
蛋白质组的分析鉴定方法主要有哪些
为探究生物进程的分子机制,需要确定介导这个过程的蛋白质-蛋白质间的相互作用.研究蛋白质间相互作用的主要技术总结如下:一、酵母双杂交系统酵母双杂交系统是当前广泛用于蛋白质相互作用组学研究的一种重要方法.其原理是当靶蛋白和诱饵蛋白特异结合后,诱饵蛋白结合于报道基因的启动子,启动报道 基因在酵母细胞内的表
方案9-用-GFP-嵌合体监控蛋白质蛋白质相互作用实验
实验材料纯化的目标蛋白纯化的 S65T GFP 嵌合体试剂、试剂盒非变性聚丙稀醜胺凝胶Tris-HCl 缓冲液仪器、耗材荧光成像系统垂直胶板电泳系统实验步骤方法 1 荧光凝胶阻滞分析法方法 2 荧光极性分析法展开
借助QCMD联用技术探究纤维素酶生物传感器
一些实时、原位检测工具,如石英晶体微天平和表面等离子共振技术等能够检测在不同介质里面的信号,但由于不同介质的密度、粘度、折光率的差异,信号解析却是个难题。因此,一般都应用在介质差异可以忽略的情形,比如都是水性介质,但pH或者离子强度有差异。 近期,南京林业大学宋君龙教授课题组在Sensors and
OpenSPR助力乙型肝炎疫苗接种方案的研究
乙型肝炎病毒(HBV)每年导致全球超过80万人死亡。在亚洲和撒哈拉以南非洲等许多发展中地区,它仍是一个威胁全球健康的因素。HBV倾向于在人肝细胞中显现和复制,并且主要从母亲到后代进行垂直传播。此外,暴露于受感染的体液(即共用针头,与感染者性交)也会导致传播。HBV属于Hepadnaviridae病毒
方案8-用-FRET-法分析体内蛋白质的相互作用实验
实验材料a-GFP 抗体编码 CFP 和 YFP 的 DNA酵母细胞株系试剂、试剂盒分子生物学试剂合成的完全液体培养基酵母操作试剂编码目标内源蛋白的 DNA 片段仪器、耗材滤光镜装置图像分析软件显微镜设备分子生物学和酵母操作用的标准设备实验步骤一、实验设计因为体内 FRET 实验的复杂性,要获得有效
细胞表面抗原检测实验
免疫荧光抗体法 实验方法原理 用人结肠癌细胞为免疫原,免疫小鼠,制得鼠抗人结肠癌细胞表面抗原(Ag)的单克隆抗体 IgG(第一抗体),二者可以发生特异性的
细胞表面抗原检测实验
免疫荧光抗体法 实验方法原理 用人结肠癌细胞为免疫原,免疫小鼠,制得鼠抗人结肠癌细胞表面抗原(Ag)的单克隆抗体 IgG(第一抗体),二者可以发生特异性的
用-cDNA-芯片分析人类基因表达实验
实验材料 母板试剂、试剂盒 细菌细胞中的标记LB 培养基氨苄青霉素乙醇Super 肉汤培养基 甘油96孔碱裂液T low E 缓冲液10 X PCR 缓冲液 20 X SSC琥拍酸酐仪器、耗材 96深孔板和V 形塑料细胞培养皿水平微量培养板离心96孔多位点复制针1 加仑储存袋多微孔的带层带孔的振荡器
OpenSPR如何革新流式动力学检测(二)
OpenSPR如何在动力学检测中革新流式细胞术?虽然间接测量动力学值是了解生物治疗药物和受体之间发生的结合实验的一个很好的起点,但是直接测量要更全面和准确。在完成流式细胞术的高通量筛选后,我们已经确定了并获得了明显的亲和力。为了使您的研究更接近文章,表面等离子体共振(SPR)将提供一个简单、定量和无
相互作用蛋白的捕获实验
基本实验 实验材料 酵母菌 试剂、试剂盒
相互作用蛋白的捕获实验
相互作用蛋白的捕获试验要经过两次连续大量的酵母菌平板筛选过程。酵母菌含有lexA 融合合探针,报道基因和插入pJG4-5的GAL启动子控制下的cDNA表达文库。实验材料酵母菌试剂、试剂盒CM培养基乙酸锂PEGTEDMSO甘油氨苄青霉素仪器、耗材离心机分光光度计摇床培养箱实验步骤1. 为了转化文库,
相互作用蛋白的捕获实验
实验材料 酵母菌试剂、试剂盒 CM培养基乙酸锂PEGTEDMSO甘油氨苄青霉素仪器、耗材 离心机分光光度计摇床培养箱实验步骤 1. 为了转化文库,将约20 ml 含pSH18-34和pBait 的酵母菌EGY48培养液接种到Glc/CM-Ura-His 省却成分液体培养基中,于30℃培养过夜。2.
