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Raf蛋白Ras结合结构域的简并进化库合成

实验材料寡核苷酸引物Tag 聚合酶BL21 电转感受态细胞试剂、试剂盒氨苄青霉素卡那霉素仪器、耗材琼脂糖凝胶实验步骤3.1 概论3.1.1 PCA 对空间排列的要求PCA 片段的三维朝向对于 PCA 报告蛋白是否能正确折叠至关重要,它取决于形成复合体的目的蛋白 N 端或 C 端的朝向(图 15.1 示意了在连接设计中对空间位置的考虑)。因此,在设计蛋白一PCA 片段融合体时,以何种方式将蛋白质片段连接在一起使其能够折叠形成天然结构是非常重要的。融合蛋白能否正确折叠受融合蛋白的末端朝向和片段间接头(linker) 长度两个因素的影响。我们将片段 GGGGS 应用于多种不同蛋白质,证明这个序列在大肠杆菌、酵母和哺乳动物细胞表达系统中效果都比较好。我们认为这个序列可以改善融合蛋白的弹性和可溶性,从而有利于其组装,而且由于此序列中不含天然蛋白酶识别位点,确保了融合蛋白的稳定性。虽然此类的接头受到青睐,但并不表示使用它就一定能得到可以互补......阅读全文

PNAS-陈雁小组-ERK信号通路调控研究

近日,《美国国家科学院院刊》(PNAS)发表了中科院上海生命科学研究院营养科学研究所陈雁研究组关于ERK信号通路调控的最新研究成果。该研究发现了一个新的Raf-1调控蛋白,第一次揭示了Raf-1的空间调控方式,并提出了一种在高尔基体上遏制ERK信号通路的新机制,为未来研究肿瘤细胞过度增生的分子机理进

Nature:靶向“无药可及”的癌蛋白

  长期以来,科学家们都致力于开发针对癌症相关蛋白 KRAS 的药物,但却一直没有取得成功。一种靶向该癌蛋白细胞定位的新策略重新点燃了失去的热情。   人类的 RAS 基因因两个原因背负着沉重的恶名。首先,它们构成了人类癌症中最频繁突变的癌基因家族,每 3 个癌症病例就有一个有 RAS 突变。

肿瘤靶向治疗的2个重要信号通路-RAS与mTOR

   随着肿瘤研究的发展,人们开始认识到不同肿瘤的基因改变和信号通路改变有着很大的不同,针对个体特征的基因改变和信号通路的改变进行研究,是一种有效的肿瘤治疗战RAS、mTOR都是肿瘤常见的生物标志物,生物标志物检测有助于推动抗肿瘤药物的研发。   RAS癌基因是人类肿瘤中最常见的癌基因,在血

G蛋白偶联受体信号通路激活的MAPK/Erk信号通路图

研究证实,受体酪氨酸激酶、G蛋白偶联的受体和部分细胞因子受体均可激活ERK信号转导途径。如:生长因子与细胞膜上的特异受体结合,可使受体形成二聚体,二聚化的受体使其自身酪氨酸激酶被激活;受体上磷酸化的酪氨酸又与位于胞膜上的生长因子受体结合蛋白2(Grb2)的SH2结构域相结合,而Grb2的SH3结构域

MAPK/Erk信号通路图

MAPK,丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPKs)是细胞内的一类丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。研究证实,MAPKs信号转导通路存在于大多数细胞内,在将细胞外刺激信号转导至细胞及其核内,并引起细胞生物学反应(如细胞增殖、分化、转化及凋亡等)的过程中

G蛋白偶联受体信号通路激活的MAPK/Erk信号通路图

研究证实,受体酪氨酸激酶、G蛋白偶联的受体和部分细胞因子受体均可激活ERK信号转导途径。如:生长因子与细胞膜上的特异受体结合,可使受体形成二聚体,二聚化的受体使其自身酪氨酸激酶被激活;受体上磷酸化的酪氨酸又与位于胞膜上的生长因子受体结合蛋白2(Grb2)的SH2结构域相结合,而Grb2的SH3结构域

神经干细胞植入脑胶质瘤鼠的治疗性变化

免疫组化染色(×400)见神经干细胞移植后脑胶质瘤模型大鼠肿瘤组织Caspase-3的表达(箭头所指)   神经干细胞植入荷瘤鼠体内肿瘤后,可使肿瘤细胞的生长、增殖局限化,但相关机制尚不清楚。Ras/Raf/Mek/Erk信号级联通路的异常激活在胶质瘤发生中起至关重要的作用,抑制该信号通路的过度激

Science背靠背丨相分离如何促进膜受体信号转导

  相分离在膜受体及其下游信号转导通路中常有发生。以T细胞活化过程为例,TCR被Src家族激酶磷酸化后,招募胞内酪氨酸激酶ZAP70,后者磷酸化骨架蛋白上T细胞活化linker(LAT)的酪氨酸位点。磷酸化后的LAT可与接头蛋白Grb2的SH2/SH3结构域、GEF蛋白的脯氨酸富含域形成互作网络,发

