微量制备毛细管电泳实验——多次分离

实验材料多肽:ACTH 4-10试剂、试剂盒血管紧缩素I和血管紧缩素II0.05 mmol/L 和 0.25 mmol/L 磷酸钠缓冲液(pH 2.30 存储于 4℃)0.1 mol/L 氢氧化钠仪器、耗材75 μm 内径的融合硅毛细管柱CE 仪器锥形微量瓶实验步骤1. 低压下(0.5 lb/in2)用以下溶液冲洗预处理毛细管:10 倍柱体积的 0.1 mol/L NaOH10 倍柱体积的水4 倍柱体积的 0.25 mol/L 磷酸钠缓冲液,pH 2.30。柱存储于 0.25 mol/L 磷酸钠缓冲液,pH 2.30。2. 将各 0.2 mg 的 ACTH4-10、血管紧缩素 I 和血管紧缩素 II 溶于 1 ml 0.05 mol/L 磷酸钠缓冲液,pH 2.30(终浓度 = 0.6 mg 多肽/ml)制备多肽混合物。冻存 100 μl 每管混合物于 -20℃。3. 在 0.5 lb/in2,10 s 内用低压注射上样 10~......阅读全文

微量制备毛细管电泳实验——多次分离

实验材料多肽:ACTH 4-10试剂、试剂盒血管紧缩素I和血管紧缩素II0.05 mmol/L 和 0.25 mmol/L 磷酸钠缓冲液(pH 2.30 存储于 4℃)0.1 mol/L 氢氧化钠仪器、耗材75 μm 内径的融合硅毛细管柱CE 仪器锥形微量瓶实验步骤1. 低压下(0.5 lb/in2

微量制备毛细管电泳实验——单次分离

实验材料多肽:ACTH 4-10试剂、试剂盒4:1(V/V)0.5 mol/L 磷酸钠缓冲液(pH 2.50)/乙烯乙二醇0.1 mol/L 氢氧化钠仪器、耗材150 μm 内径的融合硅毛细管柱CE 仪器锥形微量瓶实验步骤1. 制备多肽混合物和预处理柱子(见多次分离步骤 1 和 2)。2. 在 0.

微量制备毛细管电泳实验

多次分离 单次分离             实验方法原理 实验材料 多肽:ACTH 4-10

微量制备毛细管电泳实验

实验方法原理 实验材料 多肽:ACTH 4-10试剂、试剂盒 血管紧缩素I和血管紧缩素II 0.05 mmol/L 和 0.25 mmol/L 磷酸钠缓冲液(pH 2.30 存储于 4℃)0.1 mol/L 氢氧化钠仪器、耗材 75 μm 内径的融合硅毛细管柱CE 仪器锥形微量瓶实验步骤 1. 低压

桥粒的制备实验_分级分离桥粒

实验材料桥粒试剂、试剂盒尿素溶液仪器、耗材匀浆器实验步骤1. 在最终的桥粒沉淀中加 20 ml 尿素溶液,用玻璃/Teflon 匀浆器匀浆,用尿素溶液稀释匀浆物使蛋白质浓度为 0.15 mg/ml,用 1 mol/L 的 Tris-HCl 调节溶液的 pH 值到 9.0 在室温至少搅拌 1 小时。尿

酵母DNA微量制备

实验概要本实验介绍了分别从40ml和5ml酵母培养液中制备酵母DNA的操作流程。实验步骤1. 酵母DNA微量制备(40ml)   1) 在125ml三角瓶中用40ml YPD培养液在30℃条件下培养细胞达最大生长量(过夜)。   2) 将上述培养物移入螺盖离心管,用医用离心机或Sorvall SS-

毛细管电泳分离因素分离电压

分离电压在CE中,分离电压也是控制电渗的一个重要参数。高电压是实现CE快速、高效的前提,电压升高,样品的迁移加大,分析时间缩短,但毛细管中焦耳热增大,基线稳定性降低,灵敏度降低;分离电压越低,分离效果越好,分析时间延长,峰形变宽,导致分离效率降低。因此,相对较高的分离电压会提高分离度和缩短分析时间,

正常细胞常规核型的标本制备实验_微量全血培养

正常细胞常规核型的标本制备可应用于:(1)进行核型分析;(2)与肿瘤核型进行对比研究。实验方法原理采用微量全血培养人体外周血中淋巴细胞,在淋巴母细胞分裂高峰时加入秋水仙素,破坏细胞纺锤体的形成,使细胞停止在分裂中期。然后收集细胞,低渗处理,使细胞胀大,染色体伸展。接着进行固定并除去中期分裂相中残存的