外泌体无创液体活检应用实例:外泌体表面蛋白检测用...
外泌体无创液体活检应用实例:外泌体表面蛋白检测用于肿瘤诊断 随着肿瘤研究的不断深入,肿瘤细胞特异性标志物已逐渐成为肿瘤诊断中必不可少的检测项目。常规的肿瘤标志物筛查可能需要进行组织活检,通过穿刺等方式取得病人活体样本。该方法需要确定病人的实体瘤位置,不方便应用于健康人群的疾病筛查,同时组织活检对
双通道OpenSPR2加速proteinA与IgG动力学精准检测
OpenSPR创新ZLLSPR技术即下一代表面等离子体共振(SPR)可用于分析所有类型的相互作用,可实时无标记检测包括蛋白-蛋白,蛋白-小分子,抗体-抗原,蛋白-核酸,蛋白-适体,蛋白-脂质,蛋白-碳水化合物等等。 其中研究的一个主要领域是蛋白-蛋白结合动力学的研究,因为这有助于研究人员了解涉及
西安光机所微纳光子学亚波长器件研究取得重要进展
微纳光子学主要研究在微纳尺度下光与物质相互作用的规律及其光的产生、传输、调控、探测和传感等方面的应用。微纳光子学亚波长器件能有效提高光子集成度,有望像电子芯片一样把光子器件集成到尺寸很小的单一光芯片上。纳米表面等离子体学是一新兴微纳光子学领域,主要研究金属纳米结构中光与物质的相互作用。它具有尺寸
蛋白质芯片技术信号检测分析
直接检测模式是将待测蛋白用荧光素或同位素标记,结合到芯片的蛋白质就会发出特定的信号,检测时用特殊的芯片扫描仪扫描和相应的计算机软件进行数据分析,或将芯片放射显影后再选用相应的软件进行数据分析。间接检测模式类似于ELISA方法,标记第二抗体分子。以上两种检测模式均基于阵列为基础的芯片检测技术。该法操作
等离子清洗机表面活化
等离子清洗机活化处理作用,物体表面必须具有良好的湿润性,才能够在涂漆、粘合、印刷或者压焊的时候与粘接材料很好的进行粘附附着。不仅仅含油和含脂的脏污会对润湿造成妨碍,很多材料的清洁表面也无法通过各种液体,或粘合剂和涂料进行充分的湿润。 液体滴落在材料表面,即使经过固化和干燥处理,也无法粘附于材料
PDMS芯片专用等离子表面处理机说明书WH1000Z(二)
设备安装(参考实物图片说明)1)喷枪的安装a. 将等离子喷枪 3 安装在支架部位,并用适当的固定措施使喷枪上的高压电缆、地线和气管不受强力拉扯、磨擦和尖锐物体的刺划。b. 调节喷枪安装组件使喷嘴和被处理工件之间的距离使其为 5~8mm 之间。(处理距离要根据材质、速度及后续工艺来试验调整,相对距离越
PDMS芯片专用等离子表面处理机说明书WH1000Z(一)
请您在使用本设备之前务必认真阅读本说明书, 并请严格按照本说明书的要求操作,避免在使用中出现失误。1. 等离子工作原理射流型大气低温等离子处理机由等离子发生器、气体输送系统及等离子喷头等部分组成。等离子发生器产生高压高频能量在喷嘴钢管中被激活和被控制的辉光放电中产生了低温等离子体,借助压缩空气将等离
伯克利实验室开发出具有单分子水平灵敏度的纳米传感器
(Nanowerk新闻)想象一下能够在自己的厨房测试你的食物,并且迅速判断它是否携带致命微生物。在劳伦斯伯克利国家实验室(伯克利实验室)进行的研究并且现在被Optokey商业化使这成为可能。 Optokey,总部在加利福尼亚的Hayward,已经开发出一种基于拉曼光谱技术的微型传感器,这种传感