Raf 蛋白 Ras 结合结构域的简并进化库合成以及利...(一)

Raf 蛋白 Ras 结合结构域的简并进化库合成以及利用片段互补法快速筛选二氢叶酸还原酶的快速折叠且稳定的克隆实验实验材料 寡核苷酸引物Tag 聚合酶BL21 电转感受态细胞试剂、试剂盒 氨苄青霉素卡那霉素仪器、耗材 琼脂糖凝胶实验步骤 3.1 概论3.1.1 PCA 对空间排列的要求PCA 片

Raf 蛋白 Ras 结合结构域的简并进化库合成以及

Raf 蛋白 Ras 结合结构域的简并进化库合成以及利用片段互补法快速筛选二氢叶酸还原酶的快速折叠且稳定的克隆            

新药安卓健为Kras突变恶性肿瘤推荐治疗方案

  Kras突变的恶性肿瘤尚无公开的针对性治疗方案。作为Ras/Raf/MEK/ERK细胞信号传导通路上游基因,Ras(包括Kras、Nras、Hras)基因抑制剂的成功开发极大程度上促进了对Kras突变恶性肿瘤的治疗研究。   研究表明,所有真核细胞中均存在Ras/Raf/MEK/ERK这一细胞

《Science》光遗传技术开创癌症研究新见解

  8月31日《Science》报道,一种形式的非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)突变可能通过模糊细胞对关键生长信号的感知来驱动肿瘤形成。由加州大学旧金山研究所领导的这项研究对许多人类癌症缺陷机制具有重要意义。  健康细胞依靠Ras/Erk生长信号途径中

小常识:原癌基因(oncogene)的表达及其产物的功能介绍

  原癌基因是细胞内与细胞增殖相关的基因,是维持机体正常生命活动所必须的,在进化上高等保守。当原癌基因的结构或调控区发生变异,基因产物增多或活性增强时,使细胞过度增殖,从而形成肿瘤简称为TSG。   原癌基因是细胞的正常基因,其表达产物对细胞的生理功能极其重要,只有当原癌基因发生结构改变或过度表达

小常识:原癌基因(oncogene)的表达及其产物的功能介绍

  原癌基因是细胞内与细胞增殖相关的基因,是维持机体正常生命活动所必须的,在进化上高等保守。当原癌基因的结构或调控区发生变异,基因产物增多或活性增强时,使细胞过度增殖,从而形成肿瘤简称为TSG。   原癌基因是细胞的正常基因,其表达产物对细胞的生理功能极其重要,只有当原癌基因发生结构改变或过度表达

小常识:原癌基因(oncogene)的表达及其产物的功能介绍

  原癌基因是细胞内与细胞增殖相关的基因,是维持机体正常生命活动所必须的,在进化上高等保守。当原癌基因的结构或调控区发生变异,基因产物增多或活性增强时,使细胞过度增殖,从而形成肿瘤简称为TSG。   原癌基因是细胞的正常基因,其表达产物对细胞的生理功能极其重要,只有当原癌基因发生结构改变或过度表达

MAPK信号通路研究工具

信号通路研究工具促细胞分裂原活化蛋白激酶(MAP kinase)是一类丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,由于不同的细胞外刺激或介导细胞表面至细胞核的信号转导而被激活。 结合其它信号途径,它们能够改变转录因子的磷酸化状态。受控的MAPK级联反应系统参与细胞增殖和分化,但当其活力失控时会导致肿瘤。据报道,三种主要

原癌基因(oncogene)的表达及其产物的功能

原癌基因是细胞内与细胞增殖相关的基因,是维持机体正常生命活动所必须的,在进化上高等保守。当原癌基因的结构或调控区发生变异,基因产物增多或活性增强时,使细胞过度增殖,从而形成肿瘤简称为TSG。原癌基因是细胞的正常基因,其表达产物对细胞的生理功能极其重要,只有当原癌基因发生结构改变或过度表达时,才有可能

高内涵——基于FRET分析活细胞中的ERK信号转导

Extracellular signal-regulated kinase(ERK)是胚胎发生,细胞分化,细胞增殖和细胞死亡调控的关键组成部分。ERK途径起源于质膜中的活化受体,并通过Ras/Raf/MEK至ERK(图1)。 图1. Ras/Raf/MEK/ERK信号级联将信号从细胞表面受

Cancer cell:制药巨头研发新分子全面狙击RAF突变肿瘤

  一组来自美国的研究小组发现,在某些情况下,使用放疗方法治疗皮肤癌可能导致弊大于利。他们的论文发表在《Nature Immunology》杂志上,研究小组描述了一种以前未知的机制,在放射治疗时有助于免疫抑制。巴黎大学的Guido Kroemer 和 Laurence Zitvogel 在该杂志中对