毛细管电泳分离因素温度

温度温度影响分离重现性和分离效率,控制温度可以调控电渗流的大小。温度升高,缓冲液粘度降低,管壁硅轻基解离能力增强,电渗速度变大,分析时间减短,分析效率提高。但温度过高,会引起毛细管柱内径向温差增大,焦耳热效应增强,柱效降低,分离效率也会降低。

毛细管电泳影响分离因素

  毛细管电泳影响分离因素  1.缓冲液  缓冲试剂的选择主要由所需的pH决定,在相同的pH下,不同缓冲试剂的分离效果不尽相同,有的可能相差甚远。CE中常用的缓冲试剂有:磷酸盐、硼砂或硼酸、醋酸盐等。  缓冲盐的浓度直接影响到电泳介质的离子强度,从而影响Zeta电势,而Zeta电势的变化又会影响到电

毛细管电泳的分离模式

毛细管区带电泳(Capillary Zone Electrophoresis, CZE)最常见的模式,用以分析带电溶质。样品中各个组分因为迁移率不同而分成不同的区带。为了降低电渗流和吸附现象,可将毛细管内壁做化学修饰。毛细管凝胶电泳(Capillary Gel Electrophoresis,CGE

毛细管电泳的分离原理

电泳和电渗流并存,在不考虑相互作用的前提下,粒子在毛细管内电介质中的迁移速率是两种速率的矢量和,在典型的毛细管电泳分离中,溶质的分离基于溶质间电泳速率的差异。电渗流的速率绝对值一般大于粒子的电泳速率,并有效地成为毛细管电泳的驱动力。溶质从毛细管的正极端进样,带正电的粒子最先流出,中性粒子次之,带负电

毛细管电泳的分离模式

   (1)毛细管区带电泳,用以分析带电溶质(为了降低电渗流和吸附现象,可将毛细管内壁涂层)。  (2)毛细管凝胶电泳,在毛细管中装入单体,引发聚合形成凝胶,主要用于测定蛋白质、DNA等大分子化合物。另有将聚合物溶液等具有筛分作用的物质,如葡聚糖、聚环氧乙烷,装人毛细管中进行分析,称毛细管无胶筛分电

催化剂毛细管电泳仪分类

催化剂毛细管电泳仪分类有多种。1、按分离目的可分:实验室催化剂毛细管电泳仪和工业催化剂毛细管电泳仪。2、按功能可分:分析型催化剂毛细管电泳仪和制备型催化剂毛细管电泳仪。3、按灵敏性可分:微量催化剂毛细管电泳仪和痕量催化剂毛细管电泳仪。4、按作用可分:催化剂定量分析毛细管电泳仪和催化剂定性分析毛细管电

催化剂毛细管电泳仪分类方法

催化剂毛细管电泳仪分类有多种。1、按分离目的可分:实验室催化剂毛细管电泳仪和工业催化剂毛细管电泳仪。2、按功能可分:分析型催化剂毛细管电泳仪和制备型催化剂毛细管电泳仪。3、按灵敏性可分:微量催化剂毛细管电泳仪和痕量催化剂毛细管电泳仪。4、按作用可分:催化剂定量分析毛细管电泳仪和催化剂定性分析毛细管电

催化剂毛细管电泳仪分类

 催化剂毛细管电泳仪分类有多种。1、按分离目的可分:实验室催化剂毛细管电泳仪和工业催化剂毛细管电泳仪。2、按功能可分:分析型催化剂毛细管电泳仪和制备型催化剂毛细管电泳仪。3、按灵敏性可分:微量催化剂毛细管电泳仪和痕量催化剂毛细管电泳仪。4、按作用可分:催化剂定量分析毛细管电泳仪和催化剂定性分析毛细管

植物线粒体制备及其亚结构分级分离实验

实验材料黄化苗                                                          试剂、试剂盒匀浆缓冲液                                                                  清洗缓冲液  

植物线粒体制备及其亚结构分级分离实验

实验材料黄化苗试剂、试剂盒匀浆缓冲液清洗缓冲液Percoll 梯度溶液仪器、耗材分光光度计实验步骤在选好植物材料和匀浆缓冲液后,接下来关键的因素包括匀浆方法、缓冲液的 pH、使用的缓冲液与植物组织之间的比例、研磨时间及温度等(见注释 5) 。3.1 匀浆根据植物组织的不同可以采取不同的匀浆方法,或者

毛细管电泳法的毛细管电泳的分离模式

毛细管区带电泳(Capillary Zone Electrophoresis, CZE)最常见的模式,用以分析带电溶质。样品中各个组分因为迁移率不同而分成不同的区带。为了降低电渗流和吸附现象,可将毛细管内壁做化学修饰。毛细管凝胶电泳(Capillary Gel Electrophoresis,CGE

微量分离离心机种类

微量分离离心机种类有多种。1、按分离目的可分:实验室微量分离离心机和工业微量分离离心机。2、按使用范围可分:专用型微量分离离心机和普通型微量分离离心机。3、按转子结构可分:水平转子微量分离离心机和角转子微量分离离心机。4、按温控可分:冷冻微量分离离心机和常温微量分离离心机。5、按产地可分:国产微量分

微量分离离心机种类

微量分离离心机种类有多种。1、按分离目的可分:实验室微量分离离心机和工业微量分离离心机。2、按使用范围可分:专用型微量分离离心机和普通型微量分离离心机。3、按转子结构可分:水平转子微量分离离心机和角转子微量分离离心机。4、按温控可分:冷冻微量分离离心机和常温微量分离离心机。5、按产地可分:国产微量分

高效毛细管电泳法的缺点

  毛细管电泳具备如下优点:  (1) 高效 塔板数目在105-106 片/m 间,当采用CGE 时   毛细管电泳色谱图,塔板数目可达107 片/m 以上;  (2) 快速 一般在十几分钟内完成分离;  (3) 微量 进样所需的样品体积为nL 级;  (4) 多模式 可根据需要选用不同的分离模式且

毛细管电泳的优点和缺点

毛细管电泳具备如下优点: (1) 高效 塔板数目在105-106 片/m 间,当采用CGE 时   毛细管电泳色谱图,塔板数目可达107 片/m 以上; (2) 快速 一般在十几分钟内完成分离; (3) 微量 进样所需的样品体积为nL 级; (4) 多模式 可根据需要选用不同的分离模式且仅

毛细管电泳的分离因素介绍

缓冲液缓冲试剂的选择主要由所需的pH决定,在相同的pH下,不同缓冲试剂的分离效果不尽相同,有的可能相差甚远。CE中常用的缓冲试剂有:磷酸盐、硼砂或硼酸、醋酸盐等。缓冲盐的浓度直接影响到电泳介质的离子强度,从而影响Zeta电势,而Zeta电势的变化又会影响到电渗流。缓冲液浓度升高,离子强度增加,双电层

毛细管电泳根据分离模式分类

毛细管电泳根据分离模式不同可以归结出多种不同类型的毛细管电泳。毛细管电泳的多种分离模式,给样品分离提供了不同的选择机会,这对复杂样品的分离分析是非常重要的。毛细管电泳类型类型缩写说明1 单根毛细管毛细管区带电泳CZE毛细管和电极槽灌有相同的缓冲液毛细管等速电泳CITP使用两种不同的CZE 缓冲液毛细

毛细管电泳的分离模式介绍

  (1)毛细管区带电泳,用以分析带电溶质。为了降低电渗流和吸附现象,可将毛细管内壁涂层。  (2)毛细管凝胶电泳,在毛细管中装入单体,引发聚合形成凝胶,主要用于测定蛋白质、DNA等大分子化合物。另有将聚合物溶液等具有筛分作用的物质,如葡聚糖、聚环氧乙烷,装入毛细管中进行分析,称毛细管无胶筛分电泳,

毛细管电泳的分离电压介绍

  在CE中,分离电压也是控制电渗的一个重要参数。高电压是实现CE快速、高效的前提,电压升高,样品的迁移加大,分析时间缩短,但毛细管中焦耳热增大,基线稳定性降低,灵敏度降低;分离电压越低,分离效果越好,分析时间延长,峰形变宽,导致分离效率降低。因此,相对较高的分离电压会提高分离度和缩短分析时间,但电

毛细管电泳分离因素进样

进样CE的常规进样方式有两种:流体力学和电迁移进样。电迁移进样是在电场作用下,依靠样品离子的电迁移和(或)电渗流将样品注入,故会产生电歧视现象,会降低分析的准确性和可靠性,但此法尤其适用于粘度大的缓冲液和CGE情况。流体力学进样是普适方法,可以通过虹吸、在进样端加压或检测器端抽空等方法来实现,但选择

毛细管电泳的分离因素介绍

  温度  温度影响分离重现性和分离效率,控制温度可以调控电渗流的大小。温度升高,缓冲液粘度降低,管壁硅轻基解离能力增强,电渗速度变大,分析时间减短,分析效率提高。但温度过高,会引起毛细管柱内径向温差增大,焦耳热效应增强,柱效降低,分离效率也会降低。  添加剂  在电解质溶液中加入添加剂,例如中性盐

毛细管电泳的分离分析方法

  CE 是在传统的电泳技术基础上于本世纪60 年代末由Hjerten 发明的,其利用小的毛细管代替传统的大电泳槽,使电泳效率提高了几十倍。此技术从80 年代以来发展迅速,是生物化学分析工作者与生化学家分离、定性多肽与蛋白类物质的有利工具。CE 根据应用原理不同可分为以下几种;毛细管区带电泳Capi