原子力显微镜研究λDNA组蛋白的相互作用
对DNA与组蛋白的相互作用的认识是我们进一步了解其功能和探讨生命现象的重要基础。原子力显微镜(AFM)成像分辨率高、成像直观,且样品制备简单,不需要经过脱水、抽真空、染色、包埋等 这些会使生物分子结构发生一定改变的复杂处理过程,并可对生物分子在近生理条件下检测它们的动态结构信息。
怎么用NanoDrop检测蛋白浓度
nano测的不太准的,建议你还是用2100测一下,每种测序仪都有一个上机浓度要求,只要可以达到这个要求就能进行高通量测序了。
怎么用NanoDrop检测蛋白浓度
nano测的不太准的,建议你还是用2100测一下,每种测序仪都有一个上机浓度要求,只要可以达到这个要求就能进行高通量测序了。
药物筛选新技术及其应用进展HTS/HCS/SPR/微流控
医药产业是事关国家未来经济社会发展的重要战略性产业,是世界公认的最具发展前景的国际化高技术产业之一。新药研发带来的新技术创新和新品种上市是推动医药产业发展的源动力。随着现代科技的发展,计算机模拟设计、化学合成、生物提取、天然产物提取等领域的技术突飞猛进,使得目标化合物的获取更加快速高效,并在此基础上
Nature:利用几何指纹解开蛋白表面相互作用之谜
在一项新的研究中,来自瑞士生物信息学研究所的研究人员使用一种生成蛋白表面“指纹”的几何深度学习工具来描述对蛋白-蛋白相互作用至关重要的几何和化学特征。他们指出,他们假设的“指纹”导致了分子识别和新蛋白相互作用的重要方面的新见解。相关研究结果发表在2023年5月4日的Nature期刊上,论文标题为“D
酪蛋白激酶分析实验_用-β酪蛋白
实验材料β-酪蛋白(溶于水)有酪蛋白激酶活性的酶样品试剂、试剂盒[γ-32P] ATP 溶液酪蛋白激酶反应缓冲液TCASDS-PAGE 样品缓冲液仪器、耗材30℃ 水浴P81 磷酸纤维素膜离心管离心机实验步骤1. 每个鉴定反应按以下比例将各反应组分加入 1.5 ml 微量离心管中:4 μl 5 ×
汪尔康院士等:新方法快速确定癌症早期标志物
由中科院院士、长春应化所研究员汪尔康和复旦大学化学系教授孔继烈负责完成的“癌症早期诊断标志物的实时分析”项目,日前通过国家自然科学基金委员会组织的鉴定。专家认为,该成果对快速确定癌症标志物,以及对癌症预警和早期诊断具有重要的临床应用价值。 治疗癌症,早期诊断是关键。由汪尔康和孔继烈负责的科研团队,于
OpenSPR快速测定α乳清蛋白浓度方法详解
什么是浓度分析? 一般在浓度分析中,需加入不同浓度的目标分析物做测定,并根据测量的结果对每个样本的浓度创建一个标准曲线。随着分析物浓度的增加,与固定的结合配偶体的结合速率也增加。然后通过标准曲线确定未知的样品中分析物的浓度。 为什么我们要测量蛋白浓度? 蛋白对研究很重要,因为它们构成了植物和动物细
新生物学活性测定方法介绍
近年来,抗体药物的接连上市和重磅销售引发国内外抗体类生物治疗药物的研发热潮。活性测定是对药物的有效成分和含量以及药物效价的测定,是确保抗体类药物有效性的重要质控指标。现阶段抗体药物的活性分析方法主要是体外( in vitro) 检测,主要有基于细胞、转基因细胞以及新技术应用三方面对抗体药物活性测定的