基石药业连续提交三个新药临床试验申请

  近日,基石药业(苏州)有限公司(以下简称“基石药业”或“公司”)在海外连续提交了三个其自主研发的新药临床试验申请,分别是新型抗细胞毒T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)全人源单克隆抗体CS1002、程序性死亡受体1(PD-1)抗体CS1003以及丝裂原活化蛋白激酶激酶(MEK)小分子抑制剂CS3

微量热技术(Microcalorimetry)

微量热法(包括等温滴定量热和差示扫描量热)是近年来发展起来的一种研究生物热力学与生物动力学的重要结构生物学方法,它通过高灵敏度、高自动化的微量量热仪连续和准确地监测和记录一个变化过程的量热曲线,原位(in situ)、在线(on-line)和无损伤地同时提供热力学和动力学信息。 

阿斯利康/默沙东selumetinib获美FDA优先审查,总缓解率66%

  英国制药巨头阿斯利康(AstraZeneca)与合作伙伴默沙东(Merck & Co)近日联合宣布,美国食品和药物管理局(FDA)已受理靶向抗癌药selumetinib的新药申请(NDA)并授予了优先审查。此次NDA申请批准selumetinib用于治疗3岁及以上神经纤维瘤病1型(NF1

孙毅/谢传明合作团队揭示E3连接酶FBXW7的抑癌新机制

  FBXW7是一种抑制肿瘤生长的SCF E3泛素连接酶。在大多数情况下,FBXW7识别磷酸化底物并促进它的泛素化降解【1】。目前报道,FBXW7主要通过泛素化降解几个关键促癌蛋白,包括c-Myc、MCL-1、c-Jun、Notch1和cyclin E而发挥抑癌功能。SHOC2充当RAS和RAF的支

基石药业自主研发的小分子抑制剂已获临床试验批准

  中国苏州,2018年7月30日——基石药业(苏州)有限公司(以下简称“基石药业”)今日宣布,其自主研发的小分子MEK1/2抑制剂CS3006的临床试验申请已获得国家药品监督管理局(“国家药监局”)的批准,自今年国家药监局4月宣布受理CS3006的临床试验申请日期仅3个月时间。  CS3006研发

吴瑞:中国旅美生化和分子生物学家的贡献

D. 1980 至1990年 李文华(Lee,Wen-Hwa)(加州大学圣迭哥分校,得州大学) 贡献:发现和克隆第一个人的肿瘤抑制基因,发现这个基因的突变是一些癌症的主要原因。 影响:他的工作给人类癌症遗传研究带来进化。这个知识的应用有益于一些癌症的诊断、预防和治疗

同济大学孙方霖JBC解析癌症与表观遗传

  来自同济大学、清华大学的研究人员近日发表了题为“Oncogene Ras/Phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K) signaling targets histone H3 acetylation at lysine K56”的研究论文,证实在肿瘤细胞中癌基因Ra

结直肠癌(CRC)的常见肿瘤标志物

  结直肠癌(colorectalcancer,CRC )是威胁人类健康的主要恶性肿瘤之一,其发病率和死亡率均呈逐年上升趋势。据统计,我国2010-2014年结肠癌和直肠癌5年生存率分别为57.6%和56.9%。越来越多的证据表明,CRC不是单一、一致的疾病类型,而是由一系列基因改变组成的分子异构疾

2014年药物研发最热门靶点逐个述评

  1.癌症  2000年后肿瘤信号网络被逐渐阐释、完善,大量的分子靶向药物进入临床研究、走上市场,近年针对受体酪氨酸激酶靶点如Bcr-Abl(见1.1)、VEGF/VEGFRs(见1.2)、PDGF/PDGFRs(见1.3)、EGFR/HER2(见1.5)、ALk(见1.7)已有多个药物上市,me

攻克黑色素瘤耐药性又近一步

  靶向疗法是针对黑色素瘤的一种有效治疗方案。其中,BRAF抑制剂和MEK抑制剂的组合疗法已得到广泛应用,可惜的是,一些患者会对治疗产生获得性耐药。近日,美国费城的Thomas Jefferson University的科学家们发现,BRAF上的一个位点对获得性耐药有影响,他们希望这一发现能导致更好

Jak/Stat信号通路图

JAK-STAT信号通路是近年来发现的一条由细胞因子刺激的信号转导通路,参与细胞的增殖、分化、凋亡以及免疫调节等许多重要的生物学过程。与其它信号通路相比,这条信号通路的传递过程相对简单,它主要由三个成分组成,即酪氨酸激酶相关受体、酪氨酸激酶JAK和转录因子STAT。信号传递过程如下:细胞因子与相